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糖尿病糖尿病細胞模型強大且永生化

來源: 發(fā)布時間:2024-09-09

Human Cell Design 成立于 2001 年,總部位于法國,專注于人源細胞模型開發(fā),以助力科研和生物醫(yī)藥企業(yè)的發(fā)展。其中可作為糖尿病細胞模型的 EndoC-BH5、EndoC-BH3、EndoC-BH1 等人源胰島 B 細胞為其優(yōu)勢產(chǎn)品,這些人源胰島 B 細胞誘導產(chǎn)生的胰島素接近于天然胰島細胞分泌的胰島素量。人源胰島 B 細胞模型構(gòu)建技術(shù)性文章早期發(fā)表于 2011 年,相關(guān)文章總引用量達到 600+,人源胰島 B 細胞模型已經(jīng)被全球 200 多家生物醫(yī)藥和生命科研機構(gòu)作為糖尿病細胞模型使用。糖尿病細胞模型如何進行病毒載體構(gòu)建?糖尿病糖尿病細胞模型強大且永生化

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HumanCellDesign構(gòu)建了EndoC-BH1、EndoC-BH3、EndoC-βH5、GLTxEndoC-βH5、HLA-A2EndoC-βH5等一系列的胰島B細胞模型。通過多輪次優(yōu)化改良,獲得的功能胰腺B細胞,無限接近天然人源胰島B細胞,其胰島素分泌功能與天然細胞類似,基于PDX1/NKX6.1關(guān)鍵基因驗證的細胞均一性達到90%以上,在2.8mM和11mM葡萄糖劑量下表現(xiàn)出10倍的胰島素分泌反應,對GLP-1R激動劑、Exendin-4刺激產(chǎn)生明顯增強,且可實現(xiàn)批量化生成,實現(xiàn)穩(wěn)定供應。此外,HumanCellDesign開發(fā)系列人源胰島B細胞模型EndoC-BH5的同時,開發(fā)了配套的細胞培養(yǎng)試劑,可用于細胞培養(yǎng)和后續(xù)相關(guān)實驗。陜西糖尿病細胞模型強大且永生化糖尿病細胞模型人源胰島B細胞已經(jīng)進行了功能性驗證。

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這些小鼠在 2 至 3 個月內(nèi)出現(xiàn)低血糖,胰島素陽性細胞大量擴增。這種體內(nèi)擴增有助于維持大量增殖的胰島素細胞,并允許定義允許的培養(yǎng)條件,在這種條件下,可以在體外建立永生化細胞系。Human Cell Design(HCD)開發(fā)了一種用于在人類胎兒組織中使用靶向Zhong liu產(chǎn)生功能的人類β細胞系。在胰島素啟動子的控制下,用表達 SV40LT 的慢病毒載體轉(zhuǎn)導人類胎兒胰腺芽。Human Cell Design 開發(fā)了創(chuàng)新且安全的人類β細胞系生產(chǎn)方法。首先,將每個轉(zhuǎn)導的人類胎兒胰腺芽移植到 2 或 3 只 SCID 小鼠的腎被膜下,因為該部位是人類胰腺發(fā)育的允許部位。在 6 到 8 個月內(nèi),所有移植的小鼠都發(fā)生了原發(fā)性胰島素瘤,這導致它們的血糖水平下降。與其他胰腺移植相比,原發(fā)性胰島素瘤是高度血管化的。然后將原發(fā)性胰島素瘤中這些高度血管化的區(qū)域分離,用在大鼠胰島素啟動子控制下表達 hTERT 的慢病毒進行轉(zhuǎn)導,并移植到其他 SCID 小鼠中。

Humancelldesign構(gòu)建了EndoC-BH1,En-doC-BH3,EndoC-βH5,GLTxEndoC-βH5,HLA-A2EndoC-βH5等一系列的胰島B細胞模型。通過多輪次優(yōu)化改良,獲得的功能胰腺B細胞,無限接近天然人源胰島B細胞,其胰島素分泌功能與天然細胞類似,基于PDX1/NKX6.1關(guān)鍵基因驗證的細胞均一性達到90%以上,在2.8mMand11mM葡萄糖劑量下表現(xiàn)出10倍的胰島素分泌反應,對GLP-1R激動劑,Exendin4刺激產(chǎn)生明顯增強,且可實現(xiàn)批量化生成,實現(xiàn)穩(wěn)定供應。此外Humancelldesign開發(fā)系列人源胰島B細胞模型EndoC-BH5的同時,開發(fā)了配套的細胞培養(yǎng)試劑,可用于細胞培養(yǎng)和后續(xù)相關(guān)實驗。糖尿病細胞模型接近原代成人 B 細胞,是更好地了解人類 B 細胞生理學和開發(fā)糖尿病新療法的重要模型。

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Humancelldesign開發(fā)了創(chuàng)新且安全的人類β細胞系生產(chǎn)方法。首先,將每個轉(zhuǎn)導的人類胎兒胰腺芽移植到2或3只SCID小鼠的腎被膜下,因為該部位是人類胰腺發(fā)育的允許部位。在6到8個月內(nèi),所有移植的小鼠都發(fā)生了原發(fā)性胰島素瘤,這導致它們的血糖水平下降。與其他胰腺移植相比,原發(fā)性胰島素瘤是高度血管化的。然后將原發(fā)性胰島素瘤中這些高度血管化的區(qū)域分離,用在大鼠胰島素啟動子控制下表達hTERT的慢病毒進行轉(zhuǎn)導,并移植到其他SCID小鼠中。這些小鼠在2至3個月內(nèi)出現(xiàn)低血糖,胰島素陽性細胞大量擴增。這種體內(nèi)擴增有助于維持大量增殖的胰島素細胞,并允許定義允許的培養(yǎng)條件,在這種條件下,可以在體外建立永生化細胞系。糖尿病細胞模型可用于胰島B細胞的靶標識別和炎癥研究。糖尿病糖尿病細胞模型強大且永生化

法國Human cell design專注于糖尿病細胞模型研究,提供接近于天然胰島細胞的胰島細胞系。糖尿病糖尿病細胞模型強大且永生化

EndoC-βH5細胞是一種新型人類胰腺β細胞解決方案,可用于開發(fā)人類糖尿病模型以及藥物篩選和驗證平臺,產(chǎn)生流程為:DNA構(gòu)建,慢病毒載體產(chǎn)生,人胎兒胰腺外植體與pTRIPDU3loxP-pY-TK-RIP405-SV40-LT和pTRIPDU3loxPpY-TK-RIP405-hTERT慢病毒載體共轉(zhuǎn)導,移植到SCID小鼠的腎囊下,導致八個月后形成胰島素瘤,從而獲得EndoC-βH5。EndoC-βH1和增殖的EndoC-βH5細胞分別在Opti-β1和Ulti-b1培養(yǎng)基中的βCoat涂層塑料板上培養(yǎng)。使用胰蛋白酶(0.05%)每7天繁殖一次細胞。流式細胞術(shù)分析表明所有EndoC-βH5細胞均呈胰島素陽性,并且在絕大多數(shù)細胞中檢測到PDX1和NK6.1表達(分別為92.3%和90%)。EndoC-βH5細胞在涂層塑料上形成小的貼壁簇。糖尿病糖尿病細胞模型強大且永生化