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有人對海參膠原研究發(fā)現(xiàn),刺參體壁含蛋白,其中70%為膠原蛋白。氨基酸分析,膠原富含丙氨酸和羥脯氨酸,但羥賴氨酸含量較少,SDS電泳及SP凝膠柱分析發(fā)現(xiàn)其膠原組成為(α1)2α2。還有人從仿刺參()提取膠原蛋白,利用EDTA和Tris-HCl浸泡溶漲,用氫氧化鈉除去雜質(zhì)和非膠原蛋白,采用胃蛋白酶促溶提取粗制膠原,通過鹽析和透析獲取精致膠原蛋白,并進(jìn)一步利用SephacrylS-300HR凝膠過濾和DEAE-52陰離子交換除去多糖,獲取膠原蛋白純品。SDS-PAGE電泳表明膠原分子的組成為(α1)3,且α鏈類似于脊椎動(dòng)物Ⅰ型膠原的α1鏈,熱收縮溫度為57℃,低于牛皮膠原5℃。還有人對采自日本Senzaki海灣的Stomolopusmeleagri水母的外傘組織進(jìn)行了分析。整個(gè)中膠層被分成三部分,利用醋酸首先將凍干的水母中膠層分為酸溶性蛋白和酸不溶性物質(zhì),利用NaCl溶液將酸溶性蛋白分為酸溶性膠原蛋白和酸溶性非膠原蛋白,而不溶入醋酸的中膠層經(jīng)胃蛋白酶處理后大多變?yōu)榭扇苄缘哪z原質(zhì)。然后利用氨基酸分析儀對分離得到的三部分的組成分別進(jìn)行分析。發(fā)現(xiàn)該水母外傘中膠原蛋白含量很高,大約占干重的。經(jīng)SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳分析其膠原蛋白是由三個(gè)獨(dú)特α鏈組成。 羥脯氨酸殘基可通過形成分子內(nèi)氫鍵穩(wěn)定膠原蛋白分子。河北牡蠣膠原蛋白肽
隨著年齡的增長,成纖維細(xì)胞的合成能力下降,若皮膚中缺乏膠原蛋白,膠原纖維就會(huì)發(fā)生聯(lián)固化,使細(xì)胞間粘多糖減少,皮膚便會(huì)失去柔軟、彈性和光澤,發(fā)生老化,同時(shí)真皮的纖維斷裂、脂肪萎縮、汗腺及皮脂腺分泌減少,使皮膚出現(xiàn)色斑、皺紋等一系列老化現(xiàn)象。將其作為活性物質(zhì)用于化妝品中時(shí),后者可以擴(kuò)散到皮膚的深層,其含有的酪氨酸與皮膚中的酪氨酸競爭,而與酪氨酸酶的催化中心結(jié)合,從而抑制黑色素的產(chǎn)生,使皮膚中的膠原蛋白活性增強(qiáng),保持角質(zhì)層水分以及纖維結(jié)構(gòu)的完整性,促進(jìn)皮膚組織的新陳代謝,對皮膚產(chǎn)生良好的滋潤保濕、消皺美容作用。早在20世紀(jì)70年代初,美國就率先推出注射用牛膠原,用于淡斑除皺及修復(fù)瘢痕。[172-173]不過在化妝品中,單純用作營養(yǎng)性護(hù)膚類原料通常要求分子量在2KD以下,以讓水解膠原能滲透入皮膚內(nèi)。而護(hù)發(fā)類化妝品除要求水解膠原具有保濕性以外,還應(yīng)具有一定的成膜性,因此,水解膠原的分子量要求會(huì)更高。 重慶海參膠原蛋白哪個(gè)牌子好采用酶法提取膠原蛋白時(shí),必須嚴(yán)格控制提取條件。
酸法處理時(shí),反應(yīng)強(qiáng)烈,水解徹底,多生成氨基酸混合物,而且使用酸提取時(shí),根據(jù)酸濃度、水解溫度、水解時(shí)間等條件的不同,可以得到分子量不均的膠原水解物。但是在即使中等濃度酸徹底水解過程中色氨酸也會(huì)全部被破壞,絲氨酸和酪氨酸也會(huì)部分被破壞,且設(shè)備腐蝕嚴(yán)重。因此,酸法溶出生物醫(yī)用膠原要準(zhǔn)確控制酸度、溫度、時(shí)間等影響因素。由于各種不足,酸法很少單獨(dú)使用,一般和酶法配合。比如以豬皮為原料,在檸檬酸()和胃蛋白酶協(xié)同下提取膠原蛋白。在處理后的豬皮中加()處理一段時(shí)間,然后再用NaCL鹽析,現(xiàn)在提取率為,提取物保持了完整三股螺旋結(jié)構(gòu)的I型膠原蛋白。還有人以雛雞胸軟骨為原材料,在,在4℃,20000r條件下離心20min,現(xiàn)在應(yīng)用DEAE-SephadexA-50進(jìn)行離子交換層析,之后透析,再用NaCL鹽析,現(xiàn)在得到純化的膠原蛋白Ⅱ型。
