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預(yù)先裝有特定于印版的默認(rèn)設(shè)置。這些設(shè)置順序可以編輯如果需要圖8.協(xié)議編輯器模式允許創(chuàng)建和編輯實(shí)驗(yàn)協(xié)議。協(xié)議由一系列環(huán)境組成控制和/或每個(gè)融合步驟??梢愿鶕?jù)需要添加和更改步驟。準(zhǔn)備好協(xié)議后,可以使用“運(yùn)行”選項(xiàng)卡來執(zhí)行它。在下面概述的培養(yǎng)方案示例中,通過將壓力(27.6kPa[4ps]持續(xù)15秒)固定到孔組中,將ells從8孔加載6和8通過以345kPa(5psi)的流速流動(dòng)4和5孔5分鐘,將未捕獲的細(xì)胞從腔室中沖洗掉。接下來的孔被灌注從孔1提取30分鐘的基線洗滌液或生長液。將Cls從孔2暴露于誘導(dǎo)劑1小時(shí),然后將誘導(dǎo)劑用H2O沖洗掉。從1孔中洗滌或生長溶液30分鐘。在第3孔中對第二個(gè)誘導(dǎo)劑重復(fù)上述??兩個(gè)步驟。CAX2-MXT20歧管,使用setpaintof37吧。 規(guī)格產(chǎn)品訂購信息,續(xù)培虹口區(qū)MerckSNAPi.d.2.0加速器Merck儀器哪家優(yōu)惠益啟生物提供專業(yè)的細(xì)胞計(jì)數(shù)器。
x @ -FAgo過濾器(或等效過濾器)建議在保溫瓶和真空源之間使用,例如o保護(hù)真空源免受污染?!駥⒄婵掌窟B接到真空源的真空管●前肢●封閉劑,例如脫脂/低脂干奶(0.5%以下),酪蛋白,牛血清白蛋白(BSA)或其他市售的封閉劑,例如blok * -CH緩沖液(請參閱表5)抗體(單克隆和/或多克?。?,檢測試劑●洗滌緩沖液:Tris或磷酸鹽緩沖鹽溶液,pH 7.4,補(bǔ)充了Tween @ 20表面活性劑(TBST)或PBST)●轉(zhuǎn)移蛋白的印跡吸筆座尺寸比較大印跡尺寸(厘米)多印跡4.5 x8.4小型的7.5 x 8.48.5 x 13.5。 一般準(zhǔn)則●如果蛋白質(zhì)已經(jīng)轉(zhuǎn)移到已經(jīng)干燥的PVDF膜上,請用100%重新潤濕印跡甲醇,然后在組裝前用蒸餾水沖洗。如果蛋白質(zhì)已轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜干燥后,用蒸餾水重新
P i.d.o 2.0SNAP i.d. @ 2.0多印跡框架迷你相框中框阻塞溶液量每孔15毫升30毫升30毫升抗體量每孔2.5 mL5毫升10毫升洗滌緩沖液*量每孔4x 15 mL每個(gè)4x 30 mL每個(gè)4x 30 mL●Tris或磷酸鹽緩沖鹽溶液,補(bǔ)充有0.1%Tweene 20表面活性劑在計(jì)算免疫檢測所需的抗體量時(shí),三個(gè)要素對于成功檢測出蛋白質(zhì)并獲得了高質(zhì)量的印跡(低背景,高信號(hào)):●樣品類型和凝膠上樣濃度●一級和二級抗體濃度●檢測試劑的種類和靈敏度下表中的所有抗體均使用LuminataTM Forte化學(xué)發(fā)光檢測試劑進(jìn)行了測試。對于SNAP i.d. @ 2.0系統(tǒng),抗體濃度高于標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測中的濃度,但濃度較低體積。 表3.標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測中一抗稀釋的實(shí)例 SNAPi.d.?2.0免疫檢益啟生物是默克細(xì)胞計(jì)數(shù)器的代理商。
體回收率差。 印跡大會(huì)和總議定書 1.用支撐層(藍(lán)色邊緣)握住吸墨紙托并弄濕膜層(白色)在潤濕過程中溢出水提供的托盤。不要弄濕支撐層。放置濕的滾動(dòng)板上的污點(diǎn)固定器。2.如果需要,將印跡預(yù)先在甲醇和水中浸濕,然后將其放置在印跡支架中心,蛋白質(zhì)面朝下。注意:印跡不得超過材料中指定的尺寸必填部分。3.輕輕滾動(dòng)印跡以去除氣泡,然后稀釋印跡保持并滾動(dòng)一次。4.打開吸墨紙固定框架,用力將吸墨紙固定在蛋白質(zhì)面朝上,然后將其放入框架中。一個(gè)缺口吸墨架可確保正確放置在框架中。注意:如果只在框架中運(yùn)行一個(gè)MultiBlot,請放置孔空白卡在第二口井中。5.關(guān)閉并鎖定框架。加入30 mL封閉溶液(MultiBlot為15毫升)。向下按框架并轉(zhuǎn)動(dòng)系統(tǒng)旋鈕施加真空。當(dāng)框架完全為空時(shí),關(guān)閉真空。注意:如果使用抗體回收托上海益啟生物細(xì)胞分析儀訂購方便。閔行區(qū)MerckSNAPi.d.2.0加速器Merck儀器聯(lián)系電話
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盤,請?jiān)诓襟E5之后插入托盤。有關(guān)詳細(xì)信息,請參閱“抗體恢復(fù)”部分。 6.在整個(gè)表面上涂適量的一抗吸墨紙架的數(shù)量(對于MultiBlot為2.5毫升,對于迷你吸墨紙為5毫升,或10 mL用于Midi印跡)。7.在室溫下孵育10分鐘。解決方案將是吸收到污點(diǎn)固定器中,表面可能會(huì)變干。重要提示:請勿在吸塵器清潔后再使用真空吸塵器。孵育10分鐘。8.向下壓框架并施加真空。等待5-8秒,直到框架完全是空的。9.在連續(xù)運(yùn)行真空的情況下,添加30 mL洗滌緩沖液(MultiBlot為15毫升)。重復(fù)洗滌步驟3次以上(總共4次洗滌)。當(dāng)框架完全為空時(shí),將TURN真空關(guān)閉。10.在印跡架的表面上涂適量的二抗(對于多印跡,為2.5 mL,5毫升用于迷你印跡,或10毫升用于Midi印跡)。在室溫下孵育10分鐘,然后青浦區(qū)Merck細(xì)胞跨膜電阻儀Merck儀器聯(lián)系電話
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