抗體可變區(qū):重鏈和輕鏈的V區(qū)分別稱為VH和VL。VH和VL中各含有3個氨基酸組成和排列順序高度可變的區(qū)域,稱為高變區(qū)(hypervariable region,HVR)或互補決定區(qū)(complementarity determining region,CDR), 包括HVR1(CDR1)、HVR2(CDR2)和HVR3(CDR3),其中,HVR3(CDR3)變化程度更高。VH的3個高變區(qū)分別位于29~31、49~58和95~102位氨基酸,而VL的3個高變區(qū)分別位于28~35、49~56和91~98位氨基酸。VH和VL的3個CDR共同組成Ig的抗原結(jié)合部位(antigen-binding site),決定抗體的特異性,是抗體識別及結(jié)合抗原的部位。在V區(qū)中,CDR之外區(qū)域的氨基酸組成和排列順序相對保守,稱為骨架區(qū)(framework region,F(xiàn)R)。VH或VL各有四個骨架區(qū),分別用FR1、FR2、FR3和FR4表示。多克隆抗體適用于各種實驗和臨床應用,如免疫染色、免疫印跡、流式細胞術(shù)等。蘇州異嗜性抗體
單克隆抗體:解決多克隆抗體特異性不高的理想方法是制備識別單一表位特異性的抗體。如果能獲得只針對單一表位的漿細胞克隆,并使其在體外擴增分泌抗體,就有可能獲得單一表位特異性的抗體。然而,漿細胞在體外的壽命較短,難以培養(yǎng)。為克服這一缺點,Kohler和Milstein將可產(chǎn)生特異性抗體但短壽的B細胞與不產(chǎn)生抗體但長壽的骨髓瘤細胞融合,獲得了可以產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細胞,從而建立了單克隆抗體制備技術(shù)。通過該技術(shù)融合形成的雜交瘤(hybridoma),既具有骨髓瘤細胞大量擴增和永生的特性,又具有免疫B細胞合成和分泌特異性抗體的能力。成都Prestige抗體價格多克隆抗體可以通過交叉反應的方式檢測相關(guān)的抗原。
多克隆單克?。禾烊坏目乖肿又谐:卸喾N不同的抗原表位,以該抗原刺激機體的免疫系統(tǒng)可同時啟動多種B細胞克隆,產(chǎn)生的抗體中會含有多種針對不同抗原表位的抗體,因此稱之為多克隆抗體。多克隆抗體主要從動物免疫血清、恢復期患者血清或免疫接種人群的血清中獲得。多克隆抗體的優(yōu)勢是:作用全方面,具有中和抗原、免疫調(diào)理、補體依賴的細胞毒作用(CDC)、ADCC等重要作用,而且來源普遍、制備簡單。其缺點是:特異性不高、易發(fā)生交叉反應,不易大量制備,因而限制了其應用的范圍。
抗體主要功能:啟動補體產(chǎn)生攻膜復合物使細胞溶解破壞。人IgG1~3和IgM與相應抗原結(jié)合后,可因構(gòu)象改變而使其CH2和CH3結(jié)構(gòu)域內(nèi)的補體結(jié)合點暴露,從而通過經(jīng)典途徑啟動補體系統(tǒng),產(chǎn)生多種效應功能,其中IgM、IgG1和IgG3啟動補體系統(tǒng)的能力較強,IgG2較弱。IgA、IgE和IgG4本身難以啟動補體,但在形成聚合物后可通過旁路途徑啟動補體系統(tǒng)。通常情況下,lgD不能啟動補體。調(diào)理吞噬和ADCC:IgG可通過其Fc段與表面具有相應受體的細胞結(jié)合,產(chǎn)生不同的生物學作用。單克隆抗體可以用于研究疾病的發(fā)病機制。
單克隆抗體是由單一B細胞克隆產(chǎn)生的高度均一、只針對某一特定抗原表位的抗體。通常采用雜交瘤技術(shù)來制備,雜交瘤(hybridoma)抗體技術(shù)是在細胞融合技術(shù)的基礎上,將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細胞融合為B細胞雜交瘤。用具備這種特性的單個雜交瘤細胞培養(yǎng)成細胞群,可制備針對一種抗原表位的特異性抗體,即單克隆抗體。單克隆抗體是人工制備的雜交瘤細胞生產(chǎn)的,雜交瘤細胞是由一個經(jīng)抗原啟動后的B細胞與一個骨髓瘤細胞融合形成。單克隆抗體優(yōu)點:純度高,靈敏度高,特異性強,交叉反應少,制備的成本低。缺點:對技術(shù)有一定的要求,而且通過抗原的化學處理很容易丟失表位。單克隆抗體可以用于免疫療法,增強機體的免疫系統(tǒng)。深圳IgA抗體研發(fā)制造
多克隆抗體可以提供更高的信號強度,因為多個細胞克隆同時產(chǎn)生抗體。蘇州異嗜性抗體
抗體特性和功能:正常人血清lgD濃度很低,儀占血清Ig總量的0.2%。IgD可在個體發(fā)育的任何時間產(chǎn)生。5類lg中,IgD的鉸鏈區(qū)很長,易被蛋白酶水解,故其半衰期很短(只3天)。lgD分為兩型:血清型IgD的生物學功能尚不清楚;膜結(jié)合型IgD(mlgD)構(gòu)成BCR,是B細胞分化發(fā)育成熟的標志,未成熟B細胞只表達mlgM,成熟B細胞可同時表達mlgM和mIgD,稱為初始B細胞(naive B cell)?;罨腂細胞或記憶性B細胞表面的mlgD會逐漸消失。IgE是正常人血清中含量很少的Ig,血清濃度極低,約為5×10-5mg/ml。IgE主要由黏膜下淋巴組織中的漿細胞分泌。其重要特征為糖含量較高。IgE為親細胞抗體,其CH2和CH3結(jié)構(gòu)域可與肥大細胞和嗜堿性粒細胞上的IgE高親和力Fc受體結(jié)合,引起I型超敏反應。此外,IgE與機體的抗寄生蟲免疫相關(guān)。蘇州異嗜性抗體