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河北新病原篩查方法

來源: 發(fā)布時間:2021-11-05

微生物鑒定的傳統(tǒng)的鑒定方法雖然仍被普遍使用,但存在兩大缺點。它們只適用于可以體外培養(yǎng)的生物體,而且一些菌株表現(xiàn)出不符合已知種屬模式的獨特的生化特性。許多現(xiàn)代方法并不依賴于活的培養(yǎng)物,它們常常能揭示通過傳統(tǒng)方法檢測不到的有機體之間的細微差別。PCR,包括實時熒光定量PCR,可能是普遍應(yīng)用于微生物鑒定的分子技術(shù)。利用PCR技術(shù),可以快速檢測和鑒定臨床標(biāo)本的微生物種類,從而加快診斷程序。大多數(shù)基于PCR的方法涉及一組通用的PCR引物,通過測序PCR擴增的序列來鑒定細菌/樣品。16S rRNA基因是PCR細菌鑒定的金標(biāo)準(zhǔn)序列,而內(nèi)部轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS)區(qū)域是種類的主要條碼標(biāo)記。高通量測序技術(shù)經(jīng)過不斷地發(fā)展,已經(jīng)在生物技術(shù)、食品安全和醫(yī)藥衛(wèi)生等各個領(lǐng)域得到應(yīng)用。河北新病原篩查方法

對于無菌藥品生產(chǎn)來說生產(chǎn)區(qū)域的微生物種類非常有限,更具無菌藥品的具體生產(chǎn)內(nèi)容和過程,潔凈區(qū)內(nèi)會有芽孢桿菌占絕大多數(shù)酵母菌、霉菌和葡萄球菌少量存在,放射根瘤菌、苛養(yǎng)顆粒鏈菌等少數(shù)微生物種類。在無菌藥品生產(chǎn)過程中,應(yīng)初步建立微生物數(shù)據(jù)庫,建立潔凈區(qū)微生物數(shù)據(jù)庫是追溯潔凈區(qū)微生物污染來源的有效方法,有效指導(dǎo)并控制無菌藥品生產(chǎn)中的污染問題。同時,為防止微生物污染,通過微生物數(shù)據(jù)庫并結(jié)合一些常規(guī)方管理法,比如對污染源及其途徑進行了解,并進行微生物限度檢查,控制藥品質(zhì)量。注意在潔凈區(qū)的人員數(shù)量應(yīng)控制好,并要求人員具有自我約束的意識等,從而有效控制潔凈區(qū)微生物。在生產(chǎn)中應(yīng)用微生物鑒定技術(shù)和檢測設(shè)備向微型化以及多功能化方向發(fā)展,更具有較快的檢測速度以及更為準(zhǔn)的鑒定結(jié)果。河北新病原篩查方法在進行菌種鑒定時,所用的微生物一般均要求為純的培養(yǎng)物。

實現(xiàn)病原微生物種類鑒定的技術(shù)手段:病原微生物的研究歷史不算長。發(fā)展至今已經(jīng)有了成套的檢測體系。利用不同類別的微生物有其本身不同于其他微生物的特點,如從培養(yǎng)形態(tài)、顯微鏡觀測形態(tài)、生物學(xué)功能、致病性、生物化學(xué)反應(yīng)、抗原抗體反應(yīng)、核酸序列等方面,都可以進行相當(dāng)程度的鑒別。即便如此,依然有很多微生物通過傳統(tǒng)技術(shù)無法鑒別。高通量測序技術(shù)問世,給微生物鑒別打開一扇新的大門。它對核酸進行測序是非特異的,因此,對一無所知的核酸也可以實現(xiàn)鑒別。

臨床微生物鑒定必須經(jīng)歷的過程:1.分離培養(yǎng):臨床細菌學(xué)不可缺少的基本技術(shù),是獲得純培養(yǎng)物的必要手段,即使自動化儀器先進的現(xiàn)在也只能對純菌作出鑒定。2.細菌的菌落、色素、溶血性、氣味是鑒定的重要特征。3.形態(tài)學(xué)鑒定:如奴卡菌、紅球菌。4.動力在各種細菌鑒定:針對形態(tài)不易區(qū)分時來鑒別菌種。5.氧化酶,觸酶試驗是分別革蘭陰性菌和革蘭陽性菌鑒定試驗。傳統(tǒng)的鑒定方法通過選實驗項目,同一科內(nèi)的不同屬、種可以選擇不同的鑒定指標(biāo)。微生物檢測必須嚴(yán)格把關(guān)是很有必要的。

傳統(tǒng)的微生物檢測方法都有哪些? 1、直接顯微鏡觀察,正常情況,在一定的培養(yǎng)條件下(相同的培養(yǎng)基、溫度以及培養(yǎng)時間),同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征??梢酝ㄟ^顯微鏡觀察菌落特征對微生物種類進行判斷。2、選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物或人為提供有利于目的菌株生長的條件,選擇培養(yǎng)基,其作用是允許特定種類的微生物生長,同時控制或阻止其他微生物生長。選擇培養(yǎng)一般是通過觀察微生物的同化作用類型或某一特征進行間接判斷,得到的微生物往往并不只有一種,但是能夠大致確定這些微生物存在的共有特征從而對其分類。3、鑒別培養(yǎng)基,根據(jù)微生物的代謝特點,在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品。與選擇培養(yǎng)相比,鑒別培養(yǎng)基的鑒別所得結(jié)果的范圍比較小,一般可直接測定某微生物的種類。知病原鑒定測序?qū)嶒灮诙鷾y序技術(shù)。隨機PCR未知病毒篩查技術(shù)

面對未知病毒,抵抗力是我們健康的屏障。河北新病原篩查方法

微生物檢測中含有一種以上的微生物培養(yǎng)物稱為混和培養(yǎng)物。如果在一個菌落中所有細胞均來自于一個親代細胞,那么這個菌落稱為純培養(yǎng)(pureculture)。在進行菌種鑒定時,所用的微生物一般均要求為純的培養(yǎng)物。得到純培養(yǎng)的過程稱為分離純化,方法有許多種。先把微生物懸液通過一系列稀釋,取一定量的稀釋液與熔化好的保持在40-50℃左右的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基充分混合,然后把這混合液傾注到無菌的培養(yǎng)皿中,待凝固之后,把這平板倒置在恒箱中培養(yǎng)。單一細胞經(jīng)過多次增殖后形成一個菌落,取單個菌落制成懸液,重復(fù)上述步驟數(shù)次,便可得到純培養(yǎng)物。河北新病原篩查方法

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