rProteinA/GBeads4FF是將rProteinA/G高密度定向偶聯(lián)到高度交聯(lián)的瓊脂糖凝膠微球表面,該產(chǎn)品具有更高的抗體結(jié)合能力和較低的蛋白非特異吸附率,洗脫條件更均一,一步純化即可從血清樣品中分離出純度大于90%的抗體。產(chǎn)品性能見(jiàn)表1。本產(chǎn)品主要用于免疫沉淀(IP)以及免疫共沉淀(Co-IP)研究,也可用于抗體固定及其它相關(guān)研究。用戶可根據(jù)目標(biāo)抗體的種屬來(lái)源及亞型選擇微球的類別,純化流程本產(chǎn)品主要應(yīng)用于免疫沉淀(IP)以及免疫共沉淀(Co-IP)研究。2.1緩沖液的準(zhǔn)備所用水和緩沖液在使用之前建議用0.22μm或0.45μm濾膜過(guò)濾。平衡/洗雜液:0.15MNaCl,20mMNa2HPO4,pH7.0洗脫液:0.1M甘氨酸,pH3.0中和液:1MTris-HCl,pH8.5交聯(lián)液:0.2M三乙醇胺,pH8.2交聯(lián)劑:DMP(dimetylpimelimidatedihydrochloride)終止液:50mMTris,pH7.5常州天地人和試劑經(jīng)銷商。廣東抗體純化試劑報(bào)價(jià)
蛋白純化試劑,rProteinA/GBeads4FF加抗體純化流程3)再向其中加入1ml終止液,懸浮填料,終止交聯(lián)反應(yīng),在室溫下置于翻轉(zhuǎn)混合儀或者手工輕輕翻轉(zhuǎn)離心管,約15min后,800rpm離心1min,再吸棄上清。4)加入0.5ml的洗雜液,懸浮填料,進(jìn)行清洗,800rpm離心1min,吸棄上清。再重復(fù)兩次。2.4.3抗原沉淀反應(yīng)1)抗原吸附:加入含有抗原的樣品,用移液器輕輕吹打使抗原與填料-抗體復(fù)合物均勻分散。在室溫下置于翻轉(zhuǎn)混合儀或者手工輕輕翻轉(zhuǎn)離心管10min,使抗原與抗體充分結(jié)合,如結(jié)合力較弱則可在室溫下反應(yīng)1h或者在4℃下反應(yīng)過(guò)夜。2)洗雜:將上述完成抗原吸附的填料-抗體-抗原復(fù)合物進(jìn)行離心,800rpm離心1min,收集上清液,置于冰上以備后續(xù)檢測(cè)。向離心管中加入1ml洗雜液,用移液器輕輕吹打使填料-抗體-抗原復(fù)合物均勻分散,然后進(jìn)行離心分離,800rpm離心1min,棄上清液。再重復(fù)洗滌兩次。***加入1ml洗雜液,用移液器將填料-抗體-抗原復(fù)合物懸液轉(zhuǎn)移至新的1.5ml離心管中,并進(jìn)行離心分離,800rpm離心1min,棄上清液江西定制試劑生產(chǎn)商GST標(biāo)簽蛋白純化和標(biāo)簽去除。
蛋白純化試劑常州天地人和Strep-tag標(biāo)記技術(shù)可用于從各種表達(dá)系統(tǒng)中純化功能性鏈球菌標(biāo)記蛋白,包括桿狀病毒、哺乳動(dòng)物細(xì)胞、酵母和細(xì)菌。該技術(shù)可耐受不同的緩沖條件和添加劑(高鹽、洗滌劑、還原劑、金屬離子和螯合劑),普遍適用于大部分蛋白質(zhì)性質(zhì),而且方便于蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)質(zhì)檢相互作用分析。一般來(lái)說(shuō),上述兩種標(biāo)簽都不干擾目標(biāo)蛋白的折疊或生物活性,不與重金屬離子反應(yīng),不具有離子交換特性,也不會(huì)引起蛋白質(zhì)聚集。因此,純化后無(wú)需去除Strep-tagII和TwinStrep-tagII。