可用于膠原蛋白的純化方法包括鹽析法、透析法、離心法、電泳法和色譜法,其中鹽析法、離心法和電泳法較為常用。由于單一方法難以完全分離純化膠原蛋白,實際操作都是通過復(fù)合法來達到分離純化膠原蛋白的目的。鹽析法一般采用高濃度NaCl;離心法常選用制備型低溫超速離心機;電泳法多采用十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳法(SDS-PAGE),該法既可用于膠原蛋白的分離純化,還可用來測定膠原蛋白分子的相對分子質(zhì)量。像有人用破碎、酶解、鹽析三步法提純蘇尼特羊骨骼I型膠原蛋白。先去除骨頭里的非膠原物質(zhì),然后往沉淀中10%的胃蛋白酶,在4℃的條件下消化24h,以14000r/min離心40min。棄沉淀往上清液中加NaCL,使它終濃度達到,靜止過夜,再離心,現(xiàn)在的沉淀就是I型膠原蛋白。 而且膠原蛋白對環(huán)境的污染也較小。浙江復(fù)合膠原蛋白哪個牌子好
在水產(chǎn)動物體內(nèi)膠原蛋白含量高于陸生動物,如鰱魚、鳙魚和草魚魚皮的蛋白質(zhì)含量分別為、,均高于各自相應(yīng)魚肉的蛋白質(zhì)含量:、。而魚皮中的膠原含量比較高可超過其蛋白質(zhì)總量的80%,較魚體的其它部位要高許多,有研究報道真鯛魚皮中膠原蛋白占粗蛋白的,鰻鱺則高達。如此高的含量意味著得率也高,如小鮪鰹;日本海鱸;香魚;黃海鯛;竹莢魚(均以干重計)。但膠原蛋白的種類要少得多,已從魚類中分離鑒定出的膠原類型有:比較廣分布在真皮、骨、鱗、鰾、肌肉等處的I型、軟骨和脊索的Ⅱ型和Ⅺ型以及肌肉的V型。而魚皮和魚骨所含的Ⅰ型膠原蛋白是其主要膠原蛋白。此外,還發(fā)現(xiàn)ⅩⅧ型膠原,然而哺乳動物中含量比較豐富的Ⅲ型膠原,在水產(chǎn)動物中尚未發(fā)現(xiàn)。其中只有Ⅰ型膠原蛋白的價格人們才可以接受;其它類型的膠原如Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ等只在研究中制備,由于價格昂貴都不宜于大量生產(chǎn)。 江蘇復(fù)合膠原蛋白右手螺旋形式纏繞成“草繩狀”三股螺旋結(jié)構(gòu),使膠原具有很高的拉伸強度。
膠原蛋白中甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、脯氨酸(Pro)和谷氨酸(Glu)含量較高,特別是甘氨酸,約占總氨基酸的27%,也有報道說占1/3,即每隔兩個其它氨基酸殘基(X,Y)即有一個甘氨酸,故其肽鏈可用(Gly-X-Y)n來表示。每個原膠原分子由三條α-肽鏈組成,α-肽鏈自身為α螺旋結(jié)構(gòu),肽鏈中每三個氨基酸殘基中就有一個要經(jīng)過此三股螺旋中間區(qū),而此處空間十分狹窄,只有甘氨酸適合于此位置,由此可解釋其氨基酸組成中每隔兩個氨基酸殘基出現(xiàn)一個甘氨酸的特點。特別注意,X、Y均表示任意的氨基酸,只不過X通常是脯氨酸,Y通常指羥脯氨酸。同時還含有少量3-羥脯氨酸(3-hydroxyproline)和5-羥賴氨酸(5-hydroxylysine,Hyl)。羥脯氨酸殘基可通過形成分子內(nèi)氫鍵穩(wěn)定膠原蛋白分子。三條α-肽鏈借范德化力、氫鍵及共價交聯(lián)則以平行、右手螺旋形式纏繞成“草繩狀”三股螺旋結(jié)構(gòu),使膠原具有很高的拉伸強度。
酶法提取是指可溶性膠原和酸溶性膠原被提取后,需用一些蛋白酶,如膠原酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰凝乳蛋白酶等水解,得到不同的酶促溶性膠原蛋白。所使用的蛋白酶主要分3種:動物蛋白酶(如胰蛋白酶,胃蛋白酶),植物蛋白酶(如木瓜蛋白酶,菠蘿蛋白酶),微生物蛋白酶(如堿性蛋白酶,中性蛋白酶)。在對酶法水解膠原蛋白的研究中,以堿性蛋白酶應(yīng)用較多。將膠原進行限制性降解,即將末端肽切割下來,由于膠原肽鏈間的共價鍵都是通過分子末端肽里的賴氨酸或羥賴氨酸的相互作用形成的,末端肽被切下后,含三螺旋結(jié)構(gòu)的主體部分可溶于稀有機酸而被提取出來。用酶處理,可以水解掉膠原纖維蛋白的末端肽,提高膠原蛋白的產(chǎn)率;而且還不會破壞膠原蛋白的三股螺旋結(jié)構(gòu),保持其特性。影響酶提取的因素有很多,如酶濃度、酶與底物的比例、酶解時間、酶解溫度、pH值以及料液比等。在實際操作中,大多數(shù)采用酶復(fù)合法提取膠原蛋白,較多的是使用胃蛋白酶提取,有機酸多為乙酸。 在這些酶的較適作用溫度下提取可能會破壞膠原蛋白的某些功能特性和生物活性。
