質(zhì)量和重心都應(yīng)該平衡。注意速度和加速度不要太快，否則會(huì)直接損壞超濾膜。開始離心超濾（離心預(yù)冷至4度〉。膜和旋轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說明進(jìn)行調(diào)整（對于角向離心機(jī)，膜垂直于軸〉。在實(shí)際應(yīng)用中，一般的速度開度比手動(dòng)低，可以延長離心管的使用壽命。4。當(dāng)濃縮到剩余的1毫升時(shí)，取中國產(chǎn)的504.1l布拉德福德溶液，加104 l流過，看是否變藍(lán)，以判斷ur管是否漏蛋白。如果管道泄漏，重新倒入上層，然后流過新管道開始超濾。為了準(zhǔn)確確定管道是否泄漏，用5 mg/ml BSA離心10分鐘，然后將其穿過，大致運(yùn)行膠水或Bradf ord，繼續(xù)添加剩余的蛋白質(zhì)溶液以濃縮（在冰上操作以防止蛋白質(zhì)加熱〉，直到所有濃縮物都添加完畢。離心過程中應(yīng)注意是否有蛋白質(zhì)沉淀，導(dǎo)致堵塞。如果發(fā)生沉淀，有必要確定沉淀的具體原因是蛋白質(zhì)濃度過高還是緩沖液不當(dāng)。超濾離心管通常由聚碳酸酯或聚丙烯制成，具有強(qiáng)度高和化學(xué)惰性。山東30K超濾離心管規(guī)格

超濾離心管的分子量選擇：按照樣品量和目標(biāo)分子量選擇適當(dāng)?shù)某瑸V離心管，為了得到較高的收率，所選濾膜的截留分子量MWCO建議選擇所需截留分子大小的1/3左右，不超過目標(biāo)分子量的一半。因?yàn)槌瑸V膜上孔徑是平均孔徑，膜上的孔并非均勻，離心高壓下也可能滲漏，因此截留孔徑越小，流速越慢但截留比例更大。如果樣本濃度低體積大，可選擇較小容積的超濾管多次重復(fù)加樣離心。如果同時(shí)需要脫鹽和去除可溶小分子雜質(zhì)，可將待濃縮樣品稀釋到超濾管較大容積再離心，重復(fù)2次可除去99%鹽。避免過長時(shí)間或者過速離心，雖然優(yōu)良品質(zhì)的產(chǎn)品都有防死端設(shè)計(jì)，可避免過度離心造成膜表面干而造成不可逆吸附。金華超濾離心管定做超濾離心管還可以用于濃縮樣品，減少其體積并提高濃度。

可以通過多個(gè)超濾管同時(shí)超濾來降低濃度，而后者通過改變不同的緩沖液直到?jīng)]有蛋白質(zhì)沉淀。用來濃縮蛋白質(zhì)的。如果要更換緩沖液，當(dāng)總蛋白溶液濃縮到1毫升左右時(shí)，輕輕添加一個(gè)新的緩沖液〈用0.22um超濾膜超濾后〉，然后連續(xù)濃縮到1毫升左右。濃縮液的之后體積取決于所需的蛋白質(zhì)濃度，通常不超過500 ul，但也要濃縮到200 ul以下。根據(jù)每次至少10次的體積濃度計(jì)算，1000次以上的3次基本可以達(dá)到更換緩沖器的目的。提取之后濃縮蛋白的操作在冰上進(jìn)行。黃色設(shè)備頭(200ul)用于提取之后的蛋白質(zhì)濃縮物。設(shè)備頭沿設(shè)備頭邊緣輕輕插入。將蛋白溶液輕輕吹勻。注意不要觸摸超濾膜。吸取濃縮液，一次較多吸200 ul，直至耗盡。之后留在管底的濃縮液不需要吸收，否則太困難，可能損壞超濾膜。之后，在無超濾膜的超濾管中加入milliq水，以防止超濾膜干燥。

注意:超濾離心管中的濾膜一旦潤濕 后應(yīng)避免變干。如果在預(yù)清洗后不是立即使用，則讓液體保留在濾膜上，直到使用。6.使用方法：1）.將超濾內(nèi)管插入所提供的一個(gè)微量離心管中。2）.向超濾管內(nèi)管中加入不超過500 μL的樣本,并蓋上蓋子。3）.將蓋好蓋子的超濾管放入離心轉(zhuǎn)子中，讓蓋子的連接帶朝著轉(zhuǎn)子的中間;用一個(gè)類似的超濾管平衡。4）.以14,000 x g離心約10-30分鐘,具體時(shí)間取決于所使用超濾管的NMWL。5）.離心結(jié)束后將整個(gè)超濾管從離心機(jī)中取出,取出內(nèi)管。6）.為了回收濃縮后的溶質(zhì),將內(nèi)管倒過來插在-個(gè)干凈的微量離心管中。放在離心機(jī)中,讓打開的蓋子朝著轉(zhuǎn)子的中間;用一個(gè)類似的超濾管進(jìn)行平衡。以1 ,000 x g離心2分鐘,使?jié)饪s后的樣本從超濾內(nèi)管轉(zhuǎn)移到收集管中。超濾液可以保存在收集管中。超濾離心管利用離心力和超濾膜將分子分離和過濾出來。

離心管主要有塑料、不銹鋼制成，塑料離心管常用資料有聚丙烯（PP）.聚乙烯（PE），聚碳酸酯（PC）等。其中PP管性能較好，塑料離心管的優(yōu)點(diǎn)是透明（或半透明），硬度小，可用穿刺法取出梯度，缺陷是易變形，抗有機(jī)溶劑腐蝕性差，運(yùn)用壽命短；不銹鋼離心管強(qiáng)度大，不變形，能抗凍，抗熱，抗化學(xué)腐蝕，但用時(shí)要防止接觸強(qiáng)腐蝕性的化學(xué)藥品、如強(qiáng)酸、強(qiáng)堿等化學(xué)試劑。這里主要介紹塑料離心管：塑料離心管都有管蓋，離心前管蓋必需蓋嚴(yán)，倒置不漏液。管蓋有三種作用：①避免樣品外泄，用于有放射性或強(qiáng)腐蝕性的樣品時(shí)②避免樣品揮發(fā)③支持離心管，避免離心管變形。超濾離心管還可以用于檢測樣品中的元素、抗體等生物活性分子。青島濃縮超濾離心管售價(jià)

超濾離心管可根據(jù)不同孔徑大小選擇超濾膜，以便過濾出所需大小范圍內(nèi)的目標(biāo)分子。山東30K超濾離心管規(guī)格

選擇合適的超濾管。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量為35kDa，就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右，則可以用截留分子量3kD的超濾管。認(rèn)真閱讀使用說明書，注意超濾膜對各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同。新買來的超濾是干燥的，使用前加入超純水，水量完全過膜，冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超過管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕，加入蛋白液前，超濾管需要插在冰上預(yù)冷。平衡。質(zhì)量和重心二者都要達(dá)到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快，否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾（離心機(jī)預(yù)冷至4度）。山東30K超濾離心管規(guī)格

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