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上海新病毒鑒定方法

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-10-16

隨著100多年來(lái)人們對(duì)病毒認(rèn)識(shí)不斷深入,以及生物技術(shù)的發(fā)展,人類積累了多種病毒性疾病的鑒別診斷能力,掌握了部分病毒的致病機(jī)制及流行規(guī)律,研制出一些病毒的特異性疫苗,并設(shè)計(jì)生產(chǎn)了各種抗病毒化學(xué)制品,極大地降低了病毒性疾病的危害性。病原微生物檢測(cè)方法-高通量測(cè)序技術(shù)之檢驗(yàn)檢疫中的應(yīng)用作為近些年出現(xiàn)的新技術(shù),高通量測(cè)序技術(shù)經(jīng)過(guò)不斷地發(fā)展,已經(jīng)在生物技術(shù)、食品安全和醫(yī)藥衛(wèi)生等各個(gè)領(lǐng)域得到應(yīng)用。在檢驗(yàn)檢疫領(lǐng)域中,高通量測(cè)序技術(shù)也正在得到越來(lái)越多的應(yīng)用。高通量測(cè)序在降低單堿基成本的同時(shí),測(cè)序的準(zhǔn)確率更高,這無(wú)疑會(huì)提高基于DNA序列的分子鑒定的準(zhǔn)確率。同時(shí),深度測(cè)序讓復(fù)雜樣品中非常低豐度成員的檢測(cè)成為可能,這種檢測(cè)低豐度種群的能力會(huì)深刻影響復(fù)合樣品中病原微生物的檢出率。室內(nèi)空氣是微生物污染的傳播途徑。上海新病毒鑒定方法

生物的個(gè)體在一生的生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中,經(jīng)過(guò)不同的發(fā)育階段。這種過(guò)程對(duì)特定的生物來(lái)講是重復(fù)循環(huán)的,常稱為該種生物的生活周期或生活史。各種生物都有自己的生活史。在分類鑒定中,生活史有時(shí)也是一項(xiàng)指標(biāo),如黏細(xì)菌就是以它的生活史作為分類鑒定的依據(jù)。很多細(xì)菌有十分相似的外表結(jié)構(gòu)(如鞭毛)或有作用相同的酶(如乳酸桿菌屬內(nèi)各種細(xì)菌都有乳酸脫氫酶)。雖然它們的蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)各異,但在普通技術(shù)下(如電子顯微鏡或生化反應(yīng)),仍無(wú)法分辨它們。然而利用抗原與抗體的高度敏感特異性反應(yīng),就可用來(lái)鑒定相似的菌種,或?qū)νN微生物分型。用已知菌種、型或菌株制成的抗血清,與待鑒定的對(duì)象是否發(fā)生特異性的血清學(xué)反應(yīng)來(lái)鑒定未知菌種、型或菌株。該法常用于腸道菌、噬菌體和病毒的分類鑒定。利用此法,已將傷寒桿菌、肺炎鏈球菌等菌分成數(shù)十種菌型。上海新病毒鑒定方法病原微生物檢測(cè)的不可知性,使高通量測(cè)序成為研究這類病原微生物的有用工具。

傳統(tǒng)病原微生物檢測(cè)方法是生化方法。生化方法檢測(cè)病原微生物實(shí)際上是測(cè)定微生物特異性酶。由于各種微生物所具有的酶系統(tǒng)不完全相同,對(duì)許多物質(zhì)的分解能力亦不一致。因此可利用不同底物產(chǎn)生的不同代謝產(chǎn)物來(lái)間接檢測(cè)該微生物內(nèi)酶的有無(wú),從而達(dá)到檢測(cè)特定微生物的目的。如沙門氏菌能產(chǎn)生辛酯酶,這一性能是除沙門氏菌外的各屬腸桿菌科細(xì)菌所不具備的。根據(jù)這一特性,甄宏太等報(bào)道了快速檢測(cè)沙門氏菌的辛酯酶法。大腸埃希氏菌具β2葡萄糖醛酸酶,但以O(shè)157:H7為腸出血性大腸埃希氏菌(EHEC)卻不具此酶,故β2葡萄糖醛酸酶陰性已成為初步篩查EHEC的重要特征。