所以,若想提取結(jié)構(gòu)完整、使用安全的膠原蛋白,很少采用此方法。有關(guān)單獨(dú)采用堿法提取膠原蛋白的報(bào)道不多,一般是堿法提取和酸法提法結(jié)合使用。比如在4℃條件下,魚骨用0.1moL/L的NaOH浸泡6h,再用2.5%NaCl浸泡6h去除雜蛋白,用10%的異丙醇溶液去除脂肪,0.1moL/L的檸檬酸浸泡3d,現(xiàn)在得到無色無味的膠原蛋白,提取率為11.87%。注意,無論酸法或堿法,均可有效地提取膠原蛋白,有人分別采用醋酸-鹽酸的混合酸液(pH3.0)和NaOH溶液(pH12.0)提取骨膠原蛋白,提取率基本相當(dāng)。但是,這兩種方法提取膠原蛋白不僅容易影響膠原蛋白的生物活性,而且提取后產(chǎn)生的酸性或堿性廢液必須進(jìn)行適當(dāng)處理,以避免對環(huán)境造成污染。膠原三肽的用途化妝品中的作用保濕、滋養(yǎng)、亮膚、緊膚、防皺、修復(fù)。
免疫學(xué)分析和研究結(jié)果表明,使用膠原加完全弗氏佐劑,能對膠原產(chǎn)生多克隆和單克隆抗體。由T細(xì)胞啟動(dòng)的對膠原蛋白免疫反應(yīng)的證據(jù)是,位于重要組織相容性(H-2)部位上ⅠA或ⅠB亞區(qū)的免疫反應(yīng)基因已被鑒定。膠原蛋白免疫原性的臨床評價(jià)通常是皮膚過敏性測試(細(xì)胞免疫指數(shù),遲發(fā)性Ⅳ型反應(yīng))和由反應(yīng)型抗體的存在(體液免疫指數(shù))來確定的。實(shí)踐證明,在患者身上進(jìn)行這兩種評價(jià)是合理的。在治好前,用過敏劑量的植入性膠原對患者進(jìn)行皮試,大約3%有潛在的反應(yīng),反復(fù)多次處理的患者,大約1%~2%會(huì)產(chǎn)生遲發(fā)性過敏性的臨床病狀。典型的癥狀包括局部水腫和紅斑反應(yīng),有的還伴有硬化和瘙癢,持續(xù)時(shí)間4~6個(gè)月,個(gè)別甚至可達(dá)1年以上。膠原三肽的分子量極小。牡蠣膠原蛋白原料廠家
采用酶法提取骨料中的膠原蛋白,既能有效縮短提取時(shí)間,又能獲得具有良好生物活性的膠原蛋白。河北牡蠣膠原蛋白肽
膠原蛋白由動(dòng)物皮提取,皮中除膠原蛋白外還含有透明質(zhì)酸、硫酸軟骨素等蛋白多糖,它們含有大量極性基團(tuán),是保濕因子,且有阻止皮膚中的酪氨酸轉(zhuǎn)化為黑色素的作用,故膠原蛋白有天然保濕、美白、防皺、淡斑等作用,可廣泛應(yīng)用于美容用品中。膠原蛋白的化學(xué)組成、結(jié)構(gòu)賦予了它是美容的基礎(chǔ)。膠原蛋白與人體皮膚膠原的結(jié)構(gòu)相似,為非水溶性纖維狀含糖蛋白質(zhì),分子中富含大量氨基酸和親水基,具有一定的表面活性和很好的相容性,同時(shí)由于其分子中含有大量的羥基,因此它有著相當(dāng)好的保濕作用。在相對濕度70%時(shí),仍可保持其自身重量45%的水分。試驗(yàn)證明:0.01%的膠原蛋白純?nèi)芤壕湍苄纬珊芎玫谋K畬?,供給皮膚所需要的全部水分。河北牡蠣膠原蛋白肽
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