此外,TwinStrep-tagII/STarmSterptaction組合適用于固定化和檢測(cè)分析應(yīng)用,如ELISA或SPR。這種多功能性使得Strep-tag標(biāo)記技術(shù)優(yōu)于其他可用的基于標(biāo)記的親和純化系統(tǒng)。STarmStreptactinBeads4FF的配體蛋白是Streptactin的突變體,其偶聯(lián)至高度交聯(lián)的4%瓊脂糖微球上。樣品中低濃度(50umol/L)的D-生物素不會(huì)影響目的蛋白和STarmStreptactinBeads4FF的結(jié)合效果。該產(chǎn)品在使用后可用平衡液再生,或者使用10mMNaOH進(jìn)行一定程度的清洗。
上海楚知生物蛋白純化試劑產(chǎn)品介紹:c-Myc蛋白含有bHLH結(jié)構(gòu)域,該蛋白在正常機(jī)體發(fā)育和**發(fā)生過(guò)程中起著非常重要的作用,c-Myc是一個(gè)重要的轉(zhuǎn)錄因子,其異常表達(dá)能促進(jìn)多種**的的發(fā)生和發(fā)展。將人p62c-Myc蛋白的410-419這段氨基酸序列(EQKLISEEDL)融合至目的蛋白的N端或者是C端,可以對(duì)目的蛋白進(jìn)行準(zhǔn)確的檢測(cè)、定位和純化。抗體來(lái)源:小鼠交叉反應(yīng):c-Myc標(biāo)簽融合蛋白克隆類型:?jiǎn)慰寺】贵w亞型:IgG2A來(lái)源:293細(xì)胞表達(dá)的重組抗體純化方式:rProteinA親和純化產(chǎn)品純度:≥95%,SDS-PAGE檢測(cè)儲(chǔ)存緩沖液:1×PBS(pH7.4),0.02%疊氮鈉,50%甘油儲(chǔ)存條件:干冰運(yùn)輸,-20℃可保存一年,避免反復(fù)凍融上海天地人和經(jīng)銷商聯(lián)系方式.
試劑篇:藥物分離主要方法,(1) 根據(jù)分子大小不同的分離方法:透析和超過(guò)濾(利用蛋白質(zhì)分子不能通過(guò)半透膜的性質(zhì));密度梯度離心(蛋白質(zhì)在介質(zhì)中離心時(shí)質(zhì)量和密度較大的顆粒沉降較快);凝膠過(guò)濾(一種柱層析)(2) 利用溶解度差別分離:等電點(diǎn)沉淀法(由于蛋白質(zhì)分子在等電點(diǎn)時(shí)凈電荷為零,減少了分子間靜電斥力,因而容易聚集沉淀,此時(shí)溶解度**?。?;鹽溶與鹽析(利用一定濃度鹽溶液增大或減小蛋白質(zhì)的溶解度)(3) 根據(jù)電荷不同的分離方法,主要包括電泳和離子交換層析分離;(4) 蛋白質(zhì)的選擇吸附分離(利用顆粒吸附力的強(qiáng)弱不同達(dá)到分離目的)(5) 根據(jù)配體特性的分離——親和層析(利用蛋白質(zhì)分子與另一種稱為配體的分子能夠特異而非共價(jià)地結(jié)合這一生物性質(zhì))(6) 低溫有機(jī)溶劑沉淀法: 用與水可混溶的有機(jī)溶劑,甲醇,乙醇或**,可使多數(shù)蛋白質(zhì)溶解度降低并析出,此法分辨力比鹽析高,但蛋白質(zhì)較易變性,應(yīng)在低溫下進(jìn)行。蛋白純化試劑哪個(gè)品牌好?上海多肽試劑代理銷售價(jià)格
一步純化檢測(cè)原核,酵母或哺乳性動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)的標(biāo)簽蛋白。廣東抗體純化試劑報(bào)價(jià)