微生物鑒定方法:首先呢,就是從觀察顯微鏡下甚至光鏡下的微生物的的那個(gè)細(xì)胞的形態(tài),比如說(shuō),是球菌,還是桿菌,還是弧菌,還是螺旋菌,這都是可以從微生物的單個(gè)細(xì)胞形態(tài)上區(qū)分的。還有就是細(xì)胞的形態(tài),比如說(shuō)是否有鞭毛、芽孢之類的東西,都是微生物鑒別的特征性特征。其次呢就是觀察細(xì)菌的菌落形態(tài),因?yàn)榧?xì)菌生長(zhǎng)繁殖到一定階段大多都是以菌群的形態(tài)存在的,不同的細(xì)菌菌落在不同的培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況不同,部分細(xì)菌對(duì)培養(yǎng)基要求較高,部分培養(yǎng)基能在特定的培養(yǎng)基上生存,通過(guò)微生物對(duì)不同類型培養(yǎng)基的適應(yīng)性,可以起到對(duì)菌種的有效區(qū)分。未知病毒必須在活細(xì)胞內(nèi)寄生并復(fù)制的非細(xì)胞型微生物。

微生物鑒定可以用微生物對(duì)噬菌體的敏感性作為指標(biāo)來(lái)鑒定微生物的種屬。因?yàn)楦鞣N噬菌體都有其嚴(yán)格的宿主范圍,不同的細(xì)菌作為噬菌體的宿主對(duì)應(yīng)有特定的已知特性的噬菌體,其和噬菌體的作用方式也有接合,轉(zhuǎn)化,轉(zhuǎn)接,溶原性轉(zhuǎn)換和原生質(zhì)體融合等多種方式。部分細(xì)菌可以采用血清學(xué)反應(yīng)的方法來(lái)進(jìn)行區(qū)分和鑒別,就比如說(shuō)常見的疑似傷寒沙門菌的菌種鑒別,我們可以利用血清學(xué)反應(yīng),現(xiàn)有的已知的對(duì)應(yīng)的血清學(xué)反應(yīng)抗體,蘸取菌種液在抗體液中涂抹,看是否會(huì)出現(xiàn)血凝現(xiàn)象(即是否出現(xiàn)淡白色的凝集顆粒)。微生物檢測(cè)注意事項(xiàng):必須嚴(yán)格把關(guān)是很有必要的。成都DNA病原檢測(cè)價(jià)格

進(jìn)行菌種鑒定時(shí),所用的微生物均要求為純的培養(yǎng)物。上海新病毒鑒定方法

微生物鑒定系統(tǒng)的工作原理因不同的儀器和系統(tǒng)而異。不同的細(xì)菌對(duì)底物的反應(yīng)不同是生化反應(yīng)鑒定細(xì)菌的基礎(chǔ),而試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確度取決于鑒定系統(tǒng)配套培養(yǎng)基的制備方法、培養(yǎng)物濃度、孵育條件和結(jié)果判定等。大多微生物鑒定系統(tǒng)采用細(xì)菌分解底物后反應(yīng)液中pH的變化,色原性或熒光原性底物的酶解,測(cè)定揮發(fā)或不揮發(fā)酸,或識(shí)別是否生長(zhǎng)等方法來(lái)分析鑒定細(xì)菌。藥敏試驗(yàn)分析系統(tǒng)的基本原理是將微量稀釋在條孔或條板中,加入菌懸液孵育后放入儀器或在儀器中直接孵育,通過(guò)測(cè)定細(xì)菌生長(zhǎng)的濁度,或測(cè)定培養(yǎng)基中熒光指示劑的強(qiáng)度或熒光原性物質(zhì)的水解,觀察細(xì)菌的生長(zhǎng)情況。在含有培養(yǎng)基中,濁度的增加。上海新病毒鑒定方法

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