建立一種理想的腰椎間盤突出的動物模型對本病的機制研究和臨床防治具有重要意義。現(xiàn)有模型對腰椎間盤突出癥的模擬均存在明顯不足,或與臨床實際病變部位有一定差距,如慢性坐骨神經(jīng)結(jié)扎模型;或操作難度大,對動物損傷重,如自體髓核移植模型,選擇性神經(jīng)根結(jié)扎模型。因此,急需一種新的操作簡單,重復(fù)率高,穩(wěn)定且能準(zhǔn)確模擬腰椎間盤突出后癥狀的動物模型。技術(shù)實現(xiàn)要素:為了建立一種操作簡單,穩(wěn)定好且能準(zhǔn)確模擬腰椎間盤突出后癥狀的動物模型,本發(fā)明提供了一種大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型的制備方法。其包括以下步驟:步驟一、麻醉大鼠;步驟二、于大鼠腰4到骶1水平左側(cè)或右側(cè)作縱行切口,切開皮膚,鈍性分離椎旁肌,暴露腰4椎間孔和腰5椎間孔;步驟三、將壓迫元件插入到左側(cè)或右側(cè)腰4椎間孔及腰5椎間孔中,得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。其中,步驟一具體為:腹腔注射1%戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉大鼠后,將大鼠背部剃毛,碘伏消毒背部皮膚,俯臥位固定于動物手術(shù)臺上,鋪無菌巾。在一個具體實施方式中,壓迫元件為l型棒;步驟三具體為:將2根l型棒的***端分別插入到左側(cè)或右側(cè)腰4椎間孔及腰5椎間孔中,l型棒的第二端置于腰4椎間孔及腰5椎間孔外。如何定義好的小鼠疾病模型?鎮(zhèn)江疾病動物模型建模哪家好
球囊拉傷致高脂血癥動脈硬化兔模型,實驗動物種屬:新西蘭兔,實驗動物環(huán)境:SPF級 1、實驗方法:用球囊拉傷誘導(dǎo)法。采用3%戊巴比妥鈉耳緣靜脈注射麻醉,經(jīng)右股淺動脈,將3.5F球囊擴張導(dǎo)管插至腹主動脈20cm,球囊充液膨脹至2個大氣壓緩慢拉出,反復(fù)3次。球囊拉傷手術(shù)后,動物喂以高脂飼料,連續(xù)9周,每天給料兩次,自由飲水。實驗結(jié)束后取腹主動脈斑塊進行組織病理學(xué)檢查。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):腹主動脈斑塊病理鏡下可見腹主***程度的改變。奉賢區(qū)阿爾茲海默癥疾病動物模型建模什么是疾病動物模型建模?
引起組織壞死,從而導(dǎo)致卵巢功能早衰。技術(shù)實現(xiàn)要素:針對上述現(xiàn)有技術(shù),本發(fā)明提供了一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法。本發(fā)明根據(jù)“順鉑可誘導(dǎo)卵巢細(xì)胞凋亡,引起組織壞死,從而導(dǎo)致卵巢功能早衰”這一原理,使用不同濃度及不同方法建立了化療性損傷卵巢早衰動物模型,并對比各種方法間的優(yōu)劣性,篩選出順鉑比較好的濃度及給藥時間,為篩選順鉑導(dǎo)致的卵巢早衰動物模型比較好劑量提供了一種操作簡單,成功率高,結(jié)果可靠的實驗方法。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的:一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法:將劑量為按體重一日2~3mg/kg的順鉑施用于大鼠,施用方式為腹腔注射,施用方法:連續(xù)施用7天,末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型?;颍簩┝繛榘大w重4~6mg/kg的順鉑施用于大鼠,施用方式為腹腔注射,施用方法:第1天、第8天施用;末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型。進一步地,可將順鉑溶于%氯化鈉溶液配置成順鉑注射液,然后注射。所述順鉑,可市場常規(guī)購買得到,比如齊魯制藥公司生產(chǎn)的順鉑。進一步地,注射期間每天稱量大鼠體重,注射后每周稱量2次;末次注射后15天,麻醉取血檢測***水平,取卵巢檢測對比卵巢重量。
