芯棄疾JX-8B:國產(chǎn)替代Luminex的多重檢測功能!!
? Luminex檢測方法?是一種基于微球的高通量檢測技術,主要用于細胞因子、趨化因子、轉錄因子和生長因子等多種蛋白的定量檢測。其**原理是將不同顏色的熒光編碼微球用于區(qū)分和識別不同的檢測物,結合特異性抗體或核酸探針,通過激光檢測熒光信號強度來實現(xiàn)定量分析。Luminex技術**引人注目的優(yōu)勢之一就是其多重檢測能力,可以同時檢測100種以上的分析物。但是檢測超過30重的目標物,對原料和反應體系的要求較高。Luminex的儀器操作較為半手動,相對于全自動的化學發(fā)光儀器,其手動操作可能限制了使用便捷性和效率。Luminex的高技術和高精度要求可能導致其設備和維護成本較高,所以檢測成本也同步提高。
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA:使用微流控芯片方式實現(xiàn)多重檢測!單個樣本加入到單個芯片孔,可同時測試2-6個檢測項目;
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA:與傳統(tǒng)免疫試驗主要區(qū)別在于能夠在飛升大小的孔中捕獲單個分子,允許單個磁珠信號的數(shù)字化讀取。用特異性抗體修飾的微珠捕獲靶標生物標志物,在生物標志物濃度很少時,每個珠子能捕獲一個或零個靶蛋白質分子,通過免疫反應后形成免疫復合物,然后用能夠產(chǎn)生熒光產(chǎn)物的量子點報告信號。通過把單個珠子限定在飛升反應室中,通過微阱芯片結構“卡住”微珠,使得微珠陣列化排布的方式,使用熒光成像來檢測單個格子的熒光信號進行***定量。這種一個陣列化區(qū)域預埋一種特異性抗體修飾的微珠,一個通道內(nèi)可以設計多個這樣的陣列化區(qū)域,不同區(qū)域間預埋不同捕獲抗體的微珠。這種基于酶聯(lián)免疫吸附試驗的數(shù)字化單分子檢測方法(Digital ELISA)在幾十微升的樣品中檢測到少至約 10-20個量子點標記的復合物。
芯棄疾JX-8B數(shù)字 ELISA 試劑盒的優(yōu)點
節(jié)省時間 - 從樣品到結果只需30分鐘
節(jié)省樣本 - 只需低至10μL的樣品體積
多重檢測 - 同時檢測10種生物靶標
高靈敏度 - 精確定量下限低至0.2pg/mL
高通量- 可選擇4,8,16通道芯片同時檢測
操作簡便 - 全自動化儀器加樣清洗,或者選擇人工加樣清洗
芯棄疾JX-8B與Luminex,MSD,Simoa,傳統(tǒng)ELISA不同檢測蛋白技術比較,在靈敏度,檢測時間,檢測成本上更顯優(yōu)勢。
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA與Luminex工作流程步驟的比較表。
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA試劑盒的5個步驟 |
Luminex需 5 個步驟 |
1.樣本和標記抗體的量子點混合孵育5-10min |
1.將針對不同檢測物的編碼微球混合,加入待測樣本 |
2.全自動化加樣或者移液槍加樣 |
2.孵育 |
3.孵育5-10min |
3.洗滌去除未結合的物質 |
4.清洗10min |
4.加入生物素化的分析物特異性抗體形成夾心復合物,然后加入鏈霉親和素-藻紅蛋白(PE)共軛物完成組裝 |
5.拍照計數(shù) |
5.儀器通過紅綠激光分別識別微球的編碼和檢測微球上報告分子的熒光強度。由相應的分析軟件進行判讀,得出定量結果。 |
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA與Luminex主要參數(shù)對比。
比較項目 |
芯棄疾JX-8B |
Luminex |
檢測下限 |
0.2 pg/mL |
0.1 pg/mL |
耗時 |
0.5 h |
4-6 h |
所需樣品體積 |
10 μL |
25-50 μL |
理論重數(shù) |
10 |
100-500 |
線性范圍 |
4 log |
3~5 log |
設備耗材成本 |
低 |
高 |
Luminex適合大批量樣本中多個特定因子的定量檢測。但是,前處理比ELISA還復雜,大量的移液和磁力清洗工作容易導致批內(nèi)差異較高。每次實驗前需要校準設備,耗時長達6h。另外Luminex屬于流式設備,需要鞘液,容易堵塞檢測通道,后期維護成本高。
芯棄疾JX-8B從樣本加樣到熒光掃描出結果*需要0.5h,較Luminex**縮短了5h,對于同時只檢測小于10種的目標物的效率大幅提高,靈敏度和Luminex相當,且無需額外的維護成本。
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