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樂清骨橋素(OPN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

來源: 發(fā)布時間:2023-07-17

液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機(jī)時,倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。待檢樣品要澄清,否則會影響結(jié)果。溫浴時間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。應(yīng)盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進(jìn)行確證。Elisa試劑盒的優(yōu)化需要根據(jù)實(shí)際情況和需求進(jìn)行調(diào)整,以適應(yīng)不同的檢測需求。樂清骨橋素(OPN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

樂清骨橋素(OPN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法),Elisa試劑盒

試劑盒用于盛放檢測化學(xué)成分、藥物殘留、病毒種類等化學(xué)試劑的盒子。一般醫(yī)院、制藥企業(yè)使用。完整的ELISA試劑盒包含以下各組分:(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);(3)酶的底物;(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測定中);(5)結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;(6)洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;(7)酶反應(yīng)終止液,常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的更終體積而異,在板式ELISA中一般采用3mol/L。樂清血小板反應(yīng)蛋白2(THBS2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)69084 Elisa試劑盒的質(zhì)量控制需要根據(jù)實(shí)際需求進(jìn)行選擇,如正性對照、負(fù)性對照等。

樂清骨橋素(OPN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法),Elisa試劑盒

免疫吸附劑已包被抗原或抗體的固相載體在低溫(2~8℃)干燥的條件下一般可保存6個月。對于有些不完整的試盒,單供應(yīng)包被用抗原或抗體,檢測人員需自行報備,固相載體在elisa試劑盒測定過程中作為吸附劑和容器,不參與化學(xué)反應(yīng)??勺鱡lisa試劑盒中載體的材料很多,較為常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)的性能,抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后仍保留原來的免疫學(xué)活性,加之它的價格低廉,所以被普遍采用。聚苯乙烯為塑料,可制成各種形式。ELISA測定過程中作為吸附劑和容器,不參與化學(xué)反應(yīng)。

 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時。蛋白質(zhì)包被的很適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值比較大而蛋白量很少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。Elisa試劑盒中各種元素之間的配比需要嚴(yán)格控制,才能確保試劑盒的精確度和可靠性。

樂清骨橋素(OPN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法),Elisa試劑盒

游離四碘甲狀腺原氨酸試劑盒,該試劑由標(biāo)記試劑和固相試劑組成。標(biāo)記試劑存在于有EDTA,蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑和疊氮化鈉的巴比妥鈉緩沖劑中帶吖啶酯標(biāo)記的T4。固相試劑存在于有EDTA,蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑和疊氮化鈉的巴比妥鈉(二乙基丙二酰脲鈉)緩沖劑中與順磁粒子共價結(jié)合的多克隆兔T4抗體。產(chǎn)品性能結(jié)構(gòu)及組成該試劑由標(biāo)記試劑和固相試劑組成。標(biāo)記試劑存在于有EDTA,蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑和疊氮化鈉的巴比妥鈉緩沖劑中帶吖啶酯標(biāo)記的T4。固相試劑存在于有EDTA,蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑和疊氮化鈉的巴比妥鈉(二乙基丙二酰脲鈉)緩沖劑中與順磁粒子共價結(jié)合的多克隆兔T4抗體。Elisa試劑盒中的酶標(biāo)板組裝需要確保穩(wěn)定性和可重復(fù)性,以實(shí)現(xiàn)精確的檢測結(jié)果。諸暨白介素8(IL8)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

嚴(yán)格按照規(guī)定的時間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。樂清骨橋素(OPN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。然而,影響Elisa試驗(yàn)結(jié)果的因素很多,故加強(qiáng)各個環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。樂清骨橋素(OPN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

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