蛋白質(zhì)的N-糖基化特征是一個(gè)關(guān)鍵的質(zhì)量屬性。它會(huì)影響生物制藥的安全性和有效性，因此需要在開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)過(guò)程中進(jìn)行表征和監(jiān)測(cè)。常見(jiàn)的聚糖分析工作流程是用PNGase F釋放N-聚糖，然后用熒光標(biāo)記物（如2-AB、2-AA、普魯卡因胺或RapiFluor-MS?（沃特世公司））標(biāo)記生成的聚糖。然后使用HILIC-HPLC或毛細(xì)管電泳分離標(biāo)記的聚糖，以表征和定量不同的聚糖結(jié)構(gòu)。 在這里，使用游離聚糖方法分析zhiliao性抗體曲妥珠單抗、Fc-融合蛋白依那西普和糖蛋白R(shí)Nase B的N-聚糖。曲妥珠單抗和依那西普在天然條件下在37°C下用Genvois的PNGase F去糖基化1小時(shí)，而RNase B需要變性和還原才能完全去糖基化。因此，在50°C下用PNGase F去糖基化10分鐘之前，用RapiGest? SF表面活性劑（沃特世公司）和TCEP處理RNase B。 用RapiFluor-MS標(biāo)記所得游離的聚糖，并通過(guò)HILIC UPLC-FLD-MS進(jìn)行分析。C1抑制劑的去糖基化：使用PNGaseF、OglyZOR和SialEXO、GalNAcEXO1。江蘇PNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學(xué)研究

genovis分析依那西普和曲妥珠單抗游離聚糖：為了確認(rèn)依那西普和曲妥珠單抗中半乳糖損失的LC-MS數(shù)據(jù)，進(jìn)行了釋放的N-聚糖分析。標(biāo)記的N-聚糖的分離清楚地表明了依那西普和曲妥珠單抗上半乳糖的丟失，如半乳糖基化聚糖物種的信號(hào)丟失所示。該酶是一種有價(jià)值的工具，可降低樣品異質(zhì)性，用于分析攜帶α連接的 GalNAc 殘基作為未成熟截短he心 1 的復(fù)雜 O-糖蛋白。1. 高效 α-N-乙酰半乳糖胺酶 – 快速、完全去除 Tn-抗原和 α1-3-連接的 GalNAc；2. 實(shí)現(xiàn)完全糖基去除，以改善蛋白質(zhì)表征；3. 可固定在即用型離心柱中。海南瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶糖生物學(xué)研究Genovis測(cè)試了 SialEXO 凍干和 SialEXO 固定化在人 C1 抑制劑上的性能。

GlycOCATCH設(shè)計(jì)用于特異性結(jié)合粘蛋白型O-糖基化蛋白和肽。親和樹(shù)脂基于無(wú)活性的Genovis的OpeRATOR酶，該酶經(jīng)過(guò)工程設(shè)計(jì)，可以高親和力結(jié)合O-糖基化蛋白和肽。 結(jié)合在pH 5-8的生理緩沖液中進(jìn)行。由于GlycOCATCH樹(shù)脂和O-糖蛋白/肽之間的強(qiáng)相互作用，可以用8M尿素進(jìn)行洗脫?；蛘?，可以使用活性O(shè)peRATOR酶進(jìn)行洗脫，該酶消化O-聚糖位點(diǎn)的N末端結(jié)合的O-糖蛋白。在后一種情況下，肽在天然條件下回收。OpeRATOR 凍干酶包含在購(gòu)買(mǎi)中。由于 O-糖蛋白上的旋亞氨酸化 O-聚糖與樹(shù)脂結(jié)合效率更高，因此唾液酸酶混合物 SialEXO 凍干也包含在購(gòu)買(mǎi)中。

