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國內(nèi)深度測序進化分析服務(wù)

來源: 發(fā)布時間:2023-09-27

目前對我國首例輸入性裂谷熱病例病毒進行全基因組測定,分析其進化來源及潛在變異.方法提取樣本核酸,非特異性反轉(zhuǎn)錄擴增病毒基因組RNA,使用IonTorrent二代測序儀進行病毒全基因組測定.對獲得的基因組數(shù)據(jù)進行序列拼接、比對、進化樹構(gòu)建和關(guān)鍵位點分析.結(jié)果通過測定獲得了病毒全基因組11979nt,該測定病毒屬E基因分支,序列與先前南非分離株Kakamas相似度較高(>98%)。病毒Gn蛋白C端信號肽區(qū)存在1個氨基酸突變.結(jié)論本研究分析測定的裂谷熱病毒全基因組與目前非洲流行株高度相似,病毒基因特征未出現(xiàn)明顯變異。


病毒全基因組進行測序在輔助流調(diào)溯源、快速確定傳播關(guān)系起到了非常關(guān)鍵的作用。國內(nèi)深度測序進化分析服務(wù)

病毒全基因組測序定:探普生物對病毒的全基因組進行測序的實驗基于二代測序技術(shù)。樣本經(jīng)過核酸純化-文庫構(gòu)建-生物信息學分析這3大基本流程后轉(zhuǎn)換成了序列數(shù)據(jù)。先,在核酸純化環(huán)節(jié),探普提供專門針對性的核酸純化樣本指南,以提高目的物種的核酸純度和得率,與此同時探普生物也提供核酸純化服務(wù)。第二,文庫構(gòu)建環(huán)節(jié),樣本的核酸具備濃度低,總量少的特點。探普生物專門針對這一點開發(fā)了超微量核酸文庫構(gòu)建,可以將0.01ng/μl甚至更低濃度的核酸構(gòu)建成測序文庫。第三,生物信息學分析環(huán)節(jié)。生存環(huán)境和狀態(tài)決定了對病毒的全基因組進行測序的下機數(shù)據(jù)一般都伴隨大量的宿主和其他微生物的數(shù)據(jù)。探普生物基于該特點,優(yōu)化了自有數(shù)據(jù)庫,搭載了專門用的的生物信息學分析流程,可處理復(fù)雜背景下的目標物種序列。




廣州高通量測序進化分析服務(wù)公司二代測序單次運行可以獲得海量的數(shù)據(jù)量,因此也稱為高通量測序。

病毒的蛋白組成的特點是什么? (1)結(jié)構(gòu)蛋白由病毒的基因組編碼,結(jié)構(gòu)蛋白組成病毒體的蛋白成分如病毒體的衣殼蛋白、基質(zhì)蛋白和包膜蛋白。?? (2)非結(jié)構(gòu)蛋白由病毒的基因組編碼,但非結(jié)構(gòu)蛋白不參與病毒體構(gòu)成的蛋白成分。非結(jié)構(gòu)蛋白可存在于病毒體內(nèi),如病毒的酶就屬于非結(jié)構(gòu)蛋白,也可存在于侵染細胞。?? 病毒結(jié)構(gòu)蛋白有以下幾種功能:①病毒結(jié)構(gòu)蛋白可保護病毒核酸,避免環(huán)境中的核酸酶和其他理化因素對病毒核酸造成破壞;②病毒結(jié)構(gòu)蛋白可參與病毒的侵染過程,衣殼蛋白和包膜上的蛋白突起能吸附至易感細胞受體,引起侵染;③具有抗原***毒基因編碼的衣殼蛋白和包膜蛋白具有良好的抗原性,能刺激機體產(chǎn)生免疫反應(yīng)。

高通量測序在病毒準種研究中如何應(yīng)用 在采用高通量測序技術(shù)研究準種耐藥性方面,人類免疫缺陷病毒(HIV)較為突出。人類免疫缺陷病毒的逆轉(zhuǎn)錄酶有非常大的錯配傾向,造成幾乎每復(fù)制1輪出現(xiàn)1個堿基對替換突變。被侵染的個體中存在非常巨大的病毒群,每天有1010個病毒粒子產(chǎn)生和死亡,在侵染后這種行為導(dǎo)致病毒快速形成一個多樣性的群,即準種。高通量測序是研究大群體中序列突變體特征的先進方法,它的一種應(yīng)用是對個體抗病毒治療失敗時產(chǎn)生的數(shù)量很少的耐藥突變的定量研究。測序覆蓋度是反映測序隨機性的指標之一。

病毒全基因組測序定在探普生物長時間運行過程中,我們接觸到的對病毒的全基因組進行測序項目有比較豐富的應(yīng)用場景。先,從事基因進化/疫苗/藥品/抗體研制方向的研究的研究者一定會用到測序。這種場景一般是用密集的sanger測序監(jiān)測某幾個關(guān)鍵基因,搭載一定頻率的全基因組測序。這樣的組合省時省力省經(jīng)費,同時能達到研究目的。此外,有的單位需要對傳染病的病原進行流行病學監(jiān)測和研究,如疾控/疫控中心、醫(yī)院的傳染病科室以及一些高校和研究所的相應(yīng)課題組,可能需要對病毒的全基因組進行測序以后,結(jié)合其他上下游的研究數(shù)據(jù),達到研究或者監(jiān)測疫病的目的。


高通量測序技術(shù)正式啟用之后,研究者可以將樣品處理至標準濃度和體積后進行測序和分析.河南高通量測序分析方法

想要通過高通量測序獲得病毒全序列,需要經(jīng)歷:核酸純化-文庫構(gòu)建-生物信息學分析這三大基本流程.國內(nèi)深度測序進化分析服務(wù)

病毒基因組的結(jié)構(gòu)特點有哪些? 病毒基因組大小相差較大。 病毒基因組可以由DNA組成,也可以由RNA組成。 多數(shù)RNA病毒的基因組是由連續(xù)的核糖核酸鏈組成,還沒有發(fā)現(xiàn)有節(jié)段性的DNA分子構(gòu)成的病毒基因組。 病毒基因組的大部分是用來編碼蛋白質(zhì)的。 病毒基因組DNA序列能上相關(guān)的蛋白質(zhì)的基因或rRNA的基因往往叢集在基因組的一個或幾個特定的部位,形成一個功能單位或轉(zhuǎn)錄單元。 除了反轉(zhuǎn)錄病毒以外一切病毒基因組都是單倍體,每個基因在病毒顆粒中只出現(xiàn)一次。 噬菌體(細菌病毒)的基因是連續(xù)的;而真核細胞病毒的基因是不連續(xù)的,具有內(nèi)含子。國內(nèi)深度測序進化分析服務(wù)