預(yù)處理除膠原蛋白外,動物骨中還含有油脂、多種礦物質(zhì)和其他雜質(zhì),因此在被用于提取膠原蛋白之前必須進(jìn)行預(yù)處理。先剔除動物骨上殘留的肉質(zhì)和肌腱等雜物,粉碎后用正丁醇或正己烷萃取出骨油?,F(xiàn)在除去骨中無機物以提高膠原蛋白的得率。除去骨中的礦物質(zhì)可用稀酸或EDTA溶液。有人用原料用5倍質(zhì)量的,用正乙烷脫脂后再用胃蛋白酶酶解,在加酶量150U/g,pH值,37℃條件下處理120min,然后在固液比1∶6的情況下抽提5h,在此條件下,提取率可達(dá)18%;還有人用EDTA溶液()浸泡骨料5d,可有效脫去骨料中的羥基磷灰石。[87-89]膠原蛋白的提取一般有三種方法:一是高壓輔助的物理方法;二是用溶劑預(yù)處理結(jié)合低溫或熱水抽提的化學(xué)方法,根據(jù)溶劑的不同,可分為熱水浸提法、酸法、堿法、鹽法;三是用酶的生物化學(xué)法。一般來說,高壓輔助和熱水抽提針對明膠的提取,而低溫抽提和酶法針對膠原的提取,但其基本原理都是根據(jù)膠原蛋白的特性改變蛋白質(zhì)所在的外界環(huán)境,把膠原蛋白從其他蛋白質(zhì)中分離出來。 采用酶法提取骨料中的膠原蛋白,既能有效縮短提取時間,又能獲得具有良好生物活性的膠原蛋白。小分子膠原蛋白粉
以膠原蛋白為基質(zhì)作真皮輔以上皮成分構(gòu)成的組織工程人工皮膚藥物緩釋膠以膠原蛋白為主要成分的給藥系統(tǒng)應(yīng)用非常比較廣,可以把膠原蛋白水溶液塑造成各種形式的給藥系統(tǒng),如眼科方面的膠原蛋白保護(hù)物、燒傷或創(chuàng)傷使用的膠原海綿、蛋白質(zhì)傳輸?shù)奈⒘?、膠原蛋白的凝膠形式、透過皮膚給藥的調(diào)控材料以及基因傳輸?shù)募{米微粒等。此外,還可作為組織工程包括細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)的基質(zhì)、人工血管和瓣膜的支架材料等。自體皮膚移植一直是治好二度和三度燒傷的全球標(biāo)準(zhǔn)方法,然而對于嚴(yán)重?zé)齻牟∪?,缺少合適的可移植的皮膚成了較嚴(yán)峻的問題,有人利用生物工程技術(shù)通過嬰兒皮膚細(xì)胞培育出嬰兒皮膚組織,這種膠原蛋白組織在沒有自體移植的情況下,在3周到18個月不等的時間里可治好不同程度的燒傷,而且新長出的皮膚也很少表現(xiàn)出肥大增生和抗性。還有人用人工合成的聚-DL-乳酸-羥基乙酸(PLGA)和天然膠原蛋白來培育三維的人皮膚纖維原細(xì)胞,結(jié)果表明:細(xì)胞在合成網(wǎng)狀物上生長更快,而且內(nèi)外幾乎同步生長,增殖細(xì)胞和分泌的胞外基質(zhì)更均一,把這種纖維植入無皮的大鼠背部,2周后就長出了真皮組織,4周后就長出了上皮組織。 四川玻尿酸膠原蛋白哪個牌子好補充膠原三肽,能更有效的將皮膚細(xì)胞撐起,結(jié)合保濕和抑制皺紋的作用。
膠原蛋白就好比一鍋才煮了一會兒的奶白色雞湯,待一段時間后,又變?yōu)榍鍦F(xiàn)在煮成一鍋高湯,就如膠原蛋白被不斷分解后,現(xiàn)在分解成為較小的氨基酸,氨基酸分子進(jìn)入人體后,合成膠原蛋白,較終被人體吸收。膠原三肽的分子量極小,目前全球較小的CTP膠原三肽,CTP膠原三肽的分子量只280道爾頓,是目前全球分子量較小的,與皮膚膠原蛋白相同的基本結(jié)構(gòu),無需分解,能夠被皮膚直接吸收,吸收率高達(dá)99%,是普通膠原蛋白的36倍。在我們?nèi)粘I钪?,我們會觀察到下面的現(xiàn)象,它們很好的解釋了膠原蛋白、多肽、氨基酸之間的關(guān)系。
