抗體可變區(qū)和恒定區(qū):可變區(qū) 重鏈和輕鏈的V區(qū)分別稱為VH和VL。VH和VL中各含有3個氨基酸組成和排列順序高度可變的區(qū)域,稱為高變區(qū)(hypervariable region,HVR)或互補決定區(qū)(complementarity determining region,CDR), 包括HVR1(CDR1)、HVR2(CDR2)和HVR3(CDR3),其中,HVR3(CDR3)變化程度更高。VH的3個高變區(qū)分別位于29~31、49~58和95~102位氨基酸,而VL的3個高變區(qū)分別位于28~35、49~56和91~98位氨基酸。VH和VL的3個CDR共同組成Ig的抗原結(jié)合部位(antigen-binding site),決定抗體的特異性,是抗體識別及結(jié)合抗原的部位。在V區(qū)中,CDR之外區(qū)域的氨基酸組成和排列順序相對保守,稱為骨架區(qū)(framework region,F(xiàn)R)。VH或VL各有四個骨架區(qū),分別用FR1、FR2、FR3和FR4表示??贵w的生產(chǎn)通常需要利用動物模型或體外細胞培養(yǎng)技術(shù)。浙江異嗜性抗體研發(fā)團隊
抗原上那部分可以引起機體產(chǎn)生抗體的分子結(jié)構(gòu),叫做抗原決定簇。一個抗原上可以有好幾個不同的抗原決定簇,因而使機體產(chǎn)生好幾種不同的抗體,然后產(chǎn)生出抗體是漿細胞。只針對一個抗原決定簇起作用的漿細胞群就是一個純系,純系的英文為Clone,音譯就是克隆。由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目標明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合,就象導(dǎo)彈精確地命中目標一樣。另一方面,即使是同一種抗原決定簇,在機體內(nèi)也可以由好幾種克隆來產(chǎn)生抗體,形成好幾種單克隆抗體混雜物,稱為多克隆抗體。杭州自身抗體試劑抗體(antibody)是指機體由于抗原的刺激而產(chǎn)生的具有保護作用的蛋白質(zhì)。
抗體特性和功能:IgE。IgE是正常人血清中含量很少的Ig,血清濃度極低,約為5×10-5mg/ml。IgE主要由黏膜下淋巴組織中的漿細胞分泌。其重要特征為糖含量較高。IgE為親細胞抗體,其CH2和CH3結(jié)構(gòu)域可與肥大細胞和嗜堿性粒細胞上的IgE高親和力Fc受體結(jié)合,引起I型超敏反應(yīng)。此外,IgE與機體的抗寄生蟲免疫相關(guān)。抗體獨特的生物學活性使其在疾病的診斷、免疫防治及基礎(chǔ)研究中發(fā)揮作重要作用。早在19世紀后期,人們就開始使用特異性抗原免疫動物制備相應(yīng)的抗血清。
多克隆抗體佐劑應(yīng)用:1.佐劑的類型 實踐中常應(yīng)用的佐劑有氫氧化鋁膠、明礬、弗氏佐劑、脂質(zhì)體和石蠟油等。也有采用結(jié)合桿菌等分枝桿菌、白喉桿菌以及細小棒狀桿菌等。⑴ 弗氏不完全佐劑(incomplete Freund's adjuvant,IFA)羊毛脂 1 份;石蠟油 5 份;混合,高壓滅菌后保存。用時加熱融化,冷卻至 50℃左右,加抗原進行乳化處理。⑵ 弗氏完全佐劑(complete Freund's adjuvant,CFA);弗氏不完全佐劑 10ml;卡介苗 10mg~200mg 卡介苗可 100℃10min 滅活處理。初次免疫時,建議用弗氏完全佐劑,以刺激機體產(chǎn)生較強的免疫反應(yīng)。再次免疫時,一般不用完全佐劑,而采用弗氏不完全佐劑。但在研究分枝桿菌及相關(guān)抗原時,一般不用弗氏完全佐劑,以免卡介苗的干擾??贵w是一類能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白。
抗體可變區(qū)和恒定區(qū):通過分析不同Ig重鏈和輕鏈的氨基酸序列發(fā)現(xiàn),重鏈和輕鏈靠近N端的約110個氨基酸序列變化很大,其他部分氨基酸序列相對恒定。因此,將Ig輕鏈和重鏈中靠近N端氨基酸序列變化較大的區(qū)域稱為可變區(qū)(variable region,V),分別占重鏈和輕鏈的1/4和1/2;將靠近C端的氨基酸序列相對穩(wěn)定的區(qū)域,稱為恒定區(qū)(constant region,C),分別占重鏈和輕鏈的3/4和1/2。恒定區(qū) 重鏈和輕鏈的C區(qū)分別稱為CH和CL。不同型(κ或λ)Ig的CL長度基本一致,但是不同類Ig的CH長度不同,例如IgG、IgA和IgD包括CH1、CH2和CH3,而IgM和IgE則包括CH1、CH2、CH3和CH4。抗體的半衰期較長,可以在體內(nèi)持續(xù)發(fā)揮作用,保持免疫防御的持久性。合肥自身抗體補給公司
按抗原反應(yīng)的凝集狀態(tài)分為完全抗體IgM和不完全抗體IgG等??贵w在醫(yī)療實踐中應(yīng)用甚為普遍。浙江異嗜性抗體研發(fā)團隊
隨后,經(jīng)1968年和1972年的世界衛(wèi)生組織和國際免疫學會聯(lián)合會討論決定,將具有抗體活性或化學結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白統(tǒng)一命名為免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig可分為分泌型Ig(secreted Ig,SIg)和膜型Ig(membrane Ig,mIg)。SIg主要存在于血液和組織液中,行使抗體的各種功能;mIg主要構(gòu)成B細胞膜表面的抗原受體?;窘Y(jié)構(gòu):經(jīng)x線晶體衍射結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn),Ig由四條多肽鏈組成,各肽鏈之間由數(shù)量不等的鏈間二硫鍵連接。Ig可形成“Y”字型結(jié)構(gòu),稱為Ig單體,是構(gòu)成抗體的基本單位。浙江異嗜性抗體研發(fā)團隊