得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。進一步地,l型棒的直徑為,***端長3-5mm,第二端長1-3mm。具體地,根據(jù)大鼠體重選擇l型棒的直徑大?。寒?dāng)大鼠體重在200g到不足220g范圍時,采用直徑為;當(dāng)大鼠體重在220g到不足250g范圍時,采用直徑為;當(dāng)大鼠體重在250g到不足300g范圍時,采用直徑為;當(dāng)大鼠體重在300g到350g范圍時,采用直徑為。在另一個具體實施方式中,壓迫元件為u型棒;步驟三具體為:將u型棒的***端和第二端分別插入到左側(cè)或右側(cè)腰4椎間孔及腰5椎間孔中,得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。進一步地,壓迫元件采用不受磁場干擾、置入體內(nèi)不會對神經(jīng)造成化學(xué)刺激以及具有一定可塑性的材料制備而成。在一個具體實施方式中,壓迫元件采用黃銅和鋅的混合物制備而成。具體地,混合物為h62黃銅,即含銅量為%~%,余量為鋅含量的黃銅。而銅、鋅皆屬于非鐵磁性物質(zhì)。在另一個具體實施方式中,壓迫元件采用聚乳酸(polylactic,pla)制備而成。pla是一種無毒無刺激的合成高分子材料,其原料是乳酸,不含任何金屬。h62黃銅棒或pla棒在體內(nèi),即不會受磁療、電療引起的磁場、電場干擾,也不會對磁療、電療儀器及磁共振儀器產(chǎn)生不良影響。小鼠疾病建模請找上海東寰。
其中可以看出手術(shù)側(cè)后爪的縮足閾值較手術(shù)前及對側(cè)后爪有***降低,且標(biāo)準(zhǔn)誤區(qū)間非常小。圖4是表1的數(shù)據(jù)通過曲線圖的方式展現(xiàn)。結(jié)果顯示:大鼠在術(shù)后***天即出現(xiàn)手術(shù)側(cè)后爪敏感,施加輕微的重量(4g左右)都會引起縮足表現(xiàn),這說明其痛閾明顯降低,對輕微的刺激均呈現(xiàn)抬腳,舔舐后足等痛覺過敏表現(xiàn)。這種表現(xiàn)維持至術(shù)后至少28天。而對側(cè)后爪在術(shù)前和術(shù)后縮足閾值變化不大,基本保持在20-25g。實施例3、模型的應(yīng)用采用實施例1中描述的方法對兩組大鼠均進行了造模,l型棒的材料選擇的是h62黃銅或聚乳酸等不受磁場干擾、置入體內(nèi)不會對神經(jīng)造成化學(xué)刺激以及具有一定可塑性的材料。在造模后第七天應(yīng)用重復(fù)經(jīng)顱磁刺激(rtms)***大鼠,其中一組接受了真的磁刺激,為磁刺激組;另一組接受了假的磁刺激,為假刺激組。結(jié)果顯示,磁刺激組的大鼠縮足閾值較假刺激組明顯提高,如圖5所示。這表明磁刺激緩解了神經(jīng)壓迫造成的疼痛,該模型可以用于磁刺激***的研究。以上詳細(xì)描述了本發(fā)明的較佳具體實施例。應(yīng)當(dāng)理解,本領(lǐng)域的普通技術(shù)無需創(chuàng)造性勞動就可以根據(jù)本發(fā)明的構(gòu)思作出諸多修改和變化。因此。廣泛應(yīng)用于藥效評價、轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)等醫(yī)學(xué)前沿領(lǐng)域。崇明區(qū)裸鼠疾病動物模型建模
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步驟i.將步驟h的吸附柱放入收集管,12000rpm離心2min。步驟j.吸附柱放到一個新的,在吸附柱膜**加入50~200μl滅菌水或者洗脫液,停留5min。(將無菌水或者洗脫液加熱到65℃能夠增加洗脫的得率)。步驟i.基因組dna定量,洗脫的基因組dna可以通過電泳鑒定。方法2:一種低成本基因組dna的粗提方法:步驟a.每只小鼠剪下一段尾巴(2-5mm),放入離心管中,加入100μl尾部消化緩沖液,注意不要剪尾太長;步驟b.將離心管及其內(nèi)容物于56℃孵育過夜;步驟c.過夜后將離心管于98℃孵育13min,使蛋白酶k失活;步驟d.在微型離心機以**大轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)15min,上清直接用于pcr體系(每50μlpcr體系加入上清2μl)。尾消化緩沖液成分:50mmkcl10mmtris-hcl()%tritonx-100(b)長鏈pcr反應(yīng):長鏈引物:pcrprimers1(℃):擴增片段:5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):擴增片段:3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’pirb基因敲除型有上述兩條擴增片段,野生型等位基因沒有擴增產(chǎn)物。鎮(zhèn)江疾病動物模型建模哪家好
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