微生物鑒定還可以用微生物對(duì)噬菌體的敏感性作為指標(biāo)來(lái)鑒定微生物的種屬。因?yàn)楦鞣N噬菌體都有其嚴(yán)格的宿主范圍,不同的細(xì)菌作為噬菌體的宿主對(duì)應(yīng)有特定的已知特性的噬菌體,其和噬菌體的作用方式也有接合,轉(zhuǎn)化,轉(zhuǎn)接,溶原性轉(zhuǎn)換和原生質(zhì)體融合等多種方式。部分細(xì)菌可以采用血清學(xué)反應(yīng)的方法來(lái)進(jìn)行區(qū)分和鑒別,就比如說(shuō)常見(jiàn)的疑似傷寒沙門(mén)菌的菌種鑒別,我們可以利用血清學(xué)反應(yīng),現(xiàn)有的已知的對(duì)應(yīng)的血清學(xué)反應(yīng)抗體,蘸取菌種液在抗體液中涂抹,看是否會(huì)出現(xiàn)血凝現(xiàn)象(即是否出現(xiàn)淡白色的凝集顆粒)。大多微生物鑒定系統(tǒng)是采用細(xì)菌分解底物后反應(yīng)液中pH變化的。DNA新病原篩查找哪家
微生物檢測(cè)方法中比濁法是根據(jù)菌懸液的透光量間接地測(cè)定細(xì)菌的數(shù)量。細(xì)菌懸浮液的濃度在一定范圍內(nèi)與透光度成反比,與光密度成正比,所以,可用光電比色計(jì)測(cè)定菌液,用光密度(OD值)表示樣品菌液濃度。此法簡(jiǎn)便快捷,但只能檢測(cè)含有大量細(xì)菌的懸浮液,得出相對(duì)的細(xì)菌數(shù)目,對(duì)顏色太深的樣品,不能用此法測(cè)定。測(cè)定細(xì)胞重量法此法分為濕重法和干重法。濕重法系單位體積培養(yǎng)物經(jīng)離心后將濕菌體進(jìn)行稱重;干重法系單位體積培養(yǎng)物經(jīng)離心后,以清水洗凈放人干燥器加熱烘干,使之失去水分然后稱重。此法適于菌體濃度較高的樣品,是微生物檢測(cè)的一種常用方法。隨機(jī)PCR未知病原微生物鑒定排行高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)核酸進(jìn)行測(cè)序是非特異的。
微生物鑒定的用途:醫(yī)療保健:準(zhǔn)確、快速地鑒定細(xì)菌和寄生蟲(chóng),以進(jìn)行正確和及時(shí)的疾病診斷,并進(jìn)行適當(dāng)?shù)脑\療。流行病學(xué):為了追蹤病原體和追蹤疾病的傳播和暴發(fā),以及鑒定新的隔離物,例如耐藥隔離。制藥工業(yè):由于微生物是對(duì)無(wú)菌性的重大威脅,對(duì)環(huán)境微生物的準(zhǔn)確鑒定通常是制藥行業(yè)良好的生產(chǎn)實(shí)踐(GMP)要求。其他用途:包括刑事調(diào)查、微生物取證和環(huán)境研究等。傳統(tǒng)的微生物鑒定方法依賴于表型鑒定,主要是用染色法、培養(yǎng)法和簡(jiǎn)單的生化檢驗(yàn)。宏觀特征包括微生物的整體外觀,其形狀、大小、顏色和氣味等,可以用肉眼看到。通過(guò)在瓊脂培養(yǎng)基檢查其形態(tài)學(xué)/宏觀特征來(lái)確定微生物的類型。同一物種在不同的培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)不同的表現(xiàn)。
傳統(tǒng)病原微生物檢測(cè)方法概況:隨著醫(yī)學(xué)微生物學(xué)研究技術(shù)的不斷發(fā)展,病原學(xué)診斷已不再局限于病原體水平,深入到分子水平、基因水平的檢測(cè)手段不斷出現(xiàn)并被應(yīng)用于臨床和實(shí)驗(yàn)。核酸分子雜交技術(shù)、PCR技術(shù)、基因芯片技術(shù)、高通量測(cè)序技術(shù)等檢測(cè)方法,自動(dòng)化程度高,快速省時(shí)、無(wú)污染、結(jié)果精確,可以準(zhǔn)確靈敏地鑒定病原微生物。傳統(tǒng)的病原微生物的檢測(cè)方法有:直接涂片鏡檢、分離培養(yǎng)與生化反應(yīng)、組織細(xì)胞培養(yǎng)、血清學(xué)與免疫學(xué)檢測(cè)、血清學(xué)與免疫學(xué)檢測(cè)、基因檢測(cè)(核酸雜交技術(shù)、基因芯片技術(shù)、PCR技術(shù)、環(huán)介導(dǎo)恒溫核酸擴(kuò)增法等)。常用的病毒檢測(cè)方法:植物直接測(cè)定法、指示植物測(cè)定法、血清學(xué)方法。
微生物檢測(cè)的相關(guān)知識(shí):在保藏厭氧菌種或研究微生物的動(dòng)力時(shí)常采用此法。做穿刺接種時(shí),用的接種工具是接種針。用的培養(yǎng)基一般是半固體培養(yǎng)基。它的做法是:用接種針蘸取少量的菌種,沿半固體培養(yǎng)基中心向管底作直線穿刺,如某細(xì)菌具有鞭毛而能運(yùn)動(dòng),則在穿刺線周?chē)軌蛏L(zhǎng)。澆混接種:該法是將待接的微生物先放入培養(yǎng)皿中,然后再倒入冷卻至45℃左右的固體培養(yǎng)基,迅速輕輕搖勻,這樣菌液就達(dá)到稀釋的目的。待平板凝固之后,置合適溫度下培養(yǎng),就可長(zhǎng)出單個(gè)的微生物菌落。未知病毒是指未被證實(shí)的某種病毒。DNA新病原篩查找哪家
病毒的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,只含一種核酸,必須在活細(xì)胞內(nèi)寄生并以復(fù)制方式增殖的生物。DNA新病原篩查找哪家
微生物檢測(cè)方法:計(jì)數(shù)器測(cè)定法即用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器進(jìn)行計(jì)數(shù)。取一定體積的樣品細(xì)胞懸液置于血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的計(jì)數(shù)室內(nèi),用顯微鏡觀察計(jì)數(shù)。由于計(jì)數(shù)室的容積是一定的(0.1mm3),因而根據(jù)計(jì)數(shù)器刻度內(nèi)的細(xì)菌數(shù),可計(jì)算樣品中的含菌數(shù)。本法簡(jiǎn)便易行,可立即得出結(jié)果,不僅適于細(xì)菌計(jì)數(shù),也適用于酵母菌及霉菌孢子計(jì)數(shù)。電子計(jì)數(shù)器的工作原理是測(cè)定小孔中液體的電阻變化,小孔能通過(guò)一個(gè)細(xì)胞,當(dāng)一個(gè)細(xì)胞通過(guò)這個(gè)小孔時(shí),電阻明顯增加,形成一個(gè)脈沖,自動(dòng)記錄在電子記錄裝置上。該法測(cè)定結(jié)果較準(zhǔn)確,但它只識(shí)別顆粒大小,而不能區(qū)分是否為細(xì)菌。因此,要求菌懸液中不含任何碎片。DNA新病原篩查找哪家