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微生物檢測(cè)方法中比濁法是根據(jù)菌懸液的透光量間接地測(cè)定細(xì)菌的數(shù)量。細(xì)菌懸浮液的濃度在一定范圍內(nèi)與透光度成反比,與光密度成正比,所以,可用光電比色計(jì)測(cè)定菌液,用光密度(OD值)表示樣品菌液濃度。此法簡(jiǎn)便快捷,但只能檢測(cè)含有大量細(xì)菌的懸浮液,得出相對(duì)的細(xì)菌數(shù)目,對(duì)顏色太深的樣品,不能用此法測(cè)定。測(cè)定細(xì)胞重量法此法分為濕重法和干重法。濕重法系單位體積培養(yǎng)物經(jīng)離心后將濕菌體進(jìn)行稱重;干重法系單位體積培養(yǎng)物經(jīng)離心后,以清水洗凈放人干燥器加熱烘干,使之失去水分然后稱重。此法適于菌體濃度較高的樣品,是微生物檢測(cè)的一種常用方法。
病原微生物檢測(cè)的不可知性,使高通量測(cè)序成為研究這類病原微生物的有用工具.隨機(jī)PCR新病原篩查
微生物檢測(cè)的知識(shí):在保藏厭氧菌種或研究微生物的動(dòng)力時(shí)常采用此法。做穿刺接種時(shí),用的接種工具是接種針。用的培養(yǎng)基一般是半固體培養(yǎng)基。它的做法是:用接種針蘸取少量的菌種,沿半固體培養(yǎng)基中心向管底作直線穿刺,如某細(xì)菌具有鞭毛而能運(yùn)動(dòng),則在穿刺線周圍能夠生長(zhǎng)。澆混接種:該法是將待接的微生物先放入培養(yǎng)皿中,然后再倒入冷卻至45℃左右的固體培養(yǎng)基,迅速輕輕搖勻,這樣菌液就達(dá)到稀釋的目的。待平板凝固之后,置合適溫度下培養(yǎng),就可長(zhǎng)出單個(gè)的微生物菌落。廣東病毒檢測(cè)方法一般來(lái)說(shuō),在一定的培養(yǎng)條件下,同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。
微生物檢測(cè)崗位的主要職責(zé):1.負(fù)責(zé)產(chǎn)品無(wú)菌檢查、微生物限度檢查、細(xì)菌內(nèi)檢查、支原體及外源病毒的分析方法開發(fā)、驗(yàn)證;2.對(duì)產(chǎn)品及環(huán)境實(shí)施無(wú)菌檢查、微生物限度檢查、細(xì)菌內(nèi)檢查;3.對(duì)原輔料、內(nèi)包材、工藝用水等實(shí)施微生物限度、細(xì)菌內(nèi)檢查;4.對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)室的試劑、耗材、儀器等實(shí)施日常管理;5.對(duì)實(shí)驗(yàn)室菌種管理、進(jìn)行培養(yǎng)基的促生長(zhǎng)試驗(yàn)、無(wú)菌試驗(yàn)的陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn);6.進(jìn)行潔凈區(qū)日常環(huán)境監(jiān)控及無(wú)菌區(qū)人員更衣確認(rèn);7.對(duì)關(guān)鍵檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行定期的趨勢(shì)分析;8.完成上級(jí)安排的其他事宜。
人們對(duì)病毒認(rèn)識(shí)不斷深入,以及生物技術(shù)的發(fā)展,人類積累了多種病毒性疾病的鑒別診斷能力,掌握了部分病毒的致病機(jī)制及流行規(guī)律,研制出一些病毒的特異性疫苗,并設(shè)計(jì)生產(chǎn)了各種抗病毒化學(xué)制品,極大地降低了病毒性疾病的危害性。病原微生物檢測(cè)方法-高通量測(cè)序技術(shù)之檢驗(yàn)檢疫中的應(yīng)用作為近些年出現(xiàn)的新技術(shù),高通量測(cè)序技術(shù)經(jīng)過不斷地發(fā)展,已經(jīng)在生物技術(shù)、食品安全和醫(yī)藥衛(wèi)生等各個(gè)領(lǐng)域得到應(yīng)用。在檢驗(yàn)檢疫領(lǐng)域中,高通量測(cè)序技術(shù)也正在得到越來(lái)越多的應(yīng)用。高通量測(cè)序在降低單堿基成本的同時(shí),測(cè)序的準(zhǔn)確率更高,這無(wú)疑會(huì)提高基于DNA序列的分子鑒定的準(zhǔn)確率。同時(shí),深度測(cè)序讓復(fù)雜樣品中非常低豐度成員的檢測(cè)成為可能,這種檢測(cè)低豐度種群的能力會(huì)深刻影響復(fù)合樣品中病原微生物的檢出率。病毒的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,只含一種核酸,必須在活細(xì)胞內(nèi)寄生并以復(fù)制方式增殖的生物.
病原微生物檢測(cè)方法中的多種PCR結(jié)合使用,基因芯片技術(shù)與多重PCR結(jié)合可以通過PCR對(duì)目的基因進(jìn)行放大,通過基因芯片的熒光探針增加檢測(cè)的靈敏性和特異性,使得兩種檢測(cè)技術(shù)的優(yōu)勢(shì)互補(bǔ),已應(yīng)用于病原微生物的檢測(cè)。將病原體特異性基因作為靶基因設(shè)計(jì)出引物與探針,進(jìn)行多重PCR擴(kuò)增,制備出寡核苷酸芯片,再對(duì)待測(cè)樣本靶基因進(jìn)行多重PCR擴(kuò)增,將擴(kuò)增產(chǎn)物與病原菌多重PCR基因芯片檢測(cè)體系雜交,可根據(jù)雜交信號(hào)直觀地判讀樣品中所含病原體的種類、型別、毒力、侵襲力,從而對(duì)病原體進(jìn)行檢測(cè)和鑒定。一般來(lái)說(shuō),在一定的培養(yǎng)條件下,同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征.隨機(jī)PCR新病原篩查
由于各種微生物所具有的酶系統(tǒng)不完全相同對(duì)許多物質(zhì)的分解能力亦不一致。隨機(jī)PCR新病原篩查
未知病原鑒定是一項(xiàng)重要的實(shí)驗(yàn)室工作,通過對(duì)未知病原體的分析和鑒定,可以幫助確定疾病的病因,進(jìn)而指導(dǎo)疾病的診斷。以下是一些與未知病原鑒定相關(guān)的知識(shí)點(diǎn):1.樣本收集與處理:采集正確的樣本對(duì)于病原鑒定至關(guān)重要。常見的樣本包括患者的血液、組織、體液、分泌物等。收集后,需要進(jìn)行適當(dāng)?shù)奶幚?,如離心、過濾、冷凍等,以保持樣品的完整性和穩(wěn)定性。2.病原體培養(yǎng):病原體培養(yǎng)是一種常用的方法,通過將樣本接種到特定的培養(yǎng)基上,利用其生長(zhǎng)和營(yíng)養(yǎng)需求,使病原體在培養(yǎng)基中繁殖。培養(yǎng)后,可以觀察病原體的形態(tài)和生長(zhǎng)特性,輔助鑒定。3.分子生物學(xué)方法:包括PCR、基因測(cè)序等技術(shù),可以直接檢測(cè)和鑒定病原體。PCR能夠在樣本中擴(kuò)增病原體的特定基因片段,從而快速確認(rèn)病原體的存在?;驕y(cè)序則可以通過比對(duì)數(shù)據(jù)庫(kù),確定病原體的親緣關(guān)系和種屬。隨機(jī)PCR新病原篩查