可用于膠原蛋白的純化方法包括鹽析法、透析法、離心法、電泳法和色譜法,其中鹽析法、離心法和電泳法較為常用。由于單一方法難以完全分離純化膠原蛋白,實際操作都是通過復(fù)合法來達(dá)到分離純化膠原蛋白的目的。鹽析法一般采用高濃度NaCl;離心法常選用制備型低溫超速離心機;電泳法多采用十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳法(SDS-PAGE),該法既可用于膠原蛋白的分離純化,還可用來測定膠原蛋白分子的相對分子質(zhì)量。像有人用破碎、酶解、鹽析三步法提純蘇尼特羊骨骼I型膠原蛋白。先去除骨頭里的非膠原物質(zhì),然后往沉淀中10%的胃蛋白酶,在4℃的條件下消化24h,以14000r/min離心40min。棄沉淀往上清液中加NaCL,使它終濃度達(dá)到,靜止過夜,再離心,現(xiàn)在的沉淀就是I型膠原蛋白。 需要的膠原蛋白,其實是一種由3個氨基酸分子組成的膠原蛋白即“膠原三肽”。
膠原蛋白是生物高分子,動物結(jié)締組織中的主要成分,也是哺乳動物體內(nèi)含量較多、分布較廣的功能性蛋白,占蛋白質(zhì)總量的25%~30%,某些生物體甚至高達(dá)80%以上。 畜禽源動物組織是人們獲取天然膠原蛋白及其膠原肽的主要途徑,但由于相關(guān)畜類疾病和某些宗教信仰限制了人們對陸生哺乳動物膠原蛋白及其制品的使用,現(xiàn)今正在逐步轉(zhuǎn)向海洋生物中開發(fā)。歐洲食品安全局(EFSA)已證實了即使是動物骨骼來源的膠原蛋白也不存在傳染瘋牛病和其它相關(guān)疾病的可能。這些食物中的膠原蛋白分子量非常大,極不容易被人體吸收。山東海參膠原蛋白功效和作用
真皮中含有豐滿的膠原蛋白層,而補充膠原三肽,能更有效的將皮膚細(xì)胞撐起。小分子膠原蛋白粉
膠原蛋白是一類蛋白質(zhì)家族,已至少發(fā)現(xiàn)了30余種膠原蛋白鏈的編碼基因,可以形成16種以上的膠原蛋白分子,根據(jù)其結(jié)構(gòu),可以分為纖維膠原、基膜膠原、微纖維膠原、錨定膠原、六邊網(wǎng)狀膠原、非纖維膠原、跨膜膠原等。根據(jù)它們在體內(nèi)的分布和功能特點,可以將膠原分成間質(zhì)膠原、基底膜膠原和細(xì)胞外周膠原。間質(zhì)型膠原蛋白分子占整個機體膠原的絕大部分,包括Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型膠原蛋白分子,Ⅰ型膠原蛋白主要分布于皮膚、肌腱等組織,也是水產(chǎn)品加工廢棄物(皮、骨和鱗)含量較多的蛋白質(zhì),占全部膠原蛋白含量的80%~90%左右,在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用較為比較廣。Ⅰ型膠原在魚類膠原中一個較明顯的的特點是熱穩(wěn)定性比較低,并呈現(xiàn)有魚種的特異性。Ⅱ型膠原蛋白由軟骨細(xì)胞產(chǎn)生;基底膜膠原蛋白通常是指Ⅳ型膠原蛋白,其主要分布于基底膜;細(xì)胞外周膠原蛋白通常中指Ⅴ型膠原蛋白,在結(jié)締組織中大量存在。按功能,可將膠原分為兩組,首先組是成纖維膠原,包括第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅺ、ⅩⅩⅣ和ⅩⅩⅦ型膠原;其余是第二組,非成纖維膠原。非成纖維膠原的α-鏈既含有三螺旋域(膠原域,COL),還含有非三螺旋域(非膠原域,NC),其中成纖維膠原約占膠原總數(shù)的90%。 小分子膠原蛋白粉
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