探普生物進(jìn)行病毒基因組測(cè)序的流程:在探普生物進(jìn)行病毒基因組測(cè)序非常簡(jiǎn)單,簡(jiǎn)而言之,客戶只需要說(shuō)清楚樣品情況,準(zhǔn)備樣品即可,其他事宜都由探普來(lái)進(jìn)行安排。大致流程如下:1)與銷售人員溝通項(xiàng)目需求和樣本情況;2)探普生物工作人員擬定項(xiàng)目合同,雙方協(xié)商合同內(nèi)容后簽字蓋章;3)按樣本準(zhǔn)備指南準(zhǔn)備好樣本,填寫(xiě)信息單后通知銷售人員預(yù)訂干冰,安排樣本寄運(yùn)輸;4)客戶支付項(xiàng)目啟動(dòng)款,探普生物啟動(dòng)項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)和分析并提供測(cè)序報(bào)告;5)客戶支付項(xiàng)目尾款,探普生物提交測(cè)序數(shù)據(jù)和分析結(jié)果;6)售后問(wèn)題處理,項(xiàng)目結(jié)題。
從事病原流行病學(xué)監(jiān)測(cè)和研究的工作者需要將病毒全基因組測(cè)序結(jié)合其他上下游的研究數(shù)據(jù)。DNA高通量測(cè)序進(jìn)化分析診斷
RNA/DNA病毒測(cè)序?qū)Σ《净蚪M進(jìn)行測(cè)序是快速了解病毒突變、毒力變化、病毒型別的有效方法??梢愿鶕?jù)病毒基因組大小和類型,采用PCR、RT-PCR或shotgun測(cè)序法,對(duì)病毒的部分或全長(zhǎng)基因組測(cè)序,結(jié)果準(zhǔn)確可靠。服務(wù)標(biāo)準(zhǔn):測(cè)出的序列準(zhǔn)確性在99%以上;病毒全基因組測(cè)序測(cè)出序列在總基因組大小95%以上;數(shù)小于5個(gè);Shotgun測(cè)序的覆蓋度在6以上;PCR和RT-PCR測(cè)序達(dá)到2。服務(wù)說(shuō)明:1、提供病毒DNA或RNA作為樣品。2、PCR測(cè)序的DNA樣品總量大于5μg,濃度大于20ng/μl。DNA無(wú)降解。3、Shotgun測(cè)序法的DNA樣品總量大于20μg,濃度大于100ng/μl。DNA無(wú)降解。4、用RT-PCR和PCR測(cè)序法在提供參考序列時(shí)需同時(shí)提交樣品部分序列與參考序列的比對(duì)文件,確保同源性在95%以上。
DNA病毒基因測(cè)序病毒全基因組進(jìn)行測(cè)序,檢測(cè)人員利用病毒傳播過(guò)程中核酸序列上特定位置的變化來(lái)進(jìn)行分型。
第二代測(cè)序技術(shù)的發(fā)展:第二代測(cè)序技術(shù)(nextgene-rationsequencing,NGS)發(fā)展迅猛,與Sanger測(cè)序技術(shù)相比,NGS是一種能一次對(duì)幾十萬(wàn)到幾百萬(wàn)的DNA分子進(jìn)行序列測(cè)定的高通量的測(cè)序技術(shù),這種高通量測(cè)序使得對(duì)一個(gè)物種的轉(zhuǎn)錄組和基因組進(jìn)行細(xì)致全貌地分析成為可能,因此又被稱為深度測(cè)序(deepsequencing).相比傳統(tǒng)的個(gè)體基因組測(cè)序,NGS使得測(cè)序價(jià)格日益廉價(jià),并且在生物信息學(xué)軟件的輔助下,可以將大量不同基因片段的信息連接起來(lái)進(jìn)行基因組組裝,完成生物的基因組測(cè)序,這種新的測(cè)序技術(shù)革新了植物病毒的診斷方法,對(duì)于病毒的流行病學(xué)和生態(tài)學(xué)研究起到了非常重要的推動(dòng)作用。