免疫學(xué)分析和研究結(jié)果表明,使用膠原加完全弗氏佐劑,能對膠原產(chǎn)生多克隆和單克隆抗體。由T細胞啟動的對膠原蛋白免疫反應(yīng)的證據(jù)是,位于重要組織相容性(H-2)部位上ⅠA或ⅠB亞區(qū)的免疫反應(yīng)基因已被鑒定。膠原蛋白免疫原性的臨床評價通常是皮膚過敏性測試(細胞免疫指數(shù),遲發(fā)性Ⅳ型反應(yīng))和由反應(yīng)型抗體的存在(體液免疫指數(shù))來確定的。實踐證明,在患者身上進行這兩種評價是合理的。在治好前,用過敏劑量的植入性膠原對患者進行皮試,大約3%有潛在的反應(yīng),反復(fù)多次處理的患者,大約1%~2%會產(chǎn)生遲發(fā)性過敏性的臨床病狀。典型的癥狀包括局部水腫和紅斑反應(yīng),有的還伴有硬化和瘙癢,持續(xù)時間4~6個月,個別甚至可達1年以上。酶解膠原蛋白的工藝主要分為單酶水解法和多酶水解法。湖北魚膠原蛋白液體飲品
膠原三肽的分子量極小。浙江復(fù)合膠原蛋白哪個牌子好
海南省華上生物科技有限公司生產(chǎn)鱈魚小分子膠原蛋白肽產(chǎn)品、羅非魚膠原蛋白肽產(chǎn)品。全球的膠原蛋白以魚類提取為主。a、魚鱗中提取的膠原蛋白魚鱗提取的膠原蛋白以羅非魚居多因為羅非魚主要生長在高溫淡水水域,并且生命力較為頑強,在人工飼養(yǎng)條件下生長速度比野生深海魚快很多,這樣就比較大的降低了魚類提取膠原蛋白的原料成本,也是較為流行的魚膠原蛋白。b、深海魚皮中提取的膠原蛋白魚皮提取的膠原蛋白以深海鱈魚皮居多,鱈魚主要產(chǎn)于靠近北冰洋的太平洋、北大西洋寒冷水域,鱈魚食量大,是貪食的洄游魚類也是全世界年捕撈量比較大的的魚類之一,具有重要的經(jīng)濟價值。因為深海鱈魚在安全性方面沒有動物疫病和人工養(yǎng)殖藥物殘留等風險,并且含有其特有的抗凍蛋白,所以是各國女性較為認可的魚類膠原蛋白。 浙江復(fù)合膠原蛋白哪個牌子好
海南省華上生物科技有限公司總部位于建設(shè)三橫路金馬大廈2樓B,是一家許可項目:貨物進出口;技術(shù)進出口;食品經(jīng)營(銷售預(yù)包裝食品);食品互聯(lián)網(wǎng)銷售(銷售預(yù)包裝食品);食品互聯(lián)網(wǎng)銷售(依法須經(jīng)批準的項目,經(jīng)相關(guān)部門批準后方可開展經(jīng)營活動)一般項目:工程和技術(shù)研究和試驗發(fā)展;生物質(zhì)能技術(shù)服務(wù);發(fā)酵過程優(yōu)化技術(shù)研發(fā);生物質(zhì)能資源數(shù)據(jù)庫信息系統(tǒng)平臺;生物基材料技術(shù)研發(fā);生物化工產(chǎn)品技術(shù)研發(fā);生物基材料聚合技術(shù)研發(fā);海洋生物活性物質(zhì)提取、純化、合成技術(shù)研發(fā);中草藥種植;(除許可業(yè)務(wù)外,可自主依法經(jīng)營法律法規(guī)非禁止或限制的項目)的公司。華上生物作為許可項目:貨物進出口;技術(shù)進出口;食品經(jīng)營(銷售預(yù)包裝食品);食品互聯(lián)網(wǎng)銷售(銷售預(yù)包裝食品);食品互聯(lián)網(wǎng)銷售(依法須經(jīng)批準的項目,經(jīng)相關(guān)部門批準后方可開展經(jīng)營活動)一般項目:工程和技術(shù)研究和試驗發(fā)展;生物質(zhì)能技術(shù)服務(wù);發(fā)酵過程優(yōu)化技術(shù)研發(fā);生物質(zhì)能資源數(shù)據(jù)庫信息系統(tǒng)平臺;生物基材料技術(shù)研發(fā);生物化工產(chǎn)品技術(shù)研發(fā);生物基材料聚合技術(shù)研發(fā);海洋生物活性物質(zhì)提取、純化、合成技術(shù)研發(fā);中草藥種植;(除許可業(yè)務(wù)外,可自主依法經(jīng)營法律法規(guī)非禁止或限制的項目)的企業(yè)之一,為客戶提供良好的膠原蛋白肽,酵素蛋白肽,蠶蛹牡蠣肽。華上生物繼續(xù)堅定不移地走高質(zhì)量發(fā)展道路,既要實現(xiàn)基本面穩(wěn)定增長,又要聚焦關(guān)鍵領(lǐng)域,實現(xiàn)轉(zhuǎn)型再突破。華上生物始終關(guān)注自身,在風云變化的時代,對自身的建設(shè)毫不懈怠,高度的專注與執(zhí)著使華上生物在行業(yè)的從容而自信。