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測(cè) 注意:所有抗體均使用0.5%NFDM作為封閉劑和Luminata?Forte Western HRP進(jìn)行測(cè)試作為化學(xué)發(fā)光試劑的底物。 印跡阻止 ?SNAPi.d.?2.0系統(tǒng)與比較常用的封閉劑兼容,包括脫脂/低脂干燥牛奶,牛血清白蛋白(BSA)和酪蛋白。許多其他市售阻滯劑也兼容(請(qǐng)參閱表5)。?為了確保比較佳的墨量通過吸墨架,必須完全封閉封閉液溶解且不含所有顆粒物質(zhì)。在某些情況下,可能有必要降低封閉劑以達(dá)到所需的流量。?不建議使用濃度高于0.5%的脫脂/低脂干奶。?封閉劑應(yīng)在含有0.1%Tween?20的tris或磷酸鹽緩沖鹽溶液中制備表面活性劑,以降低表面張力并確保封閉劑在印跡架上均勻分布表面。?為確保抗體在孵育步驟中均勻分布,請(qǐng)?jiān)诜忾]液中稀釋抗體,包含Tween?20表面活性劑。 如何使上海益啟生物Merck儀器訂購(gòu)方便。黃浦區(qū)Merck超濾杯Merck儀器訂購(gòu)
膜Immobilon-EPVDF,0.45μm,7cmx8.4cm薄片IEVH0785050Imobilong-EPVDF,0.45μm,8.5cmx10m卷IEVHB5R1個(gè)Immbilon@-EPVDF,0.45μm,26.5cmx1.875m卷IEVH000051個(gè)Imobllon-EPVDF,0.45um,印跡三明治,7cmx8.4cmIESN0785220Imbilon9-EPVDf,0.45um,BottingSandwich,8.5厘米x13.5厘米IESN081321個(gè)Immoblon-PPVDF,0.45μm,7厘米x8.4毫米片材IPVH0785050Immobilon0-pPVDF,0.45μm,8.5厘米x13.5厘米片材IPVH0813010Imobln-pPVDF崇明區(qū)MerckWB實(shí)驗(yàn)加速器Merck儀器哪家好上海益啟生物的超濾杯詢價(jià)公司電話。
Westem HRP基材。高背景分鎖不足更改為不同的阻止解決方案。吸筆架不夠濕組裝前,先將吸墨紙架弄濕。阻塞解決方案可能有始終準(zhǔn)備新鮮的0.5%脫脂/低脂干奶。降級(jí)的抗體濃度過高降低抗體的濃度。吸筆架朝上放置將印跡架朝上放在蛋白素框架中。在框架中洗滌不足進(jìn)行至少4次每次30 mL的洗滌。添加清洗劑時(shí),確保真空連續(xù)運(yùn)行緩沖。整個(gè)系統(tǒng)電平不一致的信號(hào)確保系統(tǒng)在平坦的水平表面上。污點(diǎn)抗體不均勻補(bǔ)充封閉液和抗體稀釋劑遍及整個(gè)表面0.1%Tween 20表面活性劑。吸墨紙架使用小量移液器(例如5毫升),慢慢散布整個(gè)印跡中的抗體。應(yīng)用至少2.5 mL(用于MultBlot),5 mL(用于Mini blot)或10 mL(用于Midi印跡)抗體??贵w體積低沒有抗體回收盤確??贵w中的孔,回收托盤algn
密封的平板/m歧管組件放在倒置顯微鏡。6.在擴(kuò)展的灌注實(shí)驗(yàn)中,定期將7孔倒空至避免出口溢流到歧管和灌注系統(tǒng)中。在CellASICOONX2軟件的“運(yùn)行”選項(xiàng)卡上,單擊“暫?!卑粹o。按下儀器上或“工具”下拉菜單中的“密封”按鈕在下拉菜單中,單擊開封板。從板,并抽吸良好。7.將歧管重新密封到板上,然后在在“運(yùn)行”選項(xiàng)卡上,單擊“恢復(fù)”以重新啟動(dòng)每個(gè)融合協(xié)議。解決方案切換1.從選定的進(jìn)水口(1-5)吸出溶液。加至350μL所需的解決方案。如果少于四個(gè)單位(A-D)使用時(shí),用緩沖液填充未使用的進(jìn)口井,以防只托水。2.根據(jù)以下說明將微流體板密封到ONIX2歧管上:CellASIC@ONIX2微流體系統(tǒng)用戶指南。3.打開CelIASICOONIX2軟件,在下拉列表,然后單擊ProtocolEditor選上海益啟生物電阻儀訂購(gòu)方便。
P i.d.o 2.0SNAP i.d. @ 2.0多印跡框架迷你相框中框阻塞溶液量每孔15毫升30毫升30毫升抗體量每孔2.5 mL5毫升10毫升洗滌緩沖液*量每孔4x 15 mL每個(gè)4x 30 mL每個(gè)4x 30 mL●Tris或磷酸鹽緩沖鹽溶液,補(bǔ)充有0.1%Tweene 20表面活性劑在計(jì)算免疫檢測(cè)所需的抗體量時(shí),三個(gè)要素對(duì)于成功檢測(cè)出蛋白質(zhì)并獲得了高質(zhì)量的印跡(低背景,高信號(hào)):●樣品類型和凝膠上樣濃度●一級(jí)和二級(jí)抗體濃度●檢測(cè)試劑的種類和靈敏度下表中的所有抗體均使用LuminataTM Forte化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑進(jìn)行了測(cè)試。對(duì)于SNAP i.d. @ 2.0系統(tǒng),抗體濃度高于標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測(cè)中的濃度,但濃度較低體積。 表3.標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測(cè)中一抗稀釋的實(shí)例 SNAPi.d.?2.0免疫檢上海益啟生物WB實(shí)驗(yàn)加速器訂購(gòu)方便。浦東新區(qū)Merck細(xì)胞跨膜電阻儀Merck儀器咨詢報(bào)價(jià)
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