蛋白純化試劑.產(chǎn)品介紹,DextrinBeads是一種純化帶有麥芽糖結(jié)合蛋白(MBP)標(biāo)簽蛋白的親和層析介質(zhì),具體性能見(jiàn)表1。MBP可促進(jìn)連接蛋白的正確折疊,增加在細(xì)菌中過(guò)量表達(dá)的融合蛋白的溶解性,尤其是真**白。DextrinBeads可以一步純化MBP融合蛋白,結(jié)合的融合蛋白可以用10mM麥芽糖進(jìn)行溫和洗脫,保護(hù)了標(biāo)簽蛋白的活性。如果要去除MBP融合部分可用位點(diǎn)特異性蛋白酶切除。問(wèn)題及解決方案問(wèn)題原因分析:柱子反壓過(guò)高填料被堵塞按照第3部分進(jìn)行樹(shù)脂清洗。裂解液中含有微小的固體顆粒,建議上柱前使用濾膜(0.22或0.45μm)過(guò)濾,或者離心去除。目的蛋白沒(méi)有吸附目的蛋白未表達(dá)確保目的蛋白表達(dá)樣品或緩沖液中存在一些干擾因素如非離子去污劑樣品透析或用結(jié)合液稀釋細(xì)胞產(chǎn)生大量的淀粉酶影響結(jié)合力培養(yǎng)基中添加葡萄糖,抑制淀粉酶的表達(dá)融合蛋白使麥芽糖結(jié)合位點(diǎn)阻塞或扭曲,影響了目的蛋白的結(jié)合力更換載體柱子結(jié)合時(shí)間太短將樣品與DextrinBeads振蕩孵育4度2小時(shí)或更長(zhǎng)時(shí)間洗脫樣品較雜目的蛋白降解加一些蛋白酶抑制劑,如PMSF、EDTA等平衡/洗雜不充分增加平衡液體積,確保樹(shù)脂充分平衡/洗雜,如樹(shù)脂太臟按照第3部分進(jìn)行樹(shù)脂清洗廣東抗體純化試劑報(bào)價(jià)
上海楚知生物科技有限公司位于上海市松江區(qū)淶坊路1000號(hào)新虹橋企業(yè)天地919室,擁有一支專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)。專業(yè)的團(tuán)隊(duì)大多數(shù)員工都有多年工作經(jīng)驗(yàn),熟悉行業(yè)專業(yè)知識(shí)技能,致力于發(fā)展上海楚知生物的品牌。公司以用心服務(wù)為重點(diǎn)價(jià)值,希望通過(guò)我們的專業(yè)水平和不懈努力,將從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)技術(shù)開(kāi)發(fā)、技術(shù)咨詢,化學(xué)試劑(除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、**爆竹、民用物品、易制毒化學(xué)品),實(shí)驗(yàn)室設(shè)備(除醫(yī)療器械),辦公家具,計(jì)算機(jī)、軟件及輔助設(shè)備(除計(jì)算機(jī)信息系統(tǒng)安全**產(chǎn)品),化工原料及產(chǎn)品(除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、**爆竹、民用爆竹物品、易制毒化學(xué)品)銷售。 【依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目,經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后方可開(kāi)展經(jīng)營(yíng)活動(dòng)】等業(yè)務(wù)進(jìn)行到底。上海楚知生物科技有限公司主營(yíng)業(yè)務(wù)涵蓋知楚搖床,博旅發(fā)酵罐,小動(dòng)物發(fā)光成像,ATS高壓均質(zhì)機(jī),堅(jiān)持“質(zhì)量保證、良好服務(wù)、顧客滿意”的質(zhì)量方針,贏得廣大客戶的支持和信賴。