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泉州沙門氏+顯色培養(yǎng)基科研應用

來源: 發(fā)布時間:2024-03-30

沙門氏菌顯色培養(yǎng)基的制備過程相對簡單。首先,將適量的培養(yǎng)基粉末溶解在適量的蒸催水中,并加熱攪拌直至完全溶解。然后,將溶液滅菌并冷卻至適宜的溫度,通常為45-50攝氏度。接下來,將已知數(shù)量的沙門氏菌接種到培養(yǎng)基中,并均勻涂布于培養(yǎng)基表面。將含有培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿倒置放置于恒溫培養(yǎng)箱中,以促進細菌的生長。在培養(yǎng)的過程中,如果樣品中存在沙門氏菌,它們將會利用培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)進行生長,并產(chǎn)生特殊的顏色反應。一般情況下經(jīng)過適當?shù)呐囵B(yǎng)時間(通常為18-24小時),如果培養(yǎng)基變成紅色或呈現(xiàn)紅色斑點,就可以初步判斷出樣品中存在沙門氏菌。需要注意的是,它只能作為初步的篩查方法,不能作為鑒定手段。對于培養(yǎng)基呈紅色反應的樣品,需要進行進一步的確認測試,如生化試驗和分子生物學技術,以確定是否確實存在沙門氏菌??傊?,沙門氏菌顯色培養(yǎng)基是一種用于檢測和鑒定沙門氏菌的重要工具,它通過特定的成分和化學反應,提供了一種快速簡便的方法來初步判斷食品樣品中是否存在沙門氏菌。然而,在使用過程中仍需結(jié)合其他鑒定方法來進行綜合分析,以確保檢測結(jié)果的準確性和可靠性。沙門氏顯色培養(yǎng)基的制備方法比較簡單,由肉湯、膽鹽、蔗糖等組成。泉州沙門氏+顯色培養(yǎng)基科研應用

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沙門氏顯色培養(yǎng)基的保存方法:避免冷凍:沙門氏顯色培養(yǎng)基不宜冷凍保存,因為冷凍會破壞培養(yǎng)基中的成分,影響培養(yǎng)基的質(zhì)量。如果需要長期保存,可以將培養(yǎng)基制成小包裝,密封保存在冰箱中。避免污染:在使用沙門氏顯色培養(yǎng)基時,應注意避免污染。在開封前,應先用消毒液擦拭容器表面,以殺滅表面的細菌。在使用過程中,應注意避免接觸其他物品,以免污染培養(yǎng)基。注意使用期限:沙門氏顯色培養(yǎng)基的使用期限一般為6個月至1年,過期后應及時淘汰。在使用前,應檢查培養(yǎng)基的外觀和性狀,如有異常應及時淘汰。鹽城沙門氏顯色培養(yǎng)基實驗應用沙門氏顯色培養(yǎng)基成功指標是觀察到沙門氏菌在培養(yǎng)基上生長和顯色。

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沙門氏菌屬(Salmonella)是一群寄生在人類和動物腸道中,生化反應和抗原結(jié)構(gòu)相關的革蘭氏陰性桿菌。沙門氏菌屬細菌的血清型現(xiàn)已達2500多種。根據(jù)DNA同源性,分兩個種,即腸道沙門氏菌(S.enterica)和邦戈沙門氏菌(S.bongori)。腸道沙門氏菌又分6個亞種,能染上人類的沙門氏菌血清型,約1400多種,主要在首先亞種中,即腸道沙門氏菌腸道亞種(S. enterica subsp. Enterica)。門氏菌顯色培養(yǎng)基使用說明書:組分:瓊脂 15.0g/L 蛋白胨和酵母粉 7.0 g/L 色素和選擇性物質(zhì) 12.9 g/L。pH值7.6±0.2。保存 該成品平板在室溫可保存一天或在冰箱內(nèi)貯存2周(2℃8℃,避光)。接種:劃線或涂布接種(冰箱內(nèi)保存的平板使用前應恢復至室溫),在36。

沙門氏菌檢測過程進行分析梳理之生化鑒定:確定可疑菌后,需要進行生化鑒定,若一個一個生化管去做,過程十分的繁瑣。根據(jù)國標“5.4.3”規(guī)定,可疑采用生化鑒定試劑盒或全自動生化鑒定系統(tǒng)進行檢測。沙門氏菌檢測過程進行分析梳理之血清學鑒定:血清學鑒定是十分必須的步驟,可判定沙門氏菌是否被O多價抗原和H多價抗原血清凝集。采用的血清可以是進口的或者國內(nèi)生產(chǎn)的,但是國內(nèi)血清的凝集性能有時不太好,而進口血清又太貴。所以只是判定O多價和H多價凝集的,用國產(chǎn)的就可以。沙門氏菌顯色培養(yǎng)基的主要成分包括營養(yǎng)物質(zhì)、熒光素等。

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沙門氏菌檢測過程進行分析梳理之血清學鑒定:(1)以無菌干凈的玻片為載體,滴一滴生理鹽水,接種管從營養(yǎng)瓊脂平面挑取少量菌體,在生理鹽水中涂開,緩緩涂,觀察凝集情況,排除自凝。(2)滴一滴O多價血清于玻片上,重復上述步驟,判斷凝集情況,一般情況都會凝集的。除非是有Vi抗原存在時(如鼠傷寒沙門氏菌),會阻止O血清凝集,可挑取菌體至1 mL生理鹽水中制成菌懸液,于酒精燈煮沸在檢查。(3)滴一滴H多價血清于玻片上,重復上述(1)中步驟,判斷凝集情況。若凝集效果不明顯,需要用0.6%半固體瓊脂平板誘導,帶菌落蔓延生長是,挑取邊緣部分進行檢查。傳統(tǒng)檢測方法會漏檢乳糖陽性沙門氏菌,無法滿足要求。廣州沙門氏菌顯色培養(yǎng)基作用

通過特定的顏色變化顯示出沙門氏菌的存在,使得檢測過程更加快速和精確。泉州沙門氏+顯色培養(yǎng)基科研應用

沙門氏菌檢測過程進行分析梳理:選擇性增菌:將培養(yǎng)后BPW搖勻,取1mL轉(zhuǎn)種于10mL 四硫磺酸鈉煌綠增菌液(TTB),于42℃±1℃培養(yǎng)18h-24h,同時再取1mL轉(zhuǎn)種于亞硒酸鹽胱氨酸增菌液(SC),于36℃±1℃培養(yǎng)18h-24h。TTB增菌液的配制有兩個注意事項,一是碳酸鈣是TTB的正常成分,作用是中和吸收有毒性的代謝物質(zhì)(主要是培養(yǎng)基酸堿度的變化對菌生長的影響)。但是碳酸鈣不溶于水,所以TTB有沉淀是正常的,分裝時一定搖勻分裝。二是四硫磺酸鈉是TTB抑制性的中心成分,培養(yǎng)基也以此命名,但成分表中并沒有四硫磺酸鈉,它是在碘液煌綠加入后,硫代硫酸鈉經(jīng)碘氧化生成的。四硫磺酸鈉對大腸菌群有抑制作用,但不穩(wěn)定,所以碘液和煌綠必須在臨用前加入。SC培養(yǎng)后,若菌生長,培養(yǎng)液會變紅,但是變紅不意味著沙門氏菌的存在,還需要往下進行。泉州沙門氏+顯色培養(yǎng)基科研應用