高通量測(cè)序技術(shù)又稱“下一代“測(cè)序技術(shù)或深度測(cè)序技術(shù),可以一次性對(duì)幾十萬(wàn)至幾百萬(wàn)條DNA分子進(jìn)行序列測(cè)定?,F(xiàn)已普遍應(yīng)用在基因組測(cè)序、基因表達(dá)分析、非編碼小分子RNA鑒定、轉(zhuǎn)錄因子靶基因篩選及DNA甲基化等相關(guān)的研究領(lǐng)域。高通量測(cè)序技術(shù)是對(duì)傳統(tǒng)測(cè)序一次性的改變,一次對(duì)幾十萬(wàn)到幾百萬(wàn)條DNA分子進(jìn)行序列測(cè)定,因此在有些文獻(xiàn)中稱其為下一代測(cè)序技術(shù)(nextgenerationsequencing)足見(jiàn)其劃時(shí)代的改變,同時(shí)高通量測(cè)序使得對(duì)一個(gè)物種的轉(zhuǎn)錄組和基因組進(jìn)行細(xì)致全貌的分析成為可能,所以又被稱為深度測(cè)序(deepsequencing)。
病毒全基因組測(cè)序具有的特點(diǎn):完善的售后服務(wù)。
深度測(cè)序技術(shù)對(duì)社會(huì)的影響:深度測(cè)序技術(shù)促進(jìn)了基因檢測(cè)的普及,對(duì)社會(huì)的影響第1個(gè)方面反映在商業(yè)模式的變化,即醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)和健康管理方面的平民化、個(gè)性化趨勢(shì)的形成。社會(huì)生活受到深度測(cè)序技術(shù)影響的第二個(gè)方面是基因測(cè)序的普遍應(yīng)用。例如,基因關(guān)聯(lián)將人與人通過(guò)遺傳學(xué)關(guān)聯(lián)起來(lái),人們可以對(duì)基因進(jìn)行分析判定親緣關(guān)系,基因測(cè)定甚至可以幫助判定婚姻(包括遺傳病等方面的)匹配度。公安機(jī)關(guān)可以通過(guò)基因比對(duì),鎖定犯罪嫌疑人、尋找丟散的兒童和親人。甚至有報(bào)道表明,測(cè)定20多個(gè)基因就可以將人臉重構(gòu)?;驒z測(cè)的應(yīng)用將隨著基因-表型的關(guān)聯(lián)得到更普遍的應(yīng)用,對(duì)社會(huì)生活的方方面面起到重要作用。
高通量測(cè)序技術(shù)本身并不是以病毒為目標(biāo)開(kāi)發(fā)的。病毒序列測(cè)序進(jìn)化分析方法
團(tuán)隊(duì)具備普通測(cè)序?qū)嶒?yàn)和分析基礎(chǔ)。DNA高通量測(cè)序進(jìn)化分析診斷
病毒全基因組測(cè)序注意事項(xiàng):病毒全基因組測(cè)序,測(cè)序覆蓋度,基因組被測(cè)序得到的堿基覆蓋的比例;測(cè)序覆蓋度是反映測(cè)序隨機(jī)性的指標(biāo)之一;測(cè)序序深度與覆蓋度之間的關(guān)系可以過(guò)Lander-WatermanModel(1988)來(lái)確定。當(dāng)深度達(dá)到5X時(shí),則可覆蓋基因組的約99.4%以上。通過(guò)生物信息手段,分析不同個(gè)體基因組間的結(jié)構(gòu)差異,同時(shí)完成SNP及基因組結(jié)構(gòu)注釋。DNA突變可誘發(fā)病癥。吸煙過(guò)程中所釋放的>60種致病化學(xué)物質(zhì)可與DNA結(jié)合并對(duì)DNA鏈上的鳥(niǎo)嘌呤和腺嘌呤進(jìn)行化學(xué)修飾從而產(chǎn)生大的加合物,該加合物改變了DNA雙螺旋的結(jié)構(gòu),如果不被核苷酸剪切修復(fù)或其他的途徑進(jìn)行糾正,那么DNA在復(fù)制時(shí)就會(huì)按照non-Watson-Crick方式進(jìn)行復(fù)制并阻止RNA聚合酶進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。
DNA高通量測(cè)序進(jìn)化分析診斷