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泰興C反應(yīng)蛋白(CRP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-05-20

檢測(cè)原理主要是通過(guò)利用在96孔板上包被人壞死因子α的單克隆抗體,將標(biāo)準(zhǔn)品和樣本添加到孔中,使壞死因子α與固定化抗體結(jié)合,然后加入辣根過(guò)氧化物酶結(jié)合的小鼠抗人壞死因子α的單克隆抗體,產(chǎn)生抗原-抗體-抗原的“三明治”結(jié)構(gòu)。再次清洗并加入TMB基質(zhì)溶液,其產(chǎn)生的顏色深淺與樣品中人壞死因子α的含量成線性關(guān)系。結(jié)束酶反應(yīng),添加停止溶液,并在450nm處讀取微孔吸光度,只需按照試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的規(guī)定操作流程進(jìn)行檢測(cè)即可得到準(zhǔn)確的測(cè)量結(jié)果,可很大程度的提高檢測(cè)效率和結(jié)果的可靠性。Elisa試劑盒的質(zhì)量和穩(wěn)定性對(duì)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性至關(guān)重要。泰興C反應(yīng)蛋白(CRP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

泰興C反應(yīng)蛋白(CRP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法),Elisa試劑盒

人圍脂滴蛋白1(PLIN1)ELISA試劑盒標(biāo)本要求:1.血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜,然后1000×g離心20分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)該避免反復(fù)凍融。3.組織勻漿:用預(yù)冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。臨海髓細(xì)胞觸發(fā)受體1(TREM1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)免疫組化試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果重現(xiàn)性好。

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安全性:避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育,如果其中存在HEVIgM抗體,這些抗體就會(huì)與HEV的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過(guò)氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結(jié)合物就會(huì)與一次孵育結(jié)合上的HEVIgM抗體相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時(shí)會(huì)發(fā)生酶-底物反應(yīng),只有那些含有HEVIgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會(huì)發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng),并且在波長(zhǎng):450nm處測(cè)量O.D.值,按照本HEVIgM抗體elisa試劑盒的測(cè)試標(biāo)準(zhǔn),O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽(yáng)性。Elisa試劑盒的質(zhì)量控制需要根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行選擇,如全樣品,陽(yáng)性和陰性對(duì)照等。

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elisa試劑盒操作所需主要設(shè)備,包被緩沖液(PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液)洗滌緩沖液,稀釋液,終止液,底物緩沖液,TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液,ABTS使用液,抗原、抗體和酶標(biāo)記抗體。正常人血清和陽(yáng)性對(duì)照血清。聚苯乙烯塑料板(簡(jiǎn)稱酶標(biāo)板)40孔或96孔,elisa試劑盒檢測(cè)儀,50μl及100μl加樣器,塑料滴頭,小毛巾,洗滌瓶。小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。4℃冰箱,37℃孵育箱。試驗(yàn)原理,試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(elisa試劑盒).已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)??梢韵葘⑸锼貥?biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。Elisa試劑盒的使用需要注意操作環(huán)境的清潔衛(wèi)生和保持安全,以確保實(shí)驗(yàn)操作的可靠性。泰興C反應(yīng)蛋白(CRP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Elisa試劑盒的優(yōu)點(diǎn)包括操作簡(jiǎn)便、重現(xiàn)性好、靈敏度高、可視化等。泰興C反應(yīng)蛋白(CRP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

elisa試劑盒是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)后發(fā)展起來(lái)的一種免疫酶技術(shù)。elisa試劑盒是一種特異性高,回收率好的實(shí)驗(yàn)診斷方法,普遍應(yīng)用于生命科學(xué)等科研研究領(lǐng)域,也是現(xiàn)在許多科研實(shí)驗(yàn)常用檢測(cè)方法。elisa的檢測(cè)基礎(chǔ)是通過(guò)特異性反應(yīng)與酶底物發(fā)生顯色反應(yīng),從而在血漿、血清或者送來(lái)檢測(cè)的液體樣品中檢測(cè)出所需要檢測(cè)的物質(zhì)成分以及含量檢測(cè)。elisa試劑盒在我們國(guó)內(nèi)有很多不同的叫法名稱,如elisa檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶免試劑盒等。泰興C反應(yīng)蛋白(CRP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

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