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可直接使用PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝高回報的選擇

來源: 發(fā)布時間:2023-12-20

產(chǎn)品簡介:Transporter 5轉(zhuǎn)染試劑是一種非GMP等級的即用型線性聚乙烯亞胺(PEI轉(zhuǎn)染試劑)溶液,由PEI MAX配置而成,采用0.1um PES無菌過濾器,完全消除支原體污染風險。Transporter 5將DNA縮聚成帶正電荷的復合物,這些復合物很容易通過內(nèi)吞作用進入細胞,并且Transporter 5-DNA 復合物能很好地抵御溶酶體的降解作用,有效提高轉(zhuǎn)染效率。適用于工藝開發(fā)、臨床前和早期臨床研究,可無縫過渡到MAXgene GMP用于商業(yè)化生產(chǎn)。Transporter 5轉(zhuǎn)染試劑能高效地將DNA轉(zhuǎn)染入HEK-293、CHO、COS、HELA、昆蟲(SF9、SF21) 等真核細胞系,可作用于大到135,000個核苷酸的質(zhì)粒,所以較大的質(zhì)粒也可以成功地轉(zhuǎn)染。 Transporter 5可節(jié)省試劑準備時間,加快項目進度。經(jīng)過嚴格的性能檢測,確保品質(zhì),在新藥研發(fā)過程中是一款快速、重復性好、可用于批量產(chǎn)的轉(zhuǎn)染試劑。產(chǎn)品特點:非GMP,研究級PEI轉(zhuǎn)染試劑溶液;高轉(zhuǎn)染效率;無縫過渡到MAXgene GMP;易放大,可預(yù)測產(chǎn)量;用于工藝開發(fā),臨床前和早期臨床研究。如想申請PEI試用裝,請關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,回復關(guān)鍵詞“PEI申請”,即可參加!如何優(yōu)化PEI轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染時的比例?可直接使用PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝高回報的選擇

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PEI在于可以應(yīng)用于體內(nèi)試驗。當初試驗經(jīng)費很有限,被逼無奈只能放棄脂質(zhì)體2000,選擇PEI,以至于相當長的時間內(nèi),轉(zhuǎn)染試驗都不順利。下面是幾點關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染的注意要點:1.PEI的使用量可以參照脂質(zhì)體2000的說明書,所用質(zhì)粒盡量去內(nèi)2.轉(zhuǎn)染時,一定要把PEI+DMEM加入到質(zhì)粒+DMEM中,順序不可錯,輕微混勻,靜止20min3.轉(zhuǎn)染后4小時,一定要換液!換含有FBS的完全培養(yǎng)液!因為PEI對細胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗涉及到穩(wěn)定篩選,建議把血清濃度適當提高。PS:事實證明,PEI是可行的,已經(jīng)做出穩(wěn)定細胞系了。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)的信息,可咨詢上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司!?如想申請PEI試用裝,請關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,回復關(guān)鍵詞“PEI申請”,即可參加!?貼壁細胞PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝已有藥物在臨床PEI轉(zhuǎn)染試劑是帶正電的陽離子聚合物與核酸中帶負電的磷酸基團形成帶正電的復合物后,通過胞吞進入細胞。

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PolysciencesPEI轉(zhuǎn)染試劑優(yōu)勢:高質(zhì)量的R&D和cGMP等級產(chǎn)品l高轉(zhuǎn)染效率,低細胞毒性;MAXgene符合cGMP標準和ISO13485質(zhì)量管理體系;經(jīng)過驗證的生產(chǎn)工藝;全合成,無動物源成分;高性價比,適用于從早期研發(fā)到臨床及商業(yè)化生產(chǎn)的各個階段l嚴格控制批間穩(wěn)定性;國內(nèi)外已有多個項目進入臨床階段l具備殘留檢測方法。PEI MAX 是一款高度濃縮的粉劑,大量科學家選擇PEI MAX ,在內(nèi)部自行制備低成本高效益的PEI轉(zhuǎn)染試劑。多年以來,經(jīng)過眾多業(yè)內(nèi)人士評審的公開研究和出版文獻表明,在HEK293、CHO 和 Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率,在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高,可靠性強。PEI MAX是一種非GMP等級PEI轉(zhuǎn)染試劑,適用于基礎(chǔ)科學研究及藥物研發(fā)早期階段。如想申請PEI試用裝,請關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,回復關(guān)鍵詞“PEI申請”,即可參加!

PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑,大量科學家選擇PEIMAX,在內(nèi)部自行制備低成本高效益的PEI轉(zhuǎn)染試劑。多年以來,經(jīng)過眾多業(yè)內(nèi)人士評審的公開研究和出版文獻表明,在HEK293、CHO和Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率,在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高,可靠性強。PEIMAX是一種非GMP等級PEI轉(zhuǎn)染試劑,適用于基礎(chǔ)科學研究及藥物研發(fā)早期階段。Transporter5轉(zhuǎn)染試劑是一種即用型線性聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑(PEI)衍生物。由PEIMAX配置而成的即用型無菌試劑,采用0.1μmPES無菌過濾器,完全消除支原體污染風險。適用于工藝開發(fā)、臨床前和早期臨床研究,可無縫過渡到MAXgene用于cGMP生產(chǎn)。如想申請PEI試用裝,請關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,回復關(guān)鍵詞“PEI申請”,即可參加!PEI轉(zhuǎn)染試劑有沒有毒性?

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材料:質(zhì)粒DNA指數(shù)生長的真核細胞PEI(聚乙烯亞胺)1×HBS(pH7.4)配方:PEI儲存液(100μM):稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS(pH7.4)中,0.2μm濾膜過濾,儲存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS(pH7.4):將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,加入20ml1M的HEPES,調(diào)pH值到7.4,定容至1L,過濾(0.2μm濾膜)后儲存于4℃?zhèn)溆谩7椒ǎ?.細胞分盤:通過胰酶消化收集細胞,用適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上(根據(jù)實驗需要選擇培養(yǎng)皿,使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90%)。根據(jù)細胞貼壁情況于含5%CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染前換入2mL預(yù)熱的無血清培養(yǎng)基。如想申請PEI試用裝,請關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,回復關(guān)鍵詞“PEI申請”,即可參加!?分子量為25000的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑即Polysciences23966轉(zhuǎn)染效率比較高.上海臨床級PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝

PEI轉(zhuǎn)染試劑如何做殘留檢測?可直接使用PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝高回報的選擇

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:1.接種細胞:轉(zhuǎn)染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,每個孔置入的細胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物!如想申請PEI試用裝,請關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,回復關(guān)鍵詞“PEI申請”,即可參加!?可直接使用PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝高回報的選擇