如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?未拆封的血清,一般情況下應(yīng)存放于-10℃至-20℃,在產(chǎn)品規(guī)定的效期內(nèi)均可使用,若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至合適大小的無菌離心管內(nèi),再放回冷凍。將血清從冷凍冰箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融,或通過水浴鍋促使其溶解。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。完全溶解后建議盡快使用,若長時間儲存在2-8℃,血清中的各種(脂)蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能因凝集而形成沉淀或可見的混濁。胎牛血清中含有大量對細胞生長必需的生長因子。黃山標(biāo)準(zhǔn)血清
胎牛血清的生產(chǎn)工藝:胎牛血清適合脈沖示蹤實驗(同位素標(biāo)記研究細胞代謝)適合轉(zhuǎn)染CHO后的篩選,避免外源小分子對細胞產(chǎn)生干擾。透析胎牛血清是在胎牛血清的基礎(chǔ)上進行加工的。胎牛血清在無菌條件下要經(jīng)過0.1微米膜三重過濾,要進行一系列的檢測,包括理化性質(zhì)檢查(如滲透壓和pH值),成分檢查(如內(nèi)的毒性和血紅蛋白)、外源因子檢查(如細菌、病毒和支原體)以及促進細胞增殖的檢查等。透析胎牛血清為保證其性能和安全性,也需具備胎牛血清的這些工藝和檢查。黃山標(biāo)準(zhǔn)血清FBS的常見處理方法是熱滅活,其中將FBS在56°C的水浴中加熱30分鐘,偶爾搖晃。
活性炭處理胎牛血清的應(yīng)用:活性炭處理胎牛血清主要用于受體研究和雌Hormone相關(guān)的細胞研究實驗。同時活性炭處理胎牛血清極大的降低了多種Hormone和生長因子,減少了影響細胞生化分析的干擾因子。性炭處理胎牛血清減少了血清中的類固醇類化合物,3x100nm無菌過濾內(nèi)的毒性≤10EU/mL,血紅素≤20mg/dL。胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)較高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分較少。
如何區(qū)別真假胎牛血清:1、血紅蛋白,標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高,反之,數(shù)值越低。2、pH,國產(chǎn)血清,大多高于7.5,進口胎牛血清,大多低于7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關(guān),這也能用來初步鑒別血清的來源。3、微生物。包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原性的病毒等。隨著國內(nèi)血清廠家生產(chǎn)條件的改善提高,細菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制,支原體經(jīng)過0.1um過濾,大多也能清理。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴(yán)重的,主要是生產(chǎn)環(huán)境過程中帶入,又無法過濾,很難徹底清理,但對血清質(zhì)量影響不大。病原性的病毒,特別是BVDV,在國產(chǎn)血清中幾乎90%以上都存在,這類微生物是影響國產(chǎn)血清質(zhì)量的重要因素之一,而進口胎牛血清中基本都控制的很好。倘若把胎牛血清存放在4℃冰箱,請不要超過一個月。
胎牛血清都有哪些重要的指標(biāo):一、內(nèi)的毒性,內(nèi)的毒性是革蘭氏陰性菌的細胞壁外壁層上的特有成分。當(dāng)細菌死亡自溶或粘附在其它細胞時,才表現(xiàn)其毒性。內(nèi)的毒性直接參與細胞凋亡,血清中內(nèi)的毒性含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內(nèi)的毒性含量過高,會直接導(dǎo)致細胞提前老化。國際上規(guī)定,胎牛血清的級別,應(yīng)以內(nèi)的毒性水平的高低來確定,其中,特級胎牛血清的內(nèi)的毒性應(yīng)<10EU/ml。二、血紅蛋白含量,胎牛血清的顏色會根據(jù)血紅蛋白含量的不同表現(xiàn)出黃色、淡黃色、橘紅色、微紅色等。細胞培養(yǎng)用血清的標(biāo)準(zhǔn)是血紅蛋白含量不高于20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高;反之,數(shù)值越低。實際上,血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響。這個指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采的血過程的嚴(yán)謹規(guī)范程度,良好的操作能降低血清的溶血。胎牛血清含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細胞的體外培養(yǎng)。東莞無外泌體血清
為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學(xué)成分的分析,都以血清為樣品。黃山標(biāo)準(zhǔn)血清
胎牛血清:胎牛血清用于細胞培養(yǎng)已經(jīng)超過半個世紀(jì)了,20世紀(jì)50年代末TheodorePuck在細胞和組織培養(yǎng)中初次加入胎牛血清(FBS)來刺激細胞生長。后來人們發(fā)現(xiàn),由于胎牛未進食過母乳,所以IgG的含量極低,不會阻礙細胞生長,而且胎牛血清中含有豐富的促進細胞生長的成分,如維生素、運輸?shù)鞍?、微量元素、生長因子等,胎牛血清生產(chǎn)的一切環(huán)節(jié)均有嚴(yán)格的質(zhì)量把控。出廠的血清無細菌、支原體和病毒等微生物的威脅,且內(nèi)的毒性含量低,滿足絕大多數(shù)細胞培養(yǎng)需求。黃山標(biāo)準(zhǔn)血清
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