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上海楚知代理的常州天地人和試劑,GST(標簽)蛋白親和純化產(chǎn)品可以純化各種表達系統(tǒng)融合表達的谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶的目的蛋白,谷胱甘肽依賴性蛋白和谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶的重組衍生物,Glutathione Beads ,Glutathione Beads 4FF 是通過12個原子的間隔臂,用化學(xué)方法共價結(jié)合了還原型谷胱甘肽制作而成,這種特別涉及使樹脂的純化效率得到了提高, GSTPur Glutathione Kit提供了3ml Glutathione Beads重力預(yù)裝柱,GST標簽蛋白純化所需的緩沖液,方便客戶使用,操作簡單,純化率高預(yù)制膠使用電泳槽如何操作?江蘇天地人和試劑規(guī)格
上海楚知生物蛋白純化試劑,DYKDDDDK(Flag)標簽是由8個氨基酸組成的短肽,親水性強,不會占據(jù)其他表位與結(jié)合域,因此更易與抗體結(jié)合。Anti-DYKDDDDKAntibody為小鼠IgG2B重組單克隆抗體,能特異性識別融合蛋白N端、C端的DYKDDDDK標簽,***用于融合蛋白的純化、檢測和鑒定??贵w來源:小鼠交叉反應(yīng):DYKDDDDK標簽融合蛋白克隆類型:單克隆抗體亞型:IgG2B來源:293細胞表達的重組抗體純化方式:rProteinA親和純化產(chǎn)品純度:≥95%,SDS-PAGE檢測儲存緩沖液:1×PBS(pH7.4),0.02%疊氮鈉,50%甘油儲存條件:干冰運輸,-20℃可保存一年,避免反復(fù)凍融浙江天地人和試劑怎么樣較低的蛋白非特異性吸附。
rProteinA/GBeads4FF是將rProteinA/G高密度定向偶聯(lián)到高度交聯(lián)的瓊脂糖凝膠微球表面,該產(chǎn)品具有更高的抗體結(jié)合能力和較低的蛋白非特異吸附率,洗脫條件更均一,一步純化即可從血清樣品中分離出純度大于90%的抗體。產(chǎn)品性能見表1。本產(chǎn)品主要用于免疫沉淀(IP)以及免疫共沉淀(Co-IP)研究,也可用于抗體固定及其它相關(guān)研究。用戶可根據(jù)目標抗體的種屬來源及亞型選擇微球的類別,純化流程本產(chǎn)品主要應(yīng)用于免疫沉淀(IP)以及免疫共沉淀(Co-IP)研究。2.1緩沖液的準備所用水和緩沖液在使用之前建議用0.22μm或0.45μm濾膜過濾。平衡/洗雜液:0.15MNaCl,20mMNa2HPO4,pH7.0洗脫液:0.1M甘氨酸,pH3.0中和液:1MTris-HCl,pH8.5交聯(lián)液:0.2M三乙醇胺,pH8.2交聯(lián)劑:DMP(dimetylpimelimidatedihydrochloride)終止液:50mMTris,pH7.5
蛋白純化試劑抗體純化rProtein A/G Beads 4FF純化流程,樣品準備上柱之前要確保樣品溶液有合適的離子強度和pH值,可以用平衡/洗雜液對血清樣品、腹水或細胞培養(yǎng)液稀釋,或者樣品用平衡/洗雜液透析。對于100mm培養(yǎng)皿中的貼壁細胞,吸除細胞培養(yǎng)液,使用預(yù)冷PBS洗滌一次后加入2ml細胞裂解液裂解細胞。對于懸浮細胞,離心收集細胞后,PBS洗滌一次后參考貼壁細胞的裂解方法進行裂解。植物或動物組織樣品可以使用液氮研磨方法裂解。具體的裂解方法請參考不同裂解液的使用說明,裂解液**終總蛋白濃度選擇在0.5-1μg/μl范圍內(nèi)較為合適。通常針對目標蛋白的表達量不同,需要對總蛋白濃度進行預(yù)實驗調(diào)整。2.3.去除非特異性結(jié)合(可省略)1)取200微升至1毫升蛋白樣品,加入約1微克和免疫沉淀時使用的IgG種屬相同的3/5常州天地人和生物科技有限公司NormalIgG和20微升充分重懸的rProteinA/GBeads4FF,4℃緩慢搖動30分鐘。2)2500rpm(約1000g)離心1分鐘,取上清用于后續(xù)的免疫沉淀。注:哺乳動物細胞內(nèi)有多種成分可以和IgG發(fā)生結(jié)合,可能會在后續(xù)免疫印跡中出現(xiàn)非特異性條帶。使用normalIgG和rProteinA/GBeads4FF對裂解液預(yù)處理可以降低非特異性吸附。蛋白純化試劑哪家好?
試劑篇:2,細胞碎片等不溶物用離心或過濾的方法除去。如果所要的蛋白主要集中在某一細胞組分,如細胞核、染色體、核糖體或可溶性細胞質(zhì)等,則可利用差速離心的方法將它們分開,收集該細胞組分作為下步純化的材料。如果碰上所要蛋白是與細胞膜或膜質(zhì)細胞器結(jié)合的,則必須利用超聲波或去污劑使膜結(jié)構(gòu)解聚,然后用適當介質(zhì)提取。粗分離當?shù)鞍踪|(zhì)提取液(有時還雜有核酸、多糖之類)獲得后,選用一套適當?shù)姆椒?,將所要的蛋白與其他雜蛋白分離開來。一般這一步的分離用鹽析、等電點沉淀和有機溶劑分級分離等方法。這些方法的特點是簡便、處理量大,既能除去大量雜質(zhì),又能濃縮蛋白溶液。有些蛋白提取液體積較大,又不適于用沉淀或鹽析法濃縮,則可采用超過濾、凝膠過濾、冷凍真空干燥或其他方法進行濃縮。核酸提取系列DNA Fragselect XP Magnetic Beads。福建抗體純化試劑哪里買
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蛋白純化試劑-ECL魯米諾化學(xué)發(fā)光試劑盒本產(chǎn)品是基于魯米諾底物的化學(xué)發(fā)光試劑盒,能夠被辣根過氧化物酶(HRP)催化發(fā)光。本試劑盒優(yōu)化了底物組成,使用了新型高效增強劑,發(fā)光強度比傳統(tǒng)ECL顯色液提高了30-100倍,并有效地降低了背景。試劑盒使用新的氧化劑代替不穩(wěn)定的雙氧水,提高了試劑盒的穩(wěn)定性,室溫可穩(wěn)定放置1年。工作液被HRP催化后,發(fā)出特定波長熒光(400-450nm),可對X光膠片曝光,也可直接使用熒光CCD掃描,主要應(yīng)用于Western檢測以及化學(xué)發(fā)光免疫檢測系統(tǒng)江蘇天地人和試劑規(guī)格
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