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宏基因組測序分析

來源: 發(fā)布時間:2024-07-21

病原體-宏基因組的測序:1.開發(fā)了一種經(jīng)過驗證的臨床mNGS檢測方法,用于在許可的微生物實驗室中診斷腦脊髓液(CSF)引起的腦膜炎和腦炎的傳染原因。2.開發(fā)了定制的生物信息學管道SURPI+,以快速分析mNGS數(shù)據(jù),生成檢測到的病原體的自動摘要,并提供用于評估和解釋結果的圖形用戶界面。3.mNGS提供了一種全方面的方法,通過該方法可以在一次測定中準確鑒定幾乎所有潛在病原體-病毒,細菌,寄生蟲。4.將mNGS測試遷移到臨床微生物學實驗室仍然面臨許多挑戰(zhàn):1、缺乏用于mNGS臨床驗證的既定藍圖;2、難以將病原體從殖民者或污染物中區(qū)分開;3、缺乏專為臨床診斷使用的生物信息學軟件;4、注重質量和全方面性的可獲得的參考數(shù)據(jù)庫;5、臨床實驗室改進修正案(CLIA)環(huán)境中,患者診斷測試固有的法規(guī)遵從性要求。微生物鑒定可以用微生物對噬菌體的敏感性作為指標來鑒定微生物的種屬。宏基因組測序分析

病毒宏基因組測序:宏基因組測序對環(huán)境樣本所有微生物基因組DNA進行提取和高通量測序,分析樣本環(huán)境中所有微生物基因組信息。宏基因組測序解讀微生物群體的多樣性與豐度信息,分析微生物群體基因組及功能,也探求微生物與環(huán)境、微生物與宿主之間的關系,發(fā)掘和研究新的功能基因。生物信息分析內容1.測序質量分析與統(tǒng)計、評估;2.數(shù)據(jù)庫比對;3.物種豐度分析;4.功能基因注釋;5.基因功能豐度差異分析;6.Pathway富集分析;7.豐度差異基因/物種聚類分析;8.PCA分析。皮膚微生物測序分析要多久微生物鑒定的用途:醫(yī)療保?。簻蚀_、快速地鑒定細菌和寄生蟲,來進行正確和及時的疾病診斷。

目前構建的病毒宏基因組學文庫主要有載體克隆文庫和基于高通量測序技術的加接頭的文庫。隨著深度測序技術的不斷發(fā)展,第二代高通量測序技術、第三代單分子測序技術已經(jīng)普遍地應用于各項研究領域中,以454測序技術和Illumina測序技術為表示的二代測序法得到迅速推廣用于構建病毒宏基因組文庫,相信將來第三代測序平臺如tSMSTM(truesinglemolecularsequeneing)技術平臺、SMRT(singlemoleculereal-time)技術平臺、FRET測序技術及納米孔單分子技術為表示的第三代測序法也將應用于構建病毒宏基因組文庫。Donaldson等[23]采用高通量測序技術構建了蝙蝠腸道的病毒宏基因組學文庫,獲得了600000條讀長(Reads)的核酸序列。

病毒宏基因組學的相關知識:病毒是引發(fā)人畜共患病的主要病原體之一,伴隨環(huán)境、生態(tài)和人類行為等各方面因素的變化,新發(fā)人畜共患病也呈現(xiàn)逐年遞增的趨勢,它們極大地威脅著人類和動物的健康和生命,并給畜牧業(yè)和農(nóng)業(yè)的健康發(fā)展以及自然界生態(tài)鏈的平衡帶來危害及災難。然而,許多新發(fā)人畜共患病的病原初往往是未知的,如1986年的牛海綿狀腦病、1999年的尼帕病毒、2003年的SARS冠狀病毒、1997至今不斷變異的高致病性禽流感H5和H;7、2009年的甲型H1N1、2010年的布尼亞病毒,它們都經(jīng)歷了一個從未知到己知的探索過程。為此,及早地發(fā)現(xiàn),鑒別未知的或新出現(xiàn)的病原,是有效預防和控制傳染病的先決條件之一。傳統(tǒng)的診斷技術已不能滿足提前預警或快速診斷新發(fā)人畜共患病的需求。近年來,病毒宏基因組學的出現(xiàn)和興起,為人類診斷新發(fā)人畜共患病和探索潛在的病原提供了巨大的幫助。未知病原微生物樣本需要經(jīng)歷:核酸純化-文庫構建-以及生物信息學分析這三大基本流程才能完成鑒定。

病毒宏基因組測序是在宏基因組學理論的基礎上,結合現(xiàn)有的病毒分子生物學檢測技術而興起的一個新的學科分支。而所謂宏基因組學(metagenomics)就是一種以環(huán)境樣品中的微生物群體基因組為研究對象,以功能基因篩選和測序分析為研究手段,以微生物多樣性、種群結構、進化關系、功能活性、相互協(xié)作關系及與環(huán)境之間的關系為研究目的的新的微生物研究方法。一般包括從環(huán)境樣品中提取基因組DNA,克隆DNA到合適的載體,導入宿主菌體,篩選目的轉化子等工作。高通量測序技術對核酸進行測序是非特異的,因此,對一無所知的核酸也可以實現(xiàn)鑒別。浙江微生物多樣性分析技術

宏基因組測序以特定環(huán)境中的整個微生物群落作為研究的對象,不需對微生物進行分離培養(yǎng)。宏基因組測序分析

對樣本進行宏病毒組測序具有的意義:和細菌的宏基因組相似,病毒宏基因組也是旨在研究微生物群體中的物種分布規(guī)律和差異,通過大數(shù)據(jù)分析微生物群體的功能。通過對樣本進行宏病毒組測序,我們可以了解單個樣本里有什么病毒,相對含量是多少,優(yōu)勢物種是什么;還可以了解不同群體間物種分布有何差異,結合樣本來源和其所屬環(huán)境,指導下游的實驗方向。于科研,好的群體和樣本可以發(fā)表質量的學術論文;于臨床,可以輔助臨床醫(yī)生進行微生物侵染類疾病診斷并在一定程度提供用藥指導。隨著數(shù)據(jù)庫日趨完善,對樣本進行宏病毒組測序以后,我們將獲得越來越豐富的信息,它有朝一日會成為研究者非常常規(guī)的研究手段。宏基因組測序分析