高通量測(cè)序在病毒準(zhǔn)種研究中如何應(yīng)用在采用高通量測(cè)序技術(shù)研究準(zhǔn)種耐藥性方面，人類免疫缺陷病毒(HIV)較為突出。人類免疫缺陷病毒的逆轉(zhuǎn)錄酶有非常大的錯(cuò)配傾向，造成幾乎每復(fù)制1輪出現(xiàn)1個(gè)堿基對(duì)替換突變。被侵染的個(gè)體中存在非常巨大的病毒群，每天有1010個(gè)病毒粒子產(chǎn)生和死亡，在侵染后這種行為導(dǎo)致病毒快速形成一個(gè)多樣性的群，即準(zhǔn)種。高通量測(cè)序是研究大群體中序列突變體特征的先進(jìn)方法，它的一種應(yīng)用是對(duì)個(gè)體抗病毒治療失敗時(shí)產(chǎn)生的數(shù)量很少的耐藥突變的定量研究。對(duì)病毒全基因組進(jìn)行測(cè)序,是利用生物信息分析手段，得到病毒的全基因組序列.DNA深度測(cè)序分析原理

    全基因組測(cè)序需要要注意的事項(xiàng)包括：全基因組測(cè)序是對(duì)未知基因組序列的物種進(jìn)行個(gè)體的基因組測(cè)序。技術(shù)路線：提取基因組DNA，然后隨機(jī)打斷，電泳回收所需長(zhǎng)度的DNA的片段（），加上接頭,進(jìn)行DNA簇（Cluster）制備，后利用Paired-End（Solexa）或者M(jìn)ate-Pair（SOLiD）的方法對(duì)插入片段進(jìn)行測(cè)序。然后對(duì)測(cè)得的序列組裝成Contig，通過(guò)Paired-End的距離可進(jìn)一步組裝成Scaffold，進(jìn)而可組裝成染色體等。組裝效果與測(cè)序深度與覆蓋度、測(cè)序質(zhì)量等有關(guān)。常用的組裝有：SOAPdenovo、Trimity、Abyss等。測(cè)序深度（Sequencingdepth）是指測(cè)序得到的堿基總量（bp）與基因組大小的比值，它是評(píng)價(jià)測(cè)序量的指標(biāo)之一。測(cè)序深度與基因組覆蓋度之間是一個(gè)正相關(guān)的關(guān)系，測(cè)序帶來(lái)的錯(cuò)誤率或假陽(yáng)性結(jié)果會(huì)隨著測(cè)序深度的提升而下降。測(cè)序的個(gè)體，如果采用的是雙末端或Mate-Pair方案，當(dāng)測(cè)序深度在50X~100X以上時(shí)，基因組覆蓋度和測(cè)序錯(cuò)誤率控制均得以保證，后續(xù)序列組裝成染色體才能變得更容易與準(zhǔn)確。 國(guó)內(nèi)二代測(cè)序分析哪家好病毒全基因測(cè)序技術(shù)對(duì)疾病的致病原進(jìn)行全基因組測(cè)序研究，能發(fā)現(xiàn)其中的變異與遺傳情況。

深度測(cè)序技術(shù)對(duì)科學(xué)研究范式的影響：個(gè)性化醫(yī)學(xué)、P4醫(yī)學(xué)和準(zhǔn)確醫(yī)學(xué)等研究范式都是在近幾年深度測(cè)序技術(shù)迅猛發(fā)展的基礎(chǔ)上提出的。個(gè)人基因組測(cè)定的可行性，使得大眾有可能測(cè)定和分析自己的基因組、尋找到個(gè)人健康相關(guān)的基因風(fēng)險(xiǎn)因素，從而可以在生活習(xí)慣、飲食等方面提早進(jìn)行個(gè)性化預(yù)測(cè)和預(yù)防。由于互聯(lián)網(wǎng)的發(fā)展和即時(shí)檢驗(yàn)技術(shù)（point-of-care-testing，POCT）的應(yīng)用，人們可以通過(guò)網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行交流和參與到整個(gè)診療過(guò)程，這便是P4醫(yī)學(xué)的概念：預(yù)測(cè)性（predictive）、預(yù)防性（preventive）、個(gè)性化（personalized）及參與性（participatory）。

病毒準(zhǔn)種的漂變將使毒株的特點(diǎn)及傳播方式發(fā)生改變，給現(xiàn)有的檢測(cè)手段和防治措施帶來(lái)嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。新一代高通量測(cè)序技術(shù)的出現(xiàn)使得檢測(cè)某個(gè)物種的混合PCR產(chǎn)物中低頻率的變異體十分便利它的出現(xiàn)加快了研究準(zhǔn)種的規(guī)律性和影響因素的步伐。新一代測(cè)序儀將以往的測(cè)序費(fèi)用降低了好幾個(gè)數(shù)量級(jí)。鑒于此，以前只有大型測(cè)序中心才能夠開展的項(xiàng)目，現(xiàn)在在小型實(shí)驗(yàn)室里也能順利進(jìn)行了，按照目前的發(fā)展速度，新一代高通量測(cè)序技術(shù)有望給生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域帶來(lái)**性的變革。測(cè)序覆蓋度是反映測(cè)序隨機(jī)性指標(biāo)之一。

病毒（Virus）由一種核酸分子（DNA或RNA）與蛋白質(zhì)（Protein）構(gòu)成或由蛋白質(zhì)構(gòu)成（如朊病毒）。根據(jù)遺傳物質(zhì)的組成，可分為單鏈DNA病毒（ssDNA）、雙鏈DNA病毒（dsDNA）、單鏈RNA病毒（ssRNA）、雙鏈RNA病毒（dsRNA）和蛋白質(zhì)病毒（如朊病毒）。根據(jù)宿主類型的不同，可以分為噬菌體（細(xì)菌病毒）、植物病毒（煙花葉病毒）和動(dòng)物病毒（如禽流感病毒、天花病毒和HIV等）。病毒全基因組測(cè)序（VirusWholeGenomeSequencing，VWGS），是指基于第二代高通量測(cè)序技術(shù)，對(duì)病毒全基因組進(jìn)行測(cè)序，利用生物信息分析手段，得到病毒的全基因組序列，解析編碼信息，并獲得相應(yīng)的變異信息。探普生物病毒測(cè)序具備反饋處理迅速的優(yōu)點(diǎn)。DNA病毒序列測(cè)序進(jìn)化分析診斷

病毒全基因組測(cè)序具有的特點(diǎn)：獨(dú)有的一定定量技術(shù)，實(shí)現(xiàn)病原定量分析.DNA深度測(cè)序分析原理

對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序價(jià)格合理；樣品具備什么條件才可以獲得比較質(zhì)量的組裝效果？其他公司對(duì)用于測(cè)序的樣本的要求較高。探普生物對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序是基于探普的專有流程，樣本要求非常低，不要求粒子純化，不要求總量到達(dá)微克，按探普的專門的收樣標(biāo)準(zhǔn)和送樣流程進(jìn)行即可。簡(jiǎn)言之，經(jīng)過(guò)細(xì)胞或其他方式培養(yǎng)的樣本，若載量較高，不需要復(fù)雜處理，直接破碎細(xì)胞取上清提取核酸都可以獲得非常好的組裝效果；而臨床標(biāo)本，需要看情況，對(duì)于被侵害嚴(yán)重的個(gè)體，釋放較高的部位也可以獲得很好的效果；其他類型的樣本，就需要測(cè)ct值來(lái)確定是否可以進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以及評(píng)估測(cè)序效果。DNA深度測(cè)序分析原理