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來源: 發(fā)布時間:2021-11-15

鹽法提取是利用各種不同的鹽在不同的濃度條件下提取鹽溶性膠原蛋白的方法。常用來提取膠原的鹽有鹽酸-三羥甲基胺基甲烷(Tris-HCl)、氯化鈉、檸檬酸鹽等。在中性條件下,當鹽的濃度達到一定量時,膠原就會溶解在其中,但是膠原的溶解和分級受中性鹽效應影響,有的鹽可提高膠原的穩(wěn)定性,而有的則可降低其構象穩(wěn)定性,從而對提取天然膠原蛋白很不利。此外,可采用不同濃度的氯化鈉對提取的膠原蛋白進行鹽析處理,可以沉淀出不同類型的膠原蛋白。采用不同濃度的氯化鈉對提取的膠原蛋白進行鹽析處理,可以沉淀出不同類型的膠原蛋白。北京小分子膠原蛋白肽口服液

    交聯(lián)指使膠原分子內(nèi)部和分子間通過共價健結合提高膠原纖維的張力和穩(wěn)定性的方法。該法又分為物理方法、化學方法和低溫等離子體法,生物學方法;其中物理方法、化學方法是較常用的交聯(lián)改性方法,生物學方法改性膠原蛋白主要在研究有關動物老化的生命現(xiàn)象中涉及,在研制膠原基生物醫(yī)學材料中少見報道。[74][127]物理方法通過物理手段對膠原蛋白改性有紫外線照射、重度脫水、λ射線照射和熱交聯(lián)等方法。膠原溶液如被紫外線等照射,將在分子間產(chǎn)生交聯(lián),粘度增加,生成凝膠。常用的紫外線交聯(lián)膠原膜的方法是將膠原膜放在鋁箔上,距離254nm紫外燈20cm高度,照射1~5h。對紫外線照射的膠原膜進行力學性能和膠原酶試驗表明:交聯(lián)膠原膜的萎縮溫度Ts和抗膠原酶解的能力均明顯高于未交聯(lián)膠原膜。[128]重度脫水也是膠原蛋白物理改性中常使用的方法,該法是通過脫水導致膠原分子間交聯(lián),從而增加變性溫度,改善膠原的性能。改性后膠原膜生物相容性提高,降低了水溶性,影響了膜與成骨細胞的生物相容性。物理方法改性原蛋白的優(yōu)點是可避免外源性有毒化學物質進入膠原內(nèi),缺點是膠原膜交聯(lián)度低,且難以獲得均勻一致的交聯(lián)。 河南骨膠原蛋白固體飲料而魚皮和魚骨所含的Ⅰ型膠原蛋白是其主要膠原蛋白。

    在水產(chǎn)動物體內(nèi)膠原蛋白含量高于陸生動物,如鰱魚、鳙魚和草魚魚皮的蛋白質含量分別為、,均高于各自相應魚肉的蛋白質含量:、。而魚皮中的膠原含量比較高可超過其蛋白質總量的80%,較魚體的其它部位要高許多,有研究報道真鯛魚皮中膠原蛋白占粗蛋白的,鰻鱺則高達。如此高的含量意味著得率也高,如小鮪鰹;日本海鱸;香魚;黃海鯛;竹莢魚(均以干重計)。但膠原蛋白的種類要少得多,已從魚類中分離鑒定出的膠原類型有:比較廣分布在真皮、骨、鱗、鰾、肌肉等處的I型、軟骨和脊索的Ⅱ型和Ⅺ型以及肌肉的V型。而魚皮和魚骨所含的Ⅰ型膠原蛋白是其主要膠原蛋白。此外,還發(fā)現(xiàn)ⅩⅧ型膠原,然而哺乳動物中含量比較豐富的Ⅲ型膠原,在水產(chǎn)動物中尚未發(fā)現(xiàn)。其中只有Ⅰ型膠原蛋白的價格人們才可以接受;其它類型的膠原如Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ等只在研究中制備,由于價格昂貴都不宜于大量生產(chǎn)。

