化學(xué)方法比物理方法改。聯(lián)度高,且能獲得均勻一致的交聯(lián),對(duì)調(diào)節(jié)、控制膠原的各性質(zhì)均有效。已廣泛應(yīng)用于各種化學(xué)試劑交聯(lián)膠原,以提高其交聯(lián)度、力學(xué)性能及生物相容性。化學(xué)改性法具體又可分為使用化學(xué)試劑交聯(lián)、側(cè)鏈的修飾、生理活性物的固定化三種方法。[130]化學(xué)試劑交聯(lián)法中常用的化學(xué)交聯(lián)劑有戊二醛、己異二氰酸酯、碳化二亞胺、疊氮二苯基磷等,其中戊二醛是應(yīng)用較比較廣的試劑,大量實(shí)驗(yàn)證明:戊二醛能提供有效交聯(lián),但有細(xì)胞毒性,且其用量難以控制。另外,隨著交聯(lián)度的增加,吸水能力和膨脹度卻會(huì)降低。?;B氮化物、聚環(huán)氧化物或京尼平交聯(lián)等,不會(huì)引入明顯的毒性,且可獲得理想的交聯(lián)效果。所見報(bào)道中,多使用單一交聯(lián)劑對(duì)膠原蛋白交聯(lián)改性,但也有使用混合交聯(lián)劑的,如為了解決人工心臟瓣膜晚期鈣化問題,篩選出環(huán)氧丙烷化學(xué)改性戊二醛處理生物瓣的方法,可明顯減低瓣膜組織膠原蛋白末端游離羧基含量。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,經(jīng)改性后的瓣膜組織能保持較好的組織穩(wěn)定性和機(jī)械抗張強(qiáng)度、免疫原性測(cè)試為陰性,符合臨床應(yīng)用。只有攝入足夠的可與鈣結(jié)合的膠原蛋白,才能使鈣在體內(nèi)被較快消化吸收。山東海參膠原蛋白粉
膠原蛋白中甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、脯氨酸(Pro)和谷氨酸(Glu)含量較高,特別是甘氨酸,約占總氨基酸的27%,也有報(bào)道說占1/3,即每隔兩個(gè)其它氨基酸殘基(X,Y)即有一個(gè)甘氨酸,故其肽鏈可用(Gly-X-Y)n來表示。每個(gè)原膠原分子由三條α-肽鏈組成,α-肽鏈自身為α螺旋結(jié)構(gòu),肽鏈中每三個(gè)氨基酸殘基中就有一個(gè)要經(jīng)過此三股螺旋中間區(qū),而此處空間十分狹窄,只有甘氨酸適合于此位置,由此可解釋其氨基酸組成中每隔兩個(gè)氨基酸殘基出現(xiàn)一個(gè)甘氨酸的特點(diǎn)。特別注意,X、Y均表示任意的氨基酸,只不過X通常是脯氨酸,Y通常指羥脯氨酸。同時(shí)還含有少量3-羥脯氨酸(3-hydroxyproline)和5-羥賴氨酸(5-hydroxylysine,Hyl)。羥脯氨酸殘基可通過形成分子內(nèi)氫鍵穩(wěn)定膠原蛋白分子。三條α-肽鏈借范德化力、氫鍵及共價(jià)交聯(lián)則以平行、右手螺旋形式纏繞成“草繩狀”三股螺旋結(jié)構(gòu),使膠原具有很高的拉伸強(qiáng)度。江西小分子膠原蛋白哪個(gè)牌子好膠原三肽的分子量極小。
鹽法提取是利用各種不同的鹽在不同的濃度條件下提取鹽溶性膠原蛋白的方法。常用來提取膠原的鹽有鹽酸-三羥甲基胺基甲烷(Tris-HCl)、氯化鈉、檸檬酸鹽等。在中性條件下,當(dāng)鹽的濃度達(dá)到一定量時(shí),膠原就會(huì)溶解在其中,但是膠原的溶解和分級(jí)受中性鹽效應(yīng)影響,有的鹽可提高膠原的穩(wěn)定性,而有的則可降低其構(gòu)象穩(wěn)定性,從而對(duì)提取天然膠原蛋白很不利。此外,可采用不同濃度的氯化鈉對(duì)提取的膠原蛋白進(jìn)行鹽析處理,可以沉淀出不同類型的膠原蛋白。
