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來源: 發(fā)布時間:2023-12-03

多克隆抗體可以采用以下各種方法之一進行免疫。淋巴結(jié)注射法:①在兔的兩后足跖部皮下(或皮內(nèi))注射活卡介苗 50mg(每側(cè)約0.30ml) 。7~10 天后,兔跖及腘肌淋巴結(jié)腫大;②于腫大的兩側(cè)淋巴結(jié)內(nèi)各注射加有完全佐劑的IgG 乳化抗原 0.50ml(含 IgG 5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、鏈霉素 1 000μg/ml);③必要時,14 天后,重復(fù)步驟②一次;④再過 7 天后,于兩側(cè)淋巴結(jié)內(nèi)各注射加有完全佐劑的 IgG 乳化抗原0.50ml(含IgG5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、鏈霉素 1 000μg/ml) ;⑤5~7天后,耳靜脈采集血。測定血清效價。多克隆抗體可以用于調(diào)理某些疾病,如自身免疫性疾病等。北京多克隆抗體公司排行

抗體水解片段:在一定條件下,Ig分子肽鏈的某些部分易被蛋白酶水解為不同片段。木瓜蛋白酶(papain)和胃蛋白酶(pepsin)是很常用的兩種Ig蛋白水解酶,并可籍此研究Ig的結(jié)構(gòu)和功能,分離和純化特定的12多肽片段??贵w的功能與其結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。同一抗體的V區(qū)和C區(qū)的氨基酸組成和順序的不同,決定了其功能上的差異。不同抗體的V區(qū)和C區(qū)在結(jié)構(gòu)變化上具有一定的規(guī)律,又使得其在功能上存在共性。V區(qū)和C區(qū)的組成和結(jié)構(gòu),決定了抗體的生物學(xué)功能。廣東異嗜性抗體怎么購買單克隆抗體可以用于調(diào)理心血管疾病。

抗體主要功能:調(diào)理吞噬和ADCC。1.調(diào)理作用(opsonization)指IgG抗體(特別是IgG1和IgG3)的Fc段與中性粒細胞、巨噬細胞表面相應(yīng)的Fc受體結(jié)合,從而增強吞噬細胞的吞噬作用。例如,細菌特異性的IgG抗體可通過其Fab段與相應(yīng)的細菌抗原結(jié)合后,以其Fc段與巨噬細胞或中性粒細胞表面相應(yīng)的Fc受體結(jié)合,通過IgG的Fab段和Fc段的“橋聯(lián)”作用,促進吞噬細胞對細菌的吞噬。2.抗體依賴的細胞介導(dǎo)的細胞毒作用(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC)指具E有殺傷活性的細胞(如NK細胞)通過其表面的Fc受體識別包被于靶細胞表面抗原(如病毒感染細胞或腫瘤細胞)上的抗體的Fc段,直接殺傷靶細胞。NK細胞是介導(dǎo)ADCC的主要細胞??贵w與靶細胞上的抗原結(jié)合是特異性的,而表達Fc受體細胞的殺傷作用是非特異性的 [4] 。

1975年分子生物學(xué)家G.J.F.克勒和C.米爾斯坦在自然雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上,創(chuàng)建了雜交瘤技術(shù),他們把可在體外培養(yǎng)和大量增殖的小鼠骨髓瘤細胞與經(jīng)抗原免疫后的純系小鼠B細胞融合,成為雜交細胞系,既具有瘤細胞易于在體外無限增殖的特性,又具有抗體形成細胞的合成和分泌特異性抗體的特點。將這種雜交瘤作單個細胞培養(yǎng),可形成單細胞系,即單克隆。利用培養(yǎng)或小鼠腹腔接種的方法,便能得到大量的、高濃度的、非常均一的抗體,其結(jié)構(gòu)、氨基酸順序、特異性等都是一致的,而且在培養(yǎng)過程中,只要沒有變異,不同時間所分泌的抗體都能保持同樣的結(jié)構(gòu)與機能。這種單克隆抗體是用其他方法所不能得到的。多克隆抗體是由多個不同的B細胞產(chǎn)生的抗體,具有普遍的特異性。

抗體水解片段:在一定條件下,Ig分子肽鏈的某些部分易被蛋白酶水解為不同片段。木瓜蛋白酶(papain)和胃蛋白酶(pepsin)是很常用的兩種Ig蛋白水解酶,并可籍此研究Ig的結(jié)構(gòu)和功能,分離和純化特定的12多肽片段。木瓜蛋白酶水解Ig的部位是在鉸鏈區(qū)二硫鍵連接的兩條重鏈的近N端,可將Ig裂解為兩個完全相同的Fab段和一個Fc段。Fab段即抗原結(jié)合片段(fragment antigenbinding,F(xiàn)ab),由一條完整的輕鏈與重鏈的VH和CHl結(jié)構(gòu)域組成。一個Fab片段為單價,可與抗原結(jié)合但不產(chǎn)生凝集反應(yīng)或沉淀反應(yīng);Fc段即可結(jié)晶片段(fragment crystallizable,F(xiàn)c),由Ig的CH2和CH3結(jié)構(gòu)域組成。Fc段無抗原結(jié)合活性,是Ig與效應(yīng)分子或細胞相互作用的部位。單克隆抗體可以高度特異性地與特定抗原結(jié)合。PRR11抗體補給公司

單克隆抗體是通過從單個抗體細胞中獲得的抗體產(chǎn)生的。北京多克隆抗體公司排行

多克隆抗體免疫動物:免疫用的動物建議選擇適齡的健康雄性動物,雌性動物特別是妊娠動物用于制備免疫抗體則非常不合適,有時甚至不產(chǎn)生抗體。由于對免疫應(yīng)答的個別差異,免疫時應(yīng)同時選用數(shù)只動物進行免疫。 抗原是多種多樣的,而且千差萬別。就其化學(xué)成分而言,有蛋白質(zhì)抗原、類脂抗原、多糖類抗原和核酸抗原等。就抗原性而言,有完全抗原和不完全抗原。為了獲得較好的抗血清,建議是選用蛋白質(zhì)抗原,如要制備用于篩選細菌表達的 cDNA 文庫或免疫印跡的抗血清,建議選用可降解的蛋白質(zhì)抗原。不同的抗原,其免疫原性的強弱均不相同,這種免疫原性的強弱取決于抗原的分子量、化學(xué)活性基團、立體結(jié)構(gòu)、物理形狀和彌散速度等。北京多克隆抗體公司排行

標(biāo)簽: 膽固醇 血清 抗體 胰蛋白酶