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Ni NTA Beads是以4%瓊脂糖凝膠為基質(zhì),通過化學(xué)方法偶聯(lián)了四配位的氮川三乙酸(NTA),螯合鎳離子(Ni2+)后,可以形成非常穩(wěn)定的八面體結(jié)構(gòu),鎳離子處于八面體的中心,這樣的結(jié)構(gòu)很有效的保護(hù)了鎳離子免受小分子的進(jìn)攻(產(chǎn)品結(jié)構(gòu)見圖1所示,三種產(chǎn)品結(jié)構(gòu)的區(qū)別),更加穩(wěn)定,具體性能見表1。Ni NTA Beads可以耐受一定濃度的還原劑、變性劑或耦合劑等苛刻條件(見表2),適用性更廣,配體更穩(wěn)定,選擇性更高。 選蛋白純化試劑iu選上海楚知-天地人和常見的蛋白質(zhì)分離純化方法。湖北抗體純化試劑怎么樣
蛋白純化試劑常州天地人和Strep-tag標(biāo)記技術(shù)可用于從各種表達(dá)系統(tǒng)中純化功能性鏈球菌標(biāo)記蛋白,包括桿狀病毒、哺乳動物細(xì)胞、酵母和細(xì)菌。該技術(shù)可耐受不同的緩沖條件和添加劑(高鹽、洗滌劑、還原劑、金屬離子和螯合劑),普遍適用于大部分蛋白質(zhì)性質(zhì),而且方便于蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)質(zhì)檢相互作用分析。一般來說,上述兩種標(biāo)簽都不干擾目標(biāo)蛋白的折疊或生物活性,不與重金屬離子反應(yīng),不具有離子交換特性,也不會引起蛋白質(zhì)聚集。因此,純化后無需去除Strep-tagII和TwinStrep-tagII。此外,TwinStrep-tagII/STarmSterptaction組合適用于固定化和檢測分析應(yīng)用,如ELISA或SPR。這種多功能性使得Strep-tag標(biāo)記技術(shù)優(yōu)于其他可用的基于標(biāo)記的親和純化系統(tǒng)。STarmStreptactinBeads4FF的配體蛋白是Streptactin的突變體,其偶聯(lián)至高度交聯(lián)的4%瓊脂糖微球上。樣品中低濃度(50umol/L)的D-生物素不會影響目的蛋白和STarmStreptactinBeads4FF的結(jié)合效果。該產(chǎn)品在使用后可用平衡液再生,或者使用10mMNaOH進(jìn)行一定程度的清洗。江西多肽試劑純化流程脫鹽柱產(chǎn)品哪一家的好?
蛋白純化試劑 IMAC Beads 6FF是以高度交聯(lián)的6%瓊脂糖凝膠為基質(zhì),配體結(jié)構(gòu)見圖1所示,填料可以用于螯合各種金屬離子,如Cu2+, Zn2+, Ni2+,Co2+, 對His標(biāo)簽的結(jié)合能力Cu2+>Zn2+>Ni2+ >Co2+,可根據(jù)金屬離子對標(biāo)簽蛋白的結(jié)合力來選擇需要螯合的金屬離子。具體性能見表1。IMAC Beads 6FF除了可以耐受苛刻的試劑條件(見表2)外,因其耐壓的基質(zhì),可以耐受比較高0.3 MPa的壓力,更穩(wěn)定,因此該產(chǎn)品更適合用于工業(yè)大規(guī)模蛋白的純化,可以在相對較高的流速下,實(shí)現(xiàn)對目的蛋白的純化。
蛋白純化試劑 Dextrin Beads 6FF是一種純化帶有麥芽糖結(jié)合蛋白(MBP)標(biāo)簽蛋白的親和層析介質(zhì),具體性能見表1。MBP可促進(jìn)連接蛋白的正確折疊,增加在細(xì)菌中過量表達(dá)的融合蛋白的溶解性,尤其是真**白。Dextrin Beads 6FF可以一步純化MBP融合蛋白,結(jié)合的融合蛋白可以用10mM麥芽糖進(jìn)行溫和洗脫,保護(hù)了標(biāo)簽蛋白的活性。如果要去除MBP融合部分可用位點(diǎn)特異性蛋白酶切除。問題及解決方案柱子反壓過高 填料被堵塞按照第3部分進(jìn)行樹脂清洗。裂解液中含有微小的固體顆粒,建議上柱前使用濾膜 (0.22或 0.45μm) 過濾,或者離心去除。目的蛋白沒有吸附目的蛋白未表達(dá)確保目的蛋白表達(dá)樣品或緩沖液中存在一些干擾因素如非離子去污劑樣品透析或用平衡液稀釋細(xì)胞產(chǎn)生大量的淀粉酶影響結(jié)合力培養(yǎng)基中添加葡萄糖,抑制淀粉酶的表達(dá)融合蛋白使麥芽糖結(jié)合位點(diǎn)阻塞或扭曲,影響了目的蛋白的結(jié)合力更換載體柱子結(jié)合時(shí)間太短將樣品與Dextrin Beads 6FF振蕩孵育4度2小時(shí)或更長時(shí)間洗脫樣品較雜目的蛋白降解加一些蛋白酶抑制劑,如PMSF、EDTA等平衡/洗雜不充分增加平衡液體積,確保樹脂充分平衡/洗雜,如樹脂太臟按照第3部分進(jìn)行樹脂清洗。蛋白純化試劑哪家好?