有人以豬骨為原料,用蛋白酶的酶解反應(yīng)代替?zhèn)鹘y(tǒng)制膠工藝,對(duì)骨膠原的酶解反應(yīng)與酶法制膠工藝進(jìn)行了試驗(yàn)研究。結(jié)果表明:以胃蛋白酶對(duì)骨膠原的提取率比較高(),其次是胰蛋白酶(),接下來是中性蛋白酶(),現(xiàn)在是堿性蛋白酶()。并且通過單因素和正交試驗(yàn)對(duì)胃蛋白酶酶解反應(yīng)中各主要影響因素進(jìn)行了優(yōu)化。試驗(yàn)結(jié)果表明,胃蛋白酶提取的比較好條件是,胃蛋白酶的濃度是1%,在,然后在濃度為10%(w/v)的NaCL溶液中鹽析24h,現(xiàn)在骨膠原的回收率為,骨膠原的提取率為。還有人用胃蛋白酶提取豬皮膠原蛋白,分別在水解0、2、6、10、14、18、22、26h時(shí)對(duì)四種不同胃蛋白酶用量(分別為1%、2%、、3%)的試樣取樣檢測(cè),采用一階HILL方程模擬胃蛋白酶提取豬皮膠原蛋白的進(jìn)程以及胃蛋白酶水解速率的衰減過程,現(xiàn)在得出2%的胃蛋白酶用量和6-7h的水解時(shí)間提取率比較大。還有人用以新鮮豬皮為原料,在50-52℃的條件下用胰酶進(jìn)行水解,在酶用量為5000:1~10000:1,pH值為9,反應(yīng)2-3h,原料:水為1:2的條件下酶解。結(jié)果表明:總蛋白質(zhì)的提取率≥80%。海南省華上生物科技有限公司生產(chǎn)鱈魚小分子膠原蛋白肽產(chǎn)品、羅非魚膠原蛋白肽產(chǎn)品。
預(yù)處理除膠原蛋白外,動(dòng)物骨中還含有油脂、多種礦物質(zhì)和其他雜質(zhì),因此在被用于提取膠原蛋白之前必須進(jìn)行預(yù)處理。先剔除動(dòng)物骨上殘留的肉質(zhì)和肌腱等雜物,粉碎后用正丁醇或正己烷萃取出骨油?,F(xiàn)在除去骨中無機(jī)物以提高膠原蛋白的得率。除去骨中的礦物質(zhì)可用稀酸或EDTA溶液。有人用原料用5倍質(zhì)量的,用正乙烷脫脂后再用胃蛋白酶酶解,在加酶量150U/g,pH值,37℃條件下處理120min,然后在固液比1∶6的情況下抽提5h,在此條件下,提取率可達(dá)18%;還有人用EDTA溶液()浸泡骨料5d,可有效脫去骨料中的羥基磷灰石。[87-89]膠原蛋白的提取一般有三種方法:一是高壓輔助的物理方法;二是用溶劑預(yù)處理結(jié)合低溫或熱水抽提的化學(xué)方法,根據(jù)溶劑的不同,可分為熱水浸提法、酸法、堿法、鹽法;三是用酶的生物化學(xué)法。一般來說,高壓輔助和熱水抽提針對(duì)明膠的提取,而低溫抽提和酶法針對(duì)膠原的提取,但其基本原理都是根據(jù)膠原蛋白的特性改變蛋白質(zhì)所在的外界環(huán)境,把膠原蛋白從其他蛋白質(zhì)中分離出來。膠原蛋白能保持較好的組織穩(wěn)定性和機(jī)械抗張強(qiáng)度、免疫原性測(cè)試為陰性,符合臨床應(yīng)用。玻尿酸膠原蛋白肽口服液
一般膠原蛋白肽的原材料,一般來自于人力喂養(yǎng)豬牛的皮革。山東海參膠原蛋白粉
膠原蛋白肽是由膠原或明膠經(jīng)蛋白酶降解處理后制成的一種膠原蛋白前體產(chǎn)品,分子量在3000道爾頓,比普通膠原蛋白分子量小,一般認(rèn)為更易消化吸收。針對(duì)于人體衰老細(xì)胞分裂、衰竭、萎縮,微整形術(shù)后損傷、新***受阻、細(xì)胞生長(zhǎng)變異、增生等多項(xiàng)細(xì)胞修復(fù)功能障礙問題研發(fā)的醫(yī)生營養(yǎng)。
1、膠原蛋白肽特有的結(jié)構(gòu)能強(qiáng)勁鎖住水分,防止水分的流失,讓皮膚保持濕潤(rùn)、水嫩狀態(tài);且其含有大量的羥基,不僅能提升皮膚亮度,還具有美白效果。2、膠原蛋白肽進(jìn)入皮膚后,可修復(fù)斷裂老化的彈力纖維網(wǎng),使皮膚彈性恢復(fù),柔韌充盈,另外膠原蛋白可消除體內(nèi)自由基,多途徑抗氧化,減緩皮膚衰老。3、皺紋及細(xì)小皺紋的產(chǎn)生與膠原蛋白的自然流失有關(guān),補(bǔ)充膠原蛋白肽后可直接滲透到皮膚真皮層,重整肌膚纖維組織機(jī)構(gòu),促進(jìn)細(xì)胞新陳代謝,延緩細(xì)胞衰老,使細(xì)小皺紋得到舒緩。 山東海參膠原蛋白粉
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