抗體重鏈和輕鏈:輕鏈分子量約為25 000,由214個氨基酸殘基構(gòu)成。輕鏈可分為兩種,分別為kappa(κ)鏈和lambda(λ)鏈。據(jù)此,可將Ig分為兩型(type),即κ型和λ型。一個Ig分子上兩條輕鏈的型別總是相同的。不同類Ig既存在κ型,也存在λ型。同一個體內(nèi)可同時存在κ型和λ型的Ig分子,不同種屬生物體內(nèi)兩型輕鏈的比例不同。正常人血清Ig的κ:λ約為2:1,而在小鼠則為20:1。Ig的κ與λ的比例異??梢苑从趁庖呦到y(tǒng)的異常。根據(jù)λ鏈恒定區(qū)個別氨基酸的差異,又可將λ鏈分為λ1、λ2、λ3和λ4四個亞型(subtype)。多克隆抗體通常由多個不同的B細(xì)胞克隆產(chǎn)生,這些細(xì)胞分別產(chǎn)生針對不同抗原的抗體。北京免疫抗體
抗體特性和功能:IgA分為兩型:血清型為單體,主要存在于血清中,只占血清Ig總量的10%~15%;分泌型IgA(secretory IgA,SIgA)為二聚體,由J鏈連接,含內(nèi)皮細(xì)胞合成的分泌片,經(jīng)分泌性上皮細(xì)胞分泌至外分泌液中。SIgA合成和分泌的部位在腸道、呼吸道、乳腺、唾液腺和淚腺,因此主要存在于胃腸道和支氣管分泌液、初乳、唾液和淚液。SIgA是外分泌液中主要的抗體類別,參與黏膜局部免疫,通過與相應(yīng)病原微生物結(jié)合,阻止病原體黏附到細(xì)胞表面,在局部抗傳染中發(fā)揮重要作用。SIgA在黏膜表面也有中和有害素的作用。新生兒易患呼吸道、胃腸道傳染可能與IgA合成不足有關(guān)。嬰兒可從母親初乳中獲得SIgA,這是一種重要的自然被動免疫過程;深圳IgE抗體研發(fā)團隊多克隆抗體可以用于檢測特定蛋白質(zhì)在不同組織和細(xì)胞中的表達(dá)情況。
單克隆抗體的大量制備主要采用動物體內(nèi)誘生法和體外培養(yǎng)法。(1)體內(nèi)誘生法取BALB/c小鼠,首先腹腔注射0.5ml液體石蠟或降植烷進行預(yù)處理。1-2周后,腹腔內(nèi)接種雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞在小鼠腹腔內(nèi)增殖,并產(chǎn)生和分泌單克隆抗體。約1-2周,可見小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可獲得大量單克隆抗體。(2)體外培養(yǎng)法將雜交瘤細(xì)胞置于培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中,雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生并分泌單克隆抗體,收集培養(yǎng)上清液,離心去除細(xì)胞及其碎片,即可獲得所需要的單克隆抗體。但這種方法產(chǎn)生的抗體量有限。各種新型培養(yǎng)技術(shù)和裝置不斷出現(xiàn),極大提高了抗體的生產(chǎn)量。
單克隆抗體(monoclonal antibody,Mab)技術(shù)是20世紀(jì)免疫學(xué)技術(shù)的一項里程碑式突破。該技術(shù)將免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合生成雜交瘤細(xì)胞,這種雜交瘤細(xì)胞核內(nèi)含有雙親細(xì)胞的染色體,繼承了親代細(xì)胞的特征。它既具有瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)中迅速增殖的能力,又具備免疫脾細(xì)胞合成和分泌特異性抗體的特性。隨后用適當(dāng)方法把雜交瘤細(xì)胞分離出來,進行單個細(xì)胞培養(yǎng),使之大量繁殖,在培養(yǎng)液中形成單個雜交瘤細(xì)胞的克隆(也稱細(xì)胞系)。由于每個B淋巴細(xì)胞只有合成一種抗體的遺傳基因,所以單個雜交腐細(xì)胞的克隆也只能產(chǎn)生一種專一性抗體,即單克隆抗體。這種制備產(chǎn)生單克隆抗體的技術(shù)被稱為單克隆抗體技術(shù);單克隆抗體在流感疫苗的生產(chǎn)中起到了重要作用。
抗體主要功能:中和有害素和阻止病原體入侵Ig單體可結(jié)合2個抗原表位,為雙價。SIgA是二聚體,可結(jié)合4個抗原表位,為4價。IgM是五聚體,理論上可以結(jié)合10個抗原,應(yīng)該是10價,但由于立體構(gòu)象的空間位阻,使IgM一般只能結(jié)合5個抗原表位,故為5價??贵w的V區(qū)與抗原結(jié)合后,借助于c區(qū)的作用,在體外可發(fā)生各種抗原抗體結(jié)合反應(yīng),有利于抗原或抗體的檢測和功能的判斷;在體內(nèi)可中和有害素、阻斷病原體入侵、去除病原微生物;B細(xì)胞膜表面的IgM和IgD構(gòu)成B細(xì)胞的抗原識別受體,能輔助B細(xì)胞特異性識別抗原分子。單克隆抗體的研究有助于理解免疫系統(tǒng)在整體健康中的作用。廣州IgM抗體
多克隆抗體可以通過融合細(xì)胞和單克隆化技術(shù)轉(zhuǎn)變?yōu)閱慰寺】贵w。北京免疫抗體
抗體的分類:1、免疫球蛋白可分為兩種類型:(1)分泌性免疫球蛋白:存在于血清、體液以及分泌液中,具有抗體的各種功能。(2)膜型免疫球蛋白:位于B淋巴細(xì)胞的表面,即膜表面免疫球蛋白(mIg),是B淋巴細(xì)胞的抗原識別受體(BCR)。2、根據(jù)所對應(yīng)的抗原分:3、根據(jù)有無抗原刺激分:4、根據(jù)與抗原反應(yīng)的性質(zhì)分:5、根據(jù)抗原性分:免疫球蛋白的理化性質(zhì);免疫球蛋白是多鏈糖蛋白,具有蛋白質(zhì)的通性,對物理及化學(xué)因素敏感,不耐熱,在60~70℃時即被破壞,能被多種蛋白水解酶裂解破壞,可在乙醇、三氯醋酸或中性鹽類中沉淀。因此,通常用50%飽和硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中提取抗體。北京免疫抗體