    酶解膠原蛋白的工藝主要分為單酶水解法和多酶水解法。多酶水解法又分為混合酶水解法(比如牛胰蛋白酶,鏈霉菌蛋白酶,芽孢桿菌蛋白酶混合)和分步酶水解法,酶法提取皮膠原具體實驗工藝及條件的選取通常應考慮要開發(fā)的產(chǎn)品對分子量的要求,要得到分子量較小的膠原多肽一般采用多酶水解法。影響酶解效果的因素主要有:酶的種類、加酶量、酶解溫度、酶解時間、pH值及料水比。采用酶法提取骨料中的膠原蛋白,既能有效縮短提取時間,又能獲得具有良好生物活性的膠原蛋白,而且對環(huán)境的污染也較小。膠原蛋白不易被普通蛋白酶水解,但能被動物膠原酶斷裂,斷裂的碎片自動變性后可被普通蛋白酶水解。胃蛋白酶水解膠原蛋白的適宜條件為~、溫度37℃。 無脊椎動物與脊椎動物在進化上相距遙遠,它們的膠原性質存在明顯的差異。

    以膠原蛋白為基質作真皮輔以上皮成分構成的組織工程人工皮膚藥物緩釋膠以膠原蛋白為主要成分的給藥系統(tǒng)應用非常比較廣,可以把膠原蛋白水溶液塑造成各種形式的給藥系統(tǒng),如眼科方面的膠原蛋白保護物、燒傷或創(chuàng)傷使用的膠原海綿、蛋白質傳輸?shù)奈⒘?、膠原蛋白的凝膠形式、透過皮膚給藥的調(diào)控材料以及基因傳輸?shù)募{米微粒等。此外,還可作為組織工程包括細胞培養(yǎng)系統(tǒng)的基質、人工血管和瓣膜的支架材料等。自體皮膚移植一直是治好二度和三度燒傷的全球標準方法,然而對于嚴重燒傷的病人,缺少合適的可移植的皮膚成了較嚴峻的問題,有人利用生物工程技術通過嬰兒皮膚細胞培育出嬰兒皮膚組織,這種膠原蛋白組織在沒有自體移植的情況下,在3周到18個月不等的時間里可治好不同程度的燒傷,而且新長出的皮膚也很少表現(xiàn)出肥大增生和抗性。還有人用人工合成的聚-DL-乳酸-羥基乙酸(PLGA)和天然膠原蛋白來培育三維的人皮膚纖維原細胞,結果表明:細胞在合成網(wǎng)狀物上生長更快,而且內(nèi)外幾乎同步生長,增殖細胞和分泌的胞外基質更均一,把這種纖維植入無皮的大鼠背部,2周后就長出了真皮組織,4周后就長出了上皮組織。 酶解膠原蛋白的工藝主要分為單酶水解法和多酶水解法。福建海參膠原蛋白廠家

需要的膠原蛋白,其實是一種由3個氨基酸分子組成的膠原蛋白即“膠原三肽”。北京小分子膠原蛋白肽口服液

膠原有三種類型的抗原分子:首先類是膠原肽鏈非螺旋的端肽,在天然和變性膠原中均存在。由于2個不同種類的哺乳動物中間的膠原蛋白,其整個氨基酸序列變化不是很大,而且膠原蛋白的三螺旋區(qū)域有高度的進化穩(wěn)定性,但在非螺旋的末端區(qū)域中有很大的變化性,在這區(qū)域中幾乎50%以上的氨基酸殘基表現(xiàn)出種屬性變化,大量的研究和生產(chǎn)都集中在如何完全去除端肽,只要去除端肽就認為是安全的。第二類是膠原的三股螺旋的構象,只存在于天然膠原分子中,即位于天然膠原蛋白的三螺旋結構中的抗原決定簇,會在分離和純化過程中暴露出來,尤其是含α1和α2單鏈暴露出的中間端情況下更為明顯。第三類是α-鏈螺旋區(qū)的氨基酸順序,只出現(xiàn)在變性膠原中。北京小分子膠原蛋白肽口服液

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