蛋白純化試劑產(chǎn)品介紹,Strep-tag是一種在蛋白純化系統(tǒng)中應(yīng)用***的親和標(biāo)簽。它包括兩種類型Strep-tagII和TwinStrep-tagII。Strep-tagII是一個(gè)短肽標(biāo)簽,由8個(gè)氨基酸(WSHPQFEK)組成,可以作為N端或C端標(biāo)簽與蛋白質(zhì)融合,對重組蛋白的影響很小。進(jìn)一步改進(jìn)的TwinStrep-tagII是一個(gè)順序排列的兩個(gè)Strep-tagII序列(通過內(nèi)部氨基酸連接),該標(biāo)簽?zāi)軌蛳馭trep-tagII一樣進(jìn)行溫和、快速的純化。這兩個(gè)標(biāo)簽可以自由結(jié)合Streptactin和STarmSterptactin中的任一配體。標(biāo)簽/配體的結(jié)合取決于所需的結(jié)合強(qiáng)度和應(yīng)用。這兩個(gè)標(biāo)簽和Streptaction和STarmSterptaction的親和力在μg/ml范圍內(nèi),這種高親和性是任何其他現(xiàn)有親和性標(biāo)記系統(tǒng)都無法實(shí)現(xiàn)的。此外,這種結(jié)合標(biāo)簽和配體的靈活性允許在生理?xiàng)l件下純化重組蛋白。GFP標(biāo)簽蛋白的表達(dá)及應(yīng)用。浙江離子交換試劑純化流程
中壓預(yù)裝柱HiPur系列HiSelect Ni 6FF。湖北抗體純化試劑怎么樣
蛋白純化試劑.產(chǎn)品介紹,DextrinBeads是一種純化帶有麥芽糖結(jié)合蛋白(MBP)標(biāo)簽蛋白的親和層析介質(zhì),具體性能見表1。MBP可促進(jìn)連接蛋白的正確折疊,增加在細(xì)菌中過量表達(dá)的融合蛋白的溶解性,尤其是真**白。DextrinBeads可以一步純化MBP融合蛋白,結(jié)合的融合蛋白可以用10mM麥芽糖進(jìn)行溫和洗脫,保護(hù)了標(biāo)簽蛋白的活性。如果要去除MBP融合部分可用位點(diǎn)特異性蛋白酶切除。問題及解決方案問題原因分析:柱子反壓過高填料被堵塞按照第3部分進(jìn)行樹脂清洗。裂解液中含有微小的固體顆粒,建議上柱前使用濾膜(0.22或0.45μm)過濾,或者離心去除。目的蛋白沒有吸附目的蛋白未表達(dá)確保目的蛋白表達(dá)樣品或緩沖液中存在一些干擾因素如非離子去污劑樣品透析或用結(jié)合液稀釋細(xì)胞產(chǎn)生大量的淀粉酶影響結(jié)合力培養(yǎng)基中添加葡萄糖,抑制淀粉酶的表達(dá)融合蛋白使麥芽糖結(jié)合位點(diǎn)阻塞或扭曲,影響了目的蛋白的結(jié)合力更換載體柱子結(jié)合時(shí)間太短將樣品與DextrinBeads振蕩孵育4度2小時(shí)或更長時(shí)間洗脫樣品較雜目的蛋白降解加一些蛋白酶抑制劑,如PMSF、EDTA等平衡/洗雜不充分增加平衡液體積,確保樹脂充分平衡/洗雜,如樹脂太臟按照第3部分進(jìn)行樹脂清洗湖北抗體純化試劑怎么樣
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