酸法提取是利用一定濃度的酸溶液在一定的條件下提取膠原蛋白，主要采用低離子濃度酸性條件破壞分子間鹽鍵和希夫堿，而引起纖維膨脹、溶解，采用酸法提取的膠原蛋白通常成為酸溶性膠原蛋白。酸溶解法可將沒有交聯(lián)的膠原分子溶解出來，也可溶解含有醛胺類交聯(lián)鍵的膠原纖維，然后釋放到溶劑中。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法，用低溫酸法提取的膠原很大程度的保持了其三螺旋結(jié)構(gòu)，適用于醫(yī)用生物材料及原料的制備。通常的做法是將適當(dāng)濃度的酸液按一定料液比加入到經(jīng)過預(yù)處理的骨粉中，于0～25℃攪拌提取一定時(shí)間。在采用酸法進(jìn)行膠原蛋白的提取時(shí)，注意提取溫度不宜過高，以免膠原蛋白的生物活性發(fā)生破壞。取樣經(jīng)前處理后，勻漿在低溫下用酸浸提，離心即可得酸溶性膠原蛋白（acid-solublecollagen，ASC）。作為溶劑使用的酸，主要有鹽酸、磷酸、甲酸、乙酸、蘋果酸、檸檬酸等，但大多數(shù)研究集中于乙酸抽提，像MariaSadowska等用，其提取率略低于乙酸提取。檸檬酸因不產(chǎn)生顏色和異味得以比較廣使用于食品工業(yè)的膠原蛋白的提取。 膠原蛋白就好比一鍋才煮了一會兒的奶白色雞湯。上海海參膠原蛋白粉

膠原蛋白里，膠原三肽的用途化妝品中的作用保濕、滋養(yǎng)、亮膚、緊膚、防皺、修復(fù)。CTP親和性極好，已在膜類日霜晚霜、洗發(fā)護(hù)發(fā)、洗面奶等類型產(chǎn)品中得到運(yùn)用。食品工業(yè)的作用營養(yǎng)性、修復(fù)性、保濕性、親和性。CTP可以運(yùn)用到口服美容功能食品、防止衰老老老老功能食品、補(bǔ)鈣功能食品、塑身功能食品及特殊人群食品（如調(diào)節(jié)女性內(nèi)分泌失調(diào)、促進(jìn)胃潰瘍愈合等）。作為食品添加劑可以運(yùn)用到普通食品中，用作肉制品、冷凍食品、乳制品等的改良劑，使產(chǎn)品性狀更優(yōu)，口感更好。湖南魚膠原蛋白原料廠家膠原蛋白質(zhì)為主要的膠原腸衣本身是營養(yǎng)豐富的高蛋白物質(zhì)。

    化學(xué)方法比物理方法改。聯(lián)度高，且能獲得均勻一致的交聯(lián)，對調(diào)節(jié)、控制膠原的各性質(zhì)均有效。已廣泛應(yīng)用于各種化學(xué)試劑交聯(lián)膠原，以提高其交聯(lián)度、力學(xué)性能及生物相容性?；瘜W(xué)改性法具體又可分為使用化學(xué)試劑交聯(lián)、側(cè)鏈的修飾、生理活性物的固定化三種方法。[130]化學(xué)試劑交聯(lián)法中常用的化學(xué)交聯(lián)劑有戊二醛、己異二氰酸酯、碳化二亞胺、疊氮二苯基磷等，其中戊二醛是應(yīng)用較比較廣的試劑，大量實(shí)驗(yàn)證明：戊二醛能提供有效交聯(lián)，但有細(xì)胞毒性，且其用量難以控制。另外，隨著交聯(lián)度的增加，吸水能力和膨脹度卻會降低。?；B氮化物、聚環(huán)氧化物或京尼平交聯(lián)等，不會引入明顯的毒性，且可獲得理想的交聯(lián)效果。所見報(bào)道中，多使用單一交聯(lián)劑對膠原蛋白交聯(lián)改性，但也有使用混合交聯(lián)劑的，如為了解決人工心臟瓣膜晚期鈣化問題，篩選出環(huán)氧丙烷化學(xué)改性戊二醛處理生物瓣的方法，可明顯減低瓣膜組織膠原蛋白末端游離羧基含量。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，經(jīng)改性后的瓣膜組織能保持較好的組織穩(wěn)定性和機(jī)械抗張強(qiáng)度、免疫原性測試為陰性，符合臨床應(yīng)用。

