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皮膚微生物測序分析方法

來源: 發(fā)布時間:2024-06-23

宏基因組測序相關知識:宏基因組測序是對人體樣本或特定環(huán)境樣品中的總核酸(DNA或RNA)進行高通量測序,通過比對數(shù)據(jù)庫,得到傳染病原體的信息,能夠檢測出新發(fā)和罕見病原體,特別是在未知病原檢測中發(fā)揮了難以替代的作用,當然宏基因組檢測方法也面臨不少挑戰(zhàn),檢測結果的靈敏度受宿主及其他微生物背景核酸的影響。高通量測序技術能夠提供準確而科學的基因測序分析結果,為病情防控提供有力技術保障。科學家通過對病毒進行全基因組測序,可以了解病毒不同傳播階段的變異情況,推測病毒對人的傳染力的變化及傳播情況。微生物檢測涉及多行業(yè)和領域,在實驗室檢測中有著重要的地位。皮膚微生物測序分析方法

傳統(tǒng)上人類血液被認為是無菌的,微生物血漿細胞游離DNA(mcfDNA)可能有兩種來源,包括微生物(細菌,病毒或噬菌體)的易位,這是指屬于人類微生物組的微生物細胞或其組成部分通過與外部環(huán)境連通的上皮粘膜進入循環(huán)系統(tǒng)。另外,當組織粘膜被局部傳染(例如口腔,肺和皮膚傳染)或物理損傷(例如侵入性的手術或意外傷害)破壞時,侵入性的病原體可能會偶然進入血液,在嚴重的情況下引起菌血癥或病毒血癥。一旦進入循環(huán)系統(tǒng),微生物核酸就會通過循環(huán)核酸外切酶被降解,然后形成小的DNA的片段,即微生物血漿細胞游離DNA(mcfDNA)。mcfDNA是一種新興的傳染性疾病診斷生物標志物。盡管絕大多數(shù)cfDNA來自于患者自身的細胞,但在急性傳染期間可從血漿中檢測到微生物病原體的微量物質。皮膚微生物測序分析方法高通量測序技術對核酸進行測序是非特異的,因此,對一無所知的核酸也可以實現(xiàn)鑒別。

在政策促進下,未來將在醫(yī)藥、保養(yǎng)短缺地區(qū)建設一批高水平臨床醫(yī)治中心、高層次的人才培養(yǎng)基地和高水平的科研創(chuàng)新與轉化平臺,培育一批品牌優(yōu)勢明顯、跨區(qū)域提供高水平服務的集團。根據(jù)病毒測序,病毒全基因組測序,病毒宏基因組測序,未知病原鑒定相關領域極新技術發(fā)展趨勢,《2019年本》在鼓勵類條目中新增了技術開發(fā)和應用的有關內容。例如,在化學原料藥領域增加了“連續(xù)反應”等技術,在技術領域增加了“基因醫(yī)治”和“抗體偶聯(lián)”等技術,在藥用包裝材料領域增加了“中性硼硅藥用玻璃”等材料與技術的開發(fā)應用,在醫(yī)藥領域增加了“人工智能輔助醫(yī)藥設備”等新技術內容。

探普生物的病毒測序:由于探普生物具備處理大量多樣的病毒樣本的經(jīng)驗,熟知各類病毒樣本的特性,因此對于樣本準備有獨特的方法指南,這就為后續(xù)的分析結果打下了牢固的基礎,減少了客戶和公司之間的摩擦,也幾乎沒有售后問題。獨有的實驗和分析流程可兼容高復雜度低濃度的病毒核酸。因此探普生物的病毒測序結果質量有保障外還具備:樣本準備簡單,商務流程通暢,回復消息及時,反饋處理迅速等優(yōu)點。我國經(jīng)濟進入“新常態(tài)”,總體上推動["病毒測序","病毒全基因組測序","病毒宏基因組測序","未知病原鑒定"]從粗放式增長向注重質量、效率方向轉變。


微生物鑒定可以用微生物對噬菌體的敏感性作為指標來鑒定微生物的種屬。

宏病毒組分析的常用軟件:介紹之前首先我們來看一下宏病毒組的基本分析流程。這里需要說明的是基于病毒顆粒分離技術及NGS測序平臺的宏病毒組學研究還處于起步階段,分析功能模塊新的思路和技術層出不窮,但另一個層面,宏病毒組是宏基因組的一個分支,基本大的分析思路方面與宏基因組還是有著不小的相似之處。歸納一下,宏病毒組主要包括一下幾個方面的分析內容:病毒群落結構組成分析;病毒群落功能分析;病毒(特別是噬菌體)宿主預測;病毒與群落中細菌、古菌等其他微生物之間的互作網(wǎng)絡;基于非數(shù)據(jù)庫比對的新病毒序列的挖掘。高通量測序技術對核酸進行測序是非特異的,因此,對一無所知的核酸也可以實現(xiàn)鑒別。河北腸道微生物測序分析

微生物鑒定可以采用不同微生物對周圍環(huán)境的資源的利用度有所不同的特性來區(qū)別。皮膚微生物測序分析方法

病毒宏基因組學中包含兆級的短序列片段(Reads)。通過不同的序列拼接軟件將Reads拼接較長的DNA序列片斷(Contigs)。數(shù)據(jù)組裝可通過K-mer分析評估各個樣品的測序深度,通過對SOAPdenovo設置不同K值,篩選較好組裝結果,對較好組裝結果進行校正,并統(tǒng)計Reads利用率。接著利用已測序生物體的DNA序列構建數(shù)據(jù)庫,將拼接后的Contigs通過不同的鑒定方案,與數(shù)據(jù)庫里的DNA序列信息進行比對,確定該序列來自的生物群落,篩選有用的基因信息。此外,還可以用一些工具對序列進行基因預測(如Metagene、GeneMark、FragGeneScan等)。皮膚微生物測序分析方法