單克隆抗體的大量制備主要采用動物體內(nèi)誘生法和體外培養(yǎng)法。(1)體內(nèi)誘生法取BALB/c小鼠,首先腹腔注射0.5ml液體石蠟或降植烷進(jìn)行預(yù)處理。1-2周后,腹腔內(nèi)接種雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞在小鼠腹腔內(nèi)增殖,并產(chǎn)生和分泌單克隆抗體。約1-2周,可見小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可獲得大量單克隆抗體。(2)體外培養(yǎng)法將雜交瘤細(xì)胞置于培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中,雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生并分泌單克隆抗體,收集培養(yǎng)上清液,離心去除細(xì)胞及其碎片,即可獲得所需要的單克隆抗體。但這種方法產(chǎn)生的抗體量有限。各種新型培養(yǎng)技術(shù)和裝置不斷出現(xiàn),極大提高了抗體的生產(chǎn)量。多克隆抗體可以用于調(diào)理某些疾病,如自身免疫性疾病等。杭州IgE抗體供應(yīng)商
抗體是一種重要的生物分子,在醫(yī)學(xué)和生物學(xué)領(lǐng)域有著普遍的應(yīng)用。以下是抗體的一些主要用途:診斷試劑:抗體可以用于診斷試劑的開發(fā)和應(yīng)用,如免疫試劑、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、免疫印跡試驗等。這些診斷試劑可以用于檢測人體內(nèi)的病原體、自身抗體、惡性細(xì)胞標(biāo)志物等,幫助醫(yī)生進(jìn)行疾病的診斷和監(jiān)測。調(diào)理藥物:抗體可以用于調(diào)理藥物的開發(fā)和應(yīng)用,如單克隆抗體、免疫球蛋白等。這些調(diào)理藥物可以用于調(diào)理各種疾病,如惡性細(xì)胞癥、自身免疫性疾病、病毒傳染等??贵w調(diào)理的主要原理是通過與病原體或惡性細(xì)胞細(xì)胞特異性結(jié)合,抑制其生長或誘導(dǎo)其凋亡。湖北異種抗體研發(fā)團(tuán)隊多克隆抗體可以用于區(qū)分同源蛋白質(zhì)在結(jié)構(gòu)和功能上的差異。
抗體主要功能:抗體的功能與其結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。同一抗體的V區(qū)和C區(qū)的氨基酸組成和順序的不同,決定了其功能上的差異。不同抗體的V區(qū)和C區(qū)在結(jié)構(gòu)變化上具有一定的規(guī)律,又使得其在功能上存在共性。V區(qū)和C區(qū)的組成和結(jié)構(gòu),決定了抗體的生物學(xué)功能。抗體的V區(qū)與抗原結(jié)合后,借助于c區(qū)的作用,在體外可發(fā)生各種抗原抗體結(jié)合反應(yīng),有利于抗原或抗體的檢測和功能的判斷;在體內(nèi)可中和有害素、阻斷病原體入侵、去除病原微生物;B細(xì)胞膜表面的IgM和IgD構(gòu)成B細(xì)胞的抗原識別受體,能輔助B細(xì)胞特異性識別抗原分子。
多克隆抗體可以采用以下各種方法之一進(jìn)行免疫。淋巴結(jié)注射法:①在兔的兩后足跖部皮下(或皮內(nèi))注射活卡介苗 50mg(每側(cè)約0.30ml) 。7~10 天后,兔跖及腘肌淋巴結(jié)腫大;②于腫大的兩側(cè)淋巴結(jié)內(nèi)各注射加有完全佐劑的IgG 乳化抗原 0.50ml(含 IgG 5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、鏈霉素 1 000μg/ml);③必要時,14 天后,重復(fù)步驟②一次;④再過 7 天后,于兩側(cè)淋巴結(jié)內(nèi)各注射加有完全佐劑的 IgG 乳化抗原0.50ml(含IgG5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、鏈霉素 1 000μg/ml) ;⑤5~7天后,耳靜脈采集血。測定血清效價??贵w也可以通過血液透析、免疫球蛋白輸注等方式進(jìn)行passively transfer。
研究表明,孕婦血型及其血清中免疫抗體效價與新生兒溶血病的發(fā)生之間存在相關(guān)性。新生兒溶血病是母嬰血型不合而引起的新生兒被動免疫性溶血性疾病,以ABO血型系統(tǒng)很常見,其次是Rh血型系統(tǒng)。ABO血型抗體是以IgM抗體為主,而此類抗體是不能透過胎盤的,但血液中還有少量血型抗體以IgM和IgA的形式存在,O型血人的抗-A、抗-B抗體部分以IgG類抗體存在,由于IgG抗體能夠透過胎盤與胎兒的紅細(xì)胞發(fā)生凝集反應(yīng)導(dǎo)致紅細(xì)胞破壞。病情嚴(yán)重者可導(dǎo)致早產(chǎn)、流產(chǎn)及死胎等。而孕婦產(chǎn)前血清免疫抗體效價檢測能夠及早發(fā)現(xiàn)不規(guī)則抗體及異常抗體效價等,從而可以及時有效的給予對癥調(diào)理??贵w能識別特定外來物的一個獨特特征,該外來目標(biāo)被稱為抗原。上海專業(yè)抗體費用
由于多克隆抗體來源于不同的細(xì)胞克隆,其親和力和特異性可能會有所不同。杭州IgE抗體供應(yīng)商
抗體主要功能:調(diào)理吞噬和ADCC。1.調(diào)理作用(opsonization)指IgG抗體(特別是IgG1和IgG3)的Fc段與中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞表面相應(yīng)的Fc受體結(jié)合,從而增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬作用。例如,細(xì)菌特異性的IgG抗體可通過其Fab段與相應(yīng)的細(xì)菌抗原結(jié)合后,以其Fc段與巨噬細(xì)胞或中性粒細(xì)胞表面相應(yīng)的Fc受體結(jié)合,通過IgG的Fab段和Fc段的“橋聯(lián)”作用,促進(jìn)吞噬細(xì)胞對細(xì)菌的吞噬。2.抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC)指具E有殺傷活性的細(xì)胞(如NK細(xì)胞)通過其表面的Fc受體識別包被于靶細(xì)胞表面抗原(如病毒感染細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞)上的抗體的Fc段,直接殺傷靶細(xì)胞。NK細(xì)胞是介導(dǎo)ADCC的主要細(xì)胞??贵w與靶細(xì)胞上的抗原結(jié)合是特異性的,而表達(dá)Fc受體細(xì)胞的殺傷作用是非特異性的 [4] 。杭州IgE抗體供應(yīng)商