病毒全基因組測序定：上海探普生物科技有限公司的對病毒的全基因組進行測序有什么優(yōu)勢？全國開設病毒相關(guān)測序的公司不超過5家，只有探普生物是專門為病毒研究者服務的，探普生物的研發(fā)團隊和實驗團隊都來自全國各地病毒學、微生物學專業(yè)的高校，碩士及以上學歷成員超過60%，團隊具備普通測序?qū)嶒灪头治龌A(chǔ)之外，同時具備病毒學及微生物學的學術(shù)背景，相當了解病毒相關(guān)樣本情況、研究方向等。研究者在項目咨詢的時候就可以明顯感覺到探普生物的專業(yè)性，溝通順暢，省時省力。

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全基因組測序要注意的事項：全基因組測序是對未知基因組序列的物種進行個體的基因組測序。技術(shù)路線：提取基因組DNA，然后隨機打斷，電泳回收所需長度的DNA的片段（0.2~5Kb），加上接頭,進行DNA簇（Cluster）制備，后利用Paired-End（Solexa）或者Mate-Pair（SOLiD）的方法對插入片段進行測序。然后對測得的序列組裝成Contig，通過Paired-End的距離可進一步組裝成Scaffold，進而可組裝成染色體等。組裝效果與測序深度與覆蓋度、測序質(zhì)量等有關(guān)。常用的組裝有：SOAPdenovo、Trimity、Abyss等。測序深度（Sequencingdepth）是指測序得到的堿基總量（bp）與基因組大小的比值，它是評價測序量的指標之一。測序深度與基因組覆蓋度之間是一個正相關(guān)的關(guān)系，測序帶來的錯誤率或假陽性結(jié)果會隨著測序深度的提升而下降。測序的個體，如果采用的是雙末端或Mate-Pair方案，當測序深度在50X~100X以上時，基因組覆蓋度和測序錯誤率控制均得以保證，后續(xù)序列組裝成染色體才能變得更容易與準確。

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新一代測序中基因從頭測序和重測序有什么區(qū)別？從頭測序的原理是生成互相分離的若干組帶放射性標記的寡核苷酸，每組寡核苷酸都有固定的起點，但卻隨機終止于特定的一種或者多種殘基上?？梢詤^(qū)分長度只差一個核苷酸的不同DNA分子的條件下，對各組寡核苷酸進行電泳分析，只要把幾組寡核苷酸加樣于測序凝膠中若干個相鄰的泳道上。全基因組重測序是對已知基因組序列的物種進行不同個體的基因組測序，并在此基礎(chǔ)上對個體或群體進行差異性分析。SBC將不同梯度插入片段的測序文庫結(jié)合短序列、雙末端進行測序，幫助客戶在全基因組水平上掃描并檢測與重要性狀相關(guān)的基因序列差異和結(jié)構(gòu)變異，實現(xiàn)遺傳進化分析及重要性狀候選基因預測。

病毒全基因組測序定中利用病毒傳播過程中核酸序列上特定位置的變化來進行分型，著重于區(qū)分不同型別病毒的來源，是我國調(diào)整防控策略的重要依據(jù)之一。傳統(tǒng)的病原微生物檢測手段包括形態(tài)學檢測、培養(yǎng)分離、生化檢測和免疫學檢測。這些方法檢測周期長、靈敏度低，對操作人員的技術(shù)水平要求比較高等因素；熒光定量PCR技術(shù)和等溫擴增技術(shù)等分子生物學的檢測方法部分解決了上述問題，簡單快速，通過對核酸特異性序列的檢測，可在短時間內(nèi)快速判斷病原體的種類，但是這些方法無法進行混合傳染鑒定和病毒溯源，隨著基因組學技術(shù)的發(fā)展，高通量測序技術(shù)已經(jīng)能夠做到不依賴于傳統(tǒng)的微生物培養(yǎng)，可直接對臨床樣本中的核酸進行高通量測序，然后與數(shù)據(jù)庫進行比對，實現(xiàn)傳染性疾病的溯源、檢測、分型和耐藥評估等多個方面，受到越來越多臨床和科研工作者的關(guān)注。探普生物病毒測序具備樣本準備簡單的優(yōu)點。

病毒全基因組測序定：探普生物對病毒的全基因組進行測序的實驗基于二代測序技術(shù)。樣本經(jīng)過核酸純化-文庫構(gòu)建-生物信息學分析這3大基本流程后轉(zhuǎn)換成了序列數(shù)據(jù)。先，在核酸純化環(huán)節(jié)，探普提供專門針對性的核酸純化樣本指南，以提高目的物種的核酸純度和得率，與此同時探普生物也提供核酸純化服務。第二，文庫構(gòu)建環(huán)節(jié)，樣本的核酸具備濃度低，總量少的特點。探普生物專門針對這一點開發(fā)了超微量核酸文庫構(gòu)建，可以將0.01ng/μl甚至更低濃度的核酸構(gòu)建成測序文庫。第三，生物信息學分析環(huán)節(jié)。生存環(huán)境和狀態(tài)決定了對病毒的全基因組進行測序的下機數(shù)據(jù)一般都伴隨大量的宿主和其他微生物的數(shù)據(jù)。探普生物基于該特點，優(yōu)化了自有數(shù)據(jù)庫，搭載了專門用的的生物信息學分析流程，可處理復雜背景下的目標物種序列。

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目前對我國首例輸入性裂谷熱病例病毒進行全基因組測定,分析其進化來源及潛在變異.方法提取樣本核酸,非特異性反轉(zhuǎn)錄擴增病毒基因組RNA,使用IonTorrent二代測序儀進行病毒全基因組測定.對獲得的基因組數(shù)據(jù)進行序列拼接、比對、進化樹構(gòu)建和關(guān)鍵位點分析.結(jié)果通過測定獲得了病毒全基因組11979nt,該測定病毒屬E基因分支,序列與先前南非分離株Kakamas相似度較高(＞98％)。病毒Gn蛋白C端信號肽區(qū)存在1個氨基酸突變.結(jié)論本研究分析測定的裂谷熱病毒全基因組與目前非洲流行株高度相似,病毒基因特征未出現(xiàn)明顯變異。

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