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低成本國(guó)產(chǎn)產(chǎn)品同樣實(shí)現(xiàn)Simoa的高靈敏蛋白因子檢測(cè)功能

來源：發(fā)布時(shí)間：2025-01-10

Simoa（Single-molecule Array）技術(shù)是由美國(guó)Quanterix公司研發(fā)生產(chǎn)的一款超高靈敏度單分子蛋白質(zhì)檢測(cè)技術(shù)，采用經(jīng)典的雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（ELISA）實(shí)現(xiàn)極低含量的蛋白定量檢測(cè)。其關(guān)鍵技術(shù)在于將免疫復(fù)合物捕獲并密封在一個(gè)飛升級(jí)別的小孔中反應(yīng)，以實(shí)現(xiàn)單個(gè)分子的檢測(cè)，大幅提升檢測(cè)靈敏度，比傳統(tǒng)ELISA方法靈敏度高出1000倍，檢測(cè)下限達(dá)到fg/mL，實(shí)現(xiàn)了很低豐度蛋白的有效檢測(cè)和定量，為低豐度炎癥因子的實(shí)時(shí)監(jiān)控提供了技術(shù)支撐。

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA與傳統(tǒng)免疫試驗(yàn)主要區(qū)別在于能夠在飛升大小的孔中捕獲單個(gè)分子，允許單個(gè)磁珠信號(hào)的數(shù)字化讀取。用特異性抗體修飾的微珠捕獲靶標(biāo)生物標(biāo)志物，在生物標(biāo)志物濃度很少時(shí)，每個(gè)珠子能捕獲一個(gè)或零個(gè)靶蛋白質(zhì)分子，通過免疫反應(yīng)后形成免疫復(fù)合物，然后用能夠產(chǎn)生熒光產(chǎn)物的量子點(diǎn)報(bào)告信號(hào)。通過把單個(gè)珠子限定在飛升反應(yīng)室中，通過微阱芯片結(jié)構(gòu)“卡住”微珠，使得微珠陣列化排布的方式，使用熒光成像來檢測(cè)單個(gè)格子的熒光信號(hào)進(jìn)行更后定量。這種一個(gè)陣列化區(qū)域預(yù)埋一種特異性抗體修飾的微珠，一個(gè)通道內(nèi)可以設(shè)計(jì)多個(gè)這樣的陣列化區(qū)域，不同區(qū)域間預(yù)埋不同捕獲抗體的微珠。這種基于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的數(shù)字化單分子檢測(cè)方法（Digital ELISA）在幾十微升的樣品中檢測(cè)到少至約 10-20個(gè)量子點(diǎn)標(biāo)記的復(fù)合物。

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA超敏功能：芯棄疾.數(shù)字ELISA，與Simoa同樣的檢測(cè)方案，將檢測(cè)結(jié)果二維化；

使用成像方式，可精確量檢測(cè)區(qū)多少個(gè)微球載體上發(fā)生免疫反應(yīng)，具有陽性熒光信號(hào)，

理論可達(dá)fg級(jí)；

使用常規(guī)ELISA試劑，測(cè)試IL-6等演示指標(biāo)，也可輕松達(dá)到亞pg級(jí)（0.2-0.5pg/mL)

數(shù)字 ELISA 試劑盒的優(yōu)點(diǎn)

節(jié)省時(shí)間 - 從樣品到結(jié)果只需30分鐘

節(jié)省樣本 - 只需低至10μL的樣品體積

多重檢測(cè) - 同時(shí)檢測(cè)10種生物靶標(biāo)

高靈敏度 - 精確定量下限低至0.2pg/mL

高通量- 可選擇4，8，16通道芯片同時(shí)檢測(cè)

操作簡(jiǎn)便 - 全自動(dòng)化儀器加樣清洗，或者選擇人工加樣清洗

芯棄疾JX-8B與Luminex，MSD，Simoa，傳統(tǒng)ELISA不同檢測(cè)蛋白技術(shù)比較，在靈敏度，檢測(cè)時(shí)間，檢測(cè)成本上更顯優(yōu)勢(shì)。

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA與Simoa 工作流程步驟的比較表。

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA試劑盒的5個(gè)步驟	Simoa需 6 個(gè)步驟
1.樣本和標(biāo)記抗體的量子點(diǎn)混合孵育5-10min	1.利用表面標(biāo)記有捕獲抗體的磁珠捕獲樣品中的抗原
2.全自動(dòng)化加樣或者移液槍加樣	2.使用biotin標(biāo)記的檢測(cè)抗體對(duì)被捕獲的抗原進(jìn)行標(biāo)記
3.孵育5-10min	3.加入鏈霉親和素-半乳糖苷酶復(fù)合物，與檢測(cè)抗體上的biotin結(jié)合
4.清洗10min	4. 將反應(yīng)洗凈后的磁珠與底物混合，加載到含有微孔陣列的檢測(cè)芯片中，利用磁場(chǎng)使磁珠落入與其尺寸完全匹配的微孔中（3μm左右），加入油相，使得微孔之間物理隔離
5.拍照計(jì)數(shù)	5.含有半乳糖苷酶的微孔由于酶分子催化底物產(chǎn)生熒光產(chǎn)物
	6.對(duì)微孔陣列進(jìn)行熒光成像，通過對(duì)發(fā)出熒光信號(hào)的微孔個(gè)數(shù)對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線來實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。

芯棄疾JX-8B和Simoa主要參數(shù)對(duì)比。

比較項(xiàng)目	芯棄疾JX-8B	Simoa
比較低檢測(cè)下限	0.2 pg/mL	0.002 pg/mL
耗時(shí)	0.5 h	1-1.5 h
所需樣品體積	10 μL	1-100 μL
理論重?cái)?shù)	10	10
線性范圍	4 log	2～4 log
設(shè)備耗材成本	低(包括全自動(dòng)加樣儀+熒光掃描儀)	超高

Simoa 可檢測(cè)非常低濃度的分析物，產(chǎn)品開發(fā)較成熟，但是檢測(cè)操作流程過于繁瑣復(fù)雜，單次檢測(cè)耗時(shí)長(zhǎng)達(dá)1h以上，使用的盤式微流控芯片加工精度高，生產(chǎn)成本高昂。

芯棄疾JX-8B檢測(cè)成本降低到Simoa的十分之一，檢測(cè)時(shí)間縮短到0.5h，提高檢測(cè)的效率，靈敏度達(dá)到亞飛克級(jí)別，滿足大多數(shù)的項(xiàng)目檢測(cè)要求。

高質(zhì)量數(shù)字 ELISA 試劑盒可幫助您穩(wěn)定、可靠、快速地檢測(cè)10種特異性靶標(biāo)蛋白。4，8，16通道數(shù)字ELISA 試劑盒可供選擇，包括完整組分的即用型SA-Biotin試劑盒，可自行優(yōu)化檢測(cè)方法的整套試劑，以及試劑技術(shù)支持，可選擇購(gòu)買自動(dòng)加樣設(shè)備或手動(dòng)加樣，為您的研究項(xiàng)目提供靈活性和便利性。