Genovis 集團(tuán)由瑞典 Genovis AB 和美國(guó)全資子公司 Genovis Inc. 組成。該公司的在納斯達(dá)克北方增長(zhǎng)市場(chǎng)上市。如需了解更多信息，請(qǐng)?jiān)L問(wèn)投資者關(guān)系。 Genovis的經(jīng)營(yíng)理念是為生物制藥和研究行業(yè)的客戶提供工具，以促進(jìn)和節(jié)省開(kāi)發(fā)新治療方法和診斷的時(shí)間。Genovis 酶產(chǎn)品，稱為 SmartEnzymes，被世界各地的科學(xué)家使用，創(chuàng)新的產(chǎn)品形式促進(jìn)了生物藥物的開(kāi)發(fā)和質(zhì)量控制。 通過(guò)在2020年收購(gòu)QED Bioscience，產(chǎn)品組合已擴(kuò)大到包括用于研究、生物藥物開(kāi)發(fā)和診斷檢測(cè)的抗體和試劑。在 網(wǎng)站 上閱讀有關(guān)QED的更多信息 Genovis 研發(fā)活動(dòng)的基石是客戶關(guān)系，使產(chǎn)品開(kāi)發(fā)能夠滿足客戶需求。與專(zhuān)注于表征新酶、開(kāi)發(fā)新工作流程和新靶點(diǎn)抗體的學(xué)術(shù)團(tuán)體的合作同樣有價(jià)值。實(shí)現(xiàn) O-糖譜分析、位點(diǎn)占用測(cè)定和 O-糖肽圖譜以及使用 LC-MS 分析的中級(jí)方法。

用于水解β1-3,4-連接半乳糖的固定化酶在離心柱中的糖蛋白上。Genovis的GalactEXO固定化離心柱含有與瓊脂糖珠共價(jià)偶聯(lián)的GalactEXO酶，用于糖蛋白上β1-3,4-連接半乳糖的水解，而不會(huì)用酶污染z終制劑。Microspin 色譜柱可用于水解 5 或 10 x 0.5 mg 糖蛋白。1. 易于使用的離心柱；2. 提高酶與底物的比例，提高消化效率；3. z終樣品中不含酶。GalactEXO 酶來(lái)源于 Akkermansia muciniphila 并重組表達(dá)，可有效水解 β1-3 和 β1-4 連接的半乳糖。GalactEXO微離心柱經(jīng)過(guò)格式化，可在30-60分鐘內(nèi)水解0.5mg糖蛋白中的半乳糖。實(shí)現(xiàn)高通量 N-糖去除，簡(jiǎn)化糖蛋白底物的下游分析。安徽PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis

PNGase F是一種非常成熟的工具。O-糖的去除可能更具挑戰(zhàn)性，現(xiàn)有的O-糖釋放化學(xué)方法不太適合下游分析。江蘇PNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學(xué)研究

在抗體藥物及核酸藥物領(lǐng)域，倍篤生物產(chǎn)品線涵蓋藥物研發(fā)的全流程，主要用——RNA轉(zhuǎn)染試劑、生物活性物質(zhì)純化分離用填料產(chǎn)品、ADC的payload抗體（如anti-DXD、anti-Eribulin、anti-MMAE等）、動(dòng)物造模用陽(yáng)性及陰性抗體、泊洛沙姆P 188 Bio、工藝雜質(zhì)及外源污染物殘留檢測(cè)產(chǎn)品、抗體結(jié)構(gòu)域分析蛋白酶、蛋白聚糖分析水解酶等，品牌有瑞典Genovis、德國(guó)BASF、美國(guó)QED、中國(guó)君研生物、中國(guó)金傳生物、中國(guó)毫厘科技、中國(guó)再帆生物等。這些國(guó)產(chǎn)品牌都具有國(guó)內(nèi)自研、自產(chǎn)能力，批次生產(chǎn)穩(wěn)定可靠、品質(zhì)可控，為行業(yè)發(fā)展提供更多國(guó)產(chǎn)選擇。江蘇PNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學(xué)研究