可以對本發(fā)明進行各種變化和修飾。本發(fā)明對試驗中所使用到的材料以及試驗方法進行一般性和/或具體的描述。雖然為實現(xiàn)本發(fā)明目的所使用的許多材料和操作方法是本領(lǐng)域公知的,但是本發(fā)明仍然在此作盡可能詳細描述。下述實施例中所涉及的儀器、試劑、材料等,若無特別說明,均為現(xiàn)有技術(shù)中已有的常規(guī)儀器、試劑、材料等,可通過正規(guī)商業(yè)途徑獲得。下述實施例中所涉及的實驗方法,檢測方法等,若無特別說明,均為現(xiàn)有技術(shù)中已有的常規(guī)實驗方法,檢測方法等。實施例1:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液50ml加入規(guī)格為10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥,批號:aa1a8029a)中,配制成2mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。實施例2:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液(齊魯制藥,批號:aa1a8029a)中,配制成3mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。驗性動物模型是指研究者通過使用物理的、化學(xué)的和生物的致病因素作用于動物。南通C57小鼠疾病動物模型建模
可復(fù)制臨床上一些疾病不常見,如放射病、毒氣中毒、烈性傳染病、外傷等。還有一些如遺傳性、免疫性、代謝性和內(nèi)分泌、血液等疾病,發(fā)展緩慢、潛伏期長,病程也長,可能幾年或幾十年,在人體很難進行3世代以上的連續(xù)觀察。人們可有意選用動物種群中發(fā)病率高的動物,通過不同手段復(fù)制出各種模型,在人為設(shè)計的實驗條件下反復(fù)觀察和研究,甚至可進行幾十世代的觀察,同時也避免了人體實驗造成的傷害。折疊意義2可按需要取樣動物模型作為人類疾病的"復(fù)制品",可按研究者的需要隨時采集各種樣品或分批處死動物收集標本,以了解疾病全過程,這是臨床難以辦到的。心血管疾病疾病動物模型建模廠家通過小鼠疾病模型的構(gòu)建有助于我們深入揭示潛在致病基因作用機制。
引起組織壞死,從而導(dǎo)致卵巢功能早衰。技術(shù)實現(xiàn)要素:針對上述現(xiàn)有技術(shù),本發(fā)明提供了一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法。本發(fā)明根據(jù)“順鉑可誘導(dǎo)卵巢細胞凋亡,引起組織壞死,從而導(dǎo)致卵巢功能早衰”這一原理,使用不同濃度及不同方法建立了化療性損傷卵巢早衰動物模型,并對比各種方法間的優(yōu)劣性,篩選出順鉑比較好的濃度及給藥時間,為篩選順鉑導(dǎo)致的卵巢早衰動物模型比較好劑量提供了一種操作簡單,成功率高,結(jié)果可靠的實驗方法。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的:一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法:將劑量為按體重一日2~3mg/kg的順鉑施用于大鼠,施用方式為腹腔注射,施用方法:連續(xù)施用7天,末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型?;颍簩┝繛榘大w重4~6mg/kg的順鉑施用于大鼠,施用方式為腹腔注射,施用方法:第1天、第8天施用;末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型。進一步地,可將順鉑溶于%氯化鈉溶液配置成順鉑注射液,然后注射。所述順鉑,可市場常規(guī)購買得到,比如齊魯制藥公司生產(chǎn)的順鉑。進一步地,注射期間每天稱量大鼠體重,注射后每周稱量2次;末次注射后15天,麻醉取血檢測***水平,取卵巢檢測對比卵巢重量。
急性肺損傷模型大鼠(右圖)與對照組大鼠(左圖)肺組織HE染色6.模型又名支氣管。支氣管是由多種細胞及細胞組分參與的慢性氣道炎癥,此種炎癥常伴隨引起氣道反應(yīng)性增高,導(dǎo)致反復(fù)發(fā)作的喘息、氣促、胸悶和/或咳嗽等癥狀,多在夜間和/或凌晨發(fā)生,此類癥狀常伴有而多變的氣流阻塞,可以自行或通過而逆轉(zhuǎn)。6.1小鼠模型建立SPF級Balb/c雌性小鼠,體重約20g。采用OVA致敏誘導(dǎo)建立模型。OVA致敏誘導(dǎo)的模型:分別于第1、8、15天腹腔注射OVA混懸液(含OVA1g/L,氫氧化鋁5g/L)0.2ml,實驗第21天起將小鼠置于霧化激發(fā)器內(nèi),給予2%OVA生理鹽水霧化激發(fā)找疾病動物模型建模,就找上海東寰。
人乳腺*裸鼠模型:1、實驗方法:**細胞移植法、**組織塊移植法。a.**細胞移植:**細胞在二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)至足夠數(shù)量。取對數(shù)生長期的**細胞,用0.25%胰酶消化,用不完全培養(yǎng)液配成濃度不低于1×107個/mL的細胞懸液,于小鼠乳腺脂肪墊注射0.2mL細胞懸液,注意每次注射前需混勻細胞懸液。b.**組織塊移植:**接種于動物長至1cm時,取新鮮的**組織塊,在不完全培養(yǎng)液中漂洗,切取生長良好、魚肉裝的瘤組織,將其剪切成約1.5mm直徑的小**塊。將動物接種部位消毒,剪一小口,將小**塊經(jīng)這一小口接種到小鼠乳腺脂肪墊,如切口較大需要縫合切口。歡迎致電咨詢疾病動物模型建模。崇明區(qū)大鼠疾病動物模型建模
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步驟i.將步驟h的吸附柱放入收集管,12000rpm離心2min。步驟j.吸附柱放到一個新的,在吸附柱膜**加入50~200μl滅菌水或者洗脫液,停留5min。(將無菌水或者洗脫液加熱到65℃能夠增加洗脫的得率)。步驟i.基因組dna定量,洗脫的基因組dna可以通過電泳鑒定。方法2:一種低成本基因組dna的粗提方法:步驟a.每只小鼠剪下一段尾巴(2-5mm),放入離心管中,加入100μl尾部消化緩沖液,注意不要剪尾太長;步驟b.將離心管及其內(nèi)容物于56℃孵育過夜;步驟c.過夜后將離心管于98℃孵育13min,使蛋白酶k失活;步驟d.在微型離心機以**大轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)15min,上清直接用于pcr體系(每50μlpcr體系加入上清2μl)。尾消化緩沖液成分:50mmkcl10mmtris-hcl()%tritonx-100(b)長鏈pcr反應(yīng):長鏈引物:pcrprimers1(℃):擴增片段:5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):擴增片段:3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’pirb基因敲除型有上述兩條擴增片段,野生型等位基因沒有擴增產(chǎn)物。南通C57小鼠疾病動物模型建模