高通量測序技術(shù)具有的作用：高通量測序技術(shù)在冠狀病毒的鑒定中發(fā)揮了重要作用，先通過該技術(shù)確認了該病原為以前未知的β冠狀病毒，其次確認了該病毒與蝙蝠相關(guān)冠狀病毒ZC45和ZXC21密切相關(guān)，同源性約為88%，后高通量測序為后續(xù)的診斷提供了強有力的技術(shù)支撐。高通量測序能否定向檢測細菌病毒等微生物？例如某人有皮膚病，提取組織，能否通過高通量測序來檢測后列出所有的致病菌?；蛘弋攽岩傻臅r候，在人體組織中檢測是否有某種特定的細菌或者病毒。（不求原理），就是想知道現(xiàn)在的測序技術(shù)能否替代傳統(tǒng)臨床檢驗方法。相比傳統(tǒng)培養(yǎng)等方法，對樣本的全微生物檢測，或者特定微生物檢測，基因測序技術(shù)目前的時間消耗，準確率，和金錢成本大概如何?？梢远ㄏ驒z測，用特異引物就可以。

想要通過高通量測序獲得病毒全序列，需要經(jīng)歷:核酸純化-文庫構(gòu)建-生物信息學分析這三大基本流程。廣東病毒二代測序分析服務

二代測序應用的患者類型的推薦：共識明確指出了二代測序應用的患者類型及使用的時機的意見:對于神經(jīng)系統(tǒng)急性傳染/血流傳染/呼吸道傳染患者，3天是二代測序使用的時機，在傳統(tǒng)方法(常規(guī)的生化檢查和培養(yǎng))3天未報陽性且經(jīng)驗性調(diào)整無效時，強烈推薦二代測序檢測；對疑似病毒傳染患者，包括：疑似神經(jīng)系統(tǒng)病毒傳染和病毒性肺炎且病情持續(xù)進展的患者，若完善傳統(tǒng)PCR檢測后依然未獲得明確的病原學證據(jù)時，強烈推薦二代測序檢測。對于疑似局灶性傳染患者完成常規(guī)的生物化學、培養(yǎng)或PCR檢測后，若未能獲取病原學診斷結(jié)果，推薦將二代測序作為檢測方法。而對于懷疑繼發(fā)性血流傳染患者：在原發(fā)傳染灶的病原學檢測為陰性或因各種因素無法送檢合適標本的情況下，可考慮將血標本的二代測序檢測作為二線檢測。

四川高通量測序服務高通量測序技術(shù)正式啟用之后，研究者可以將樣品處理至標準濃度和體積后進行測序和分析。

二代測序應用的患者類型的推薦：共識明確指出了二代測序應用的患者類型及使用的時機的意見:對于神經(jīng)系統(tǒng)急性傳染/血流傳染/呼吸道傳染患者，3天是二代測序使用的時機，在傳統(tǒng)方法(常規(guī)的生化檢查和培養(yǎng))3天未報陽性且經(jīng)驗性調(diào)整無效時，強烈推薦二代測序檢測；對疑似病毒傳染患者，包括：疑似神經(jīng)系統(tǒng)病毒傳染和病毒性肺炎且病情持續(xù)進展的患者，若完善傳統(tǒng)PCR檢測后依然未獲得明確的病原學證據(jù)時，強烈推薦二代測序檢測。對于疑似局灶性傳染患者完成常規(guī)的生物化學、培養(yǎng)或PCR檢測后，若未能獲取病原學診斷結(jié)果，推薦將二代測序作為檢測方法。而對于懷疑繼發(fā)性血流傳染患者：在原發(fā)傳染灶的病原學檢測為陰性或因各種因素無法送檢合適標本的情況下，可考慮將血標本的二代測序檢測作為二線檢測。

病毒全基因組測序定：探普生物對病毒的全基因組進行測序的實驗基于二代測序技術(shù)。樣本經(jīng)過核酸純化-文庫構(gòu)建-生物信息學分析這3大基本流程后轉(zhuǎn)換成了序列數(shù)據(jù)。先，在核酸純化環(huán)節(jié)，探普提供專門針對性的核酸純化樣本指南，以提高目的物種的核酸純度和得率，與此同時探普生物也提供核酸純化服務。第二，文庫構(gòu)建環(huán)節(jié)，樣本的核酸具備濃度低，總量少的特點。探普生物專門針對這一點開發(fā)了超微量核酸文庫構(gòu)建，可以將0.01ng/μl甚至更低濃度的核酸構(gòu)建成測序文庫。第三，生物信息學分析環(huán)節(jié)。生存環(huán)境和狀態(tài)決定了對病毒的全基因組進行測序的下機數(shù)據(jù)一般都伴隨大量的宿主和其他微生物的數(shù)據(jù)。探普生物基于該特點，優(yōu)化了自有數(shù)據(jù)庫，搭載了專門用的的生物信息學分析流程，可處理復雜背景下的目標物種序列。

病毒全基因組測序具有的特點:獨有的一定定量技術(shù)，實現(xiàn)病原定量分析.

病毒全基因組測序定在探普生物長時間運行過程中，我們接觸到的對病毒的全基因組進行測序項目有比較豐富的應用場景。先，從事基因進化/疫苗/藥品/抗體研制方向的研究的研究者一定會用到測序。這種場景一般是用密集的sanger測序監(jiān)測某幾個關(guān)鍵基因，搭載一定頻率的全基因組測序。這樣的組合省時省力省經(jīng)費，同時能達到研究目的。此外，有的單位需要對傳染病的病原進行流行病學監(jiān)測和研究，如疾控/疫控中心、醫(yī)院的傳染病科室以及一些高校和研究所的相應課題組，可能需要對病毒的全基因組進行測序以后，結(jié)合其他上下游的研究數(shù)據(jù)，達到研究或者監(jiān)測疫病的目的。

高通量測序技術(shù)正式啟用之后，研究者可以將樣品處理至標準濃度和體積后進行測序和分析.廣東病毒二代測序分析服務

探普生物獨有的實驗和分析流程，可兼容高復雜度，低濃度的病毒核酸。廣東病毒二代測序分析服務

能實現(xiàn)對病毒的全基因組進行測序的技術(shù)手段：早期在高通量測序技術(shù)普及之前，對病毒的全基因組進行測序是通過非特異性擴增+克隆結(jié)合sanger測序來完成的。當物種有了參考的序列之后，可以通過特異性擴增+sanger測序獲得全基因組序列。Sanger測序準確度高，讀長很長，但與此同時，擴增和克隆工作費時費力，由于流程繁瑣，加上快速變異導致引物無法通用，該方法對于大量基因組的測序工作而言，可操作性不強，這對于研究者一直是一個困擾。高通量測序技術(shù)正式啟用之后，研究者可以將樣品處理至標準濃度和體積后進行測序和分析，減少了工作量，增加了成功率。探普生物進行了大量有針對性的研發(fā)和測試，開發(fā)了全套的實驗和分析流程用于對病毒的全基因組進行測序，該流程自運行以來廣受研究者們好評。

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