    可用于膠原蛋白的純化方法包括鹽析法、透析法、離心法、電泳法和色譜法，其中鹽析法、離心法和電泳法較為常用。由于單一方法難以完全分離純化膠原蛋白，實(shí)際操作都是通過復(fù)合法來達(dá)到分離純化膠原蛋白的目的。鹽析法一般采用高濃度NaCl；離心法常選用制備型低溫超速離心機(jī)；電泳法多采用十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳法（SDS-PAGE），該法既可用于膠原蛋白的分離純化，還可用來測定膠原蛋白分子的相對分子質(zhì)量。像有人用破碎、酶解、鹽析三步法提純蘇尼特羊骨骼I型膠原蛋白。先去除骨頭里的非膠原物質(zhì)，然后往沉淀中10%的胃蛋白酶，在4℃的條件下消化24h，以14000r/min離心40min。棄沉淀往上清液中加NaCL，使它終濃度達(dá)到，靜止過夜，再離心，現(xiàn)在的沉淀就是I型膠原蛋白。 作用營養(yǎng)性、修復(fù)性、保濕性、親和性。

    采用酶法提取膠原蛋白時(shí)，必須嚴(yán)格控制提取條件：首先，酶作用時(shí)間必須適當(dāng)。如果時(shí)間過短，膠原蛋白就不能充分釋放到提取液中，影響提取率；如果酶作用時(shí)間過長，膠原蛋白會水解過度，產(chǎn)生過多的苦味小分子低聚肽，不僅會增加分離純化的難度，也會影響膠原蛋白的功能特性和生物活性。其次，酶解溫度要適宜。溫度過低，酶的作用效果不明顯；溫度過高會引起酶的失活和膠原蛋白的變性。據(jù)報(bào)道，當(dāng)介質(zhì)pH略低于中性時(shí)，膠原蛋白的變性溫度為40～41℃，當(dāng)介質(zhì)pH為酸性時(shí)，膠原蛋白的變性溫度為38～39℃，而且魚皮膠原蛋白的變性溫度要比豬皮膠原蛋白的變性溫度低7～12℃。所以，如果要使提取的膠原蛋白具有良好的生物活性，在提取過程中應(yīng)使提取溫度低于變性溫度。第三，需選用適當(dāng)?shù)拿?。一般從陸生哺乳?dòng)物組織中提取膠原蛋白時(shí)，采用胃蛋白酶在其較適作用溫度下進(jìn)行提取是合理的，但對于魚類等水生動(dòng)物，由于其膠原蛋白的變性溫度比陸生哺乳動(dòng)物低，因此許多蛋白酶便不適用，如果在這些酶的較適作用溫度下提取可能會破壞膠原蛋白的某些功能特性和生物活性。采用酶法提取膠原蛋白及其多肽的研究主要是從動(dòng)物皮及其加工副產(chǎn)物中。 膠原蛋白是人體骨骼，尤其是軟骨組織中的重要組成成分。四川骨膠原蛋白粉

膠原蛋白不易被普通蛋白酶水解，但能被動(dòng)物膠原酶斷裂。上海海參膠原蛋白粉

免疫學(xué)分析和研究結(jié)果表明，使用膠原加完全弗氏佐劑，能對膠原產(chǎn)生多克隆和單克隆抗體。由T細(xì)胞啟動(dòng)的對膠原蛋白免疫反應(yīng)的證據(jù)是，位于重要組織相容性（H-2）部位上ⅠA或ⅠB亞區(qū)的免疫反應(yīng)基因已被鑒定。膠原蛋白免疫原性的臨床評價(jià)通常是皮膚過敏性測試（細(xì)胞免疫指數(shù)，遲發(fā)性Ⅳ型反應(yīng)）和由反應(yīng)型抗體的存在（體液免疫指數(shù)）來確定的。實(shí)踐證明，在患者身上進(jìn)行這兩種評價(jià)是合理的。在治好前，用過敏劑量的植入性膠原對患者進(jìn)行皮試，大約3%有潛在的反應(yīng)，反復(fù)多次處理的患者，大約1%～2%會產(chǎn)生遲發(fā)性過敏性的臨床病狀。典型的癥狀包括局部水腫和紅斑反應(yīng)，有的還伴有硬化和瘙癢，持續(xù)時(shí)間4～6個(gè)月，個(gè)別甚至可達(dá)1年以上。上海海參膠原蛋白粉

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