1/2cs生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為:馬鈴薯莖端在1/2cs生長培養(yǎng)基上的存活率為100%,培養(yǎng)16d的幼苗,表現(xiàn)為植株健壯、平均莖高、平均莖中粗為,葉色濃綠,根系發(fā)達(dá)、平均根數(shù)為8個。如圖4所示。對比培養(yǎng)例4:將1/2cs基本培養(yǎng)基替換為1/2ms基本培養(yǎng)基,其余完全同培養(yǎng)實例4,1/2ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。1/2ms生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為:馬鈴薯莖端在1/2ms生長培養(yǎng)基上的存活率為100%,培養(yǎng)16d的幼苗,表現(xiàn)為植株健壯、平均莖高、平均莖中粗為,葉色濃綠,根系發(fā)達(dá)、平均根數(shù)為6個。如圖4所示。培養(yǎng)實例4和對比培養(yǎng)例4的培養(yǎng)結(jié)果比較:馬鈴薯莖端在1/2cs生長培養(yǎng)基和1/2ms生長培養(yǎng)基上的存活率均為100%;在相同條件下培養(yǎng)16d時,與1/2ms生長培養(yǎng)基相比,1/2cs生長培養(yǎng)基中的幼苗長勢更佳,其莖高、莖中粗、根的數(shù)量均優(yōu)于1/2ms生長培養(yǎng)基。如圖4所示。培養(yǎng)實例5:哥倫比亞型擬南芥葉片及根愈傷**誘導(dǎo)(1)擬南芥葉片愈傷**誘導(dǎo)培養(yǎng)基:cs基本培養(yǎng)基+,用超純水溶解,。cs基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。(2)擬南芥根愈傷**誘導(dǎo)培養(yǎng)基:cs基本培養(yǎng)基+2,,用超純水溶解,。cs基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。。無血清培養(yǎng)基適用于需要無血清環(huán)境的細(xì)胞。寧夏基礎(chǔ)培養(yǎng)基
由于培養(yǎng)基的間歇**不需要專門的**設(shè)備,投資少,對設(shè)備要求簡單,對蒸汽的要求也比較低,且**效果可靠,因此,間歇**是中小型生產(chǎn)工廠經(jīng)常采用的一種培養(yǎng)基**方法。(三)、培養(yǎng)基的連續(xù)**1、定義:連續(xù)**也叫連消,將配制好的并經(jīng)預(yù)熱(60~75℃)的培養(yǎng)基用泵連續(xù)輸入由直接蒸汽加熱的加熱塔,使在短時間內(nèi)達(dá)到**溫度(126~132℃)。然后進入維持罐(或維持管),使在**溫度下維持3~7分鐘后再進入冷卻管,使其冷卻至接種溫度并直接進入已事先**(空罐**)過的發(fā)酵罐內(nèi)。其溫度一般以126~132℃為宜,總蒸汽壓力要求達(dá)到~MPa以上。培養(yǎng)基采用連續(xù)**時,需在培養(yǎng)基進入發(fā)酵罐前,直接用蒸汽進行空罐**(空消),用無菌空氣保壓,待培養(yǎng)基流入罐后,開始冷卻。**時對培養(yǎng)基的加熱可采用各種加熱器。培養(yǎng)基的冷卻方式有噴淋冷卻式、真空冷卻式、薄板換熱器式幾種方式,其過程均包括加熱、維持和冷卻階段。2、連續(xù)**的流程:(1)由熱交換器組成的**系統(tǒng)流程中采用了薄板換熱器作為培養(yǎng)液的加熱和冷卻器,蒸汽在薄板換熱器的加熱段使培養(yǎng)液的溫度升高,經(jīng)維持段保溫一定時間后,培養(yǎng)基在薄板換熱器的冷卻段進行冷卻。北京MEM培養(yǎng)基采購無血清培養(yǎng)基提供了無血清的純凈環(huán)境。
c、結(jié)果為:在用未調(diào)ph液體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)時,整體長勢從優(yōu)至弱分別為1/2cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基、cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基、1/2ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基、ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基;在用ph調(diào)至,整體長勢從優(yōu)至弱分別為1/、、1/、;不論是否調(diào)ph至,cs液體培養(yǎng)基培養(yǎng)的馬鈴薯幼苗長勢均優(yōu)于ms液體培養(yǎng)基;不論是否調(diào)ph至,1/2cs液體培養(yǎng)基培養(yǎng)的馬鈴薯幼苗長勢均優(yōu)于1/2ms液體培養(yǎng)基。如圖9和圖10所示。說明,1/2cs液體培養(yǎng)基和cs液體培養(yǎng)基應(yīng)用于植物水培時,不論是否調(diào)節(jié)ph至,均能獲得很好的培養(yǎng)效果,克服了傳統(tǒng)液體培養(yǎng)基必須調(diào)節(jié)ph后才適用于植物水培的缺點。**后說明的是,以上實施例*用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制,盡管參照較佳實施例對本發(fā)明進行了詳細(xì)說明,本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解,可以對本發(fā)明的技術(shù)方案進行修改或者等同替換,而其不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的宗旨和范圍,則均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍當(dāng)中。
無芽孢:E=209—250*103J/mol。顯然,(5)式的比值〉1,說明提高溫度對于第二個平行反應(yīng),即菌體死亡的反應(yīng)是有利的。提高溫度,雖然兩個平行性反應(yīng)的反應(yīng)速度常數(shù)都提高了,但是,達(dá)到同樣的**效果,所需要的時間卻縮短了,由于***個反應(yīng)也就是營養(yǎng)成分破壞的反應(yīng)速度常速增加的少,因此,有利于減少培養(yǎng)基在**過程中營養(yǎng)成分的破壞。換言之,高溫短時**對于培養(yǎng)基營養(yǎng)成分是有利的。通常所說的高溫短時**可以提高生產(chǎn)效益,其理論根據(jù)就在于此。結(jié)論1:當(dāng)**溫度上升時,微生物殺死速率的提高要超過培養(yǎng)基成分的破壞速率的增加。要減少營養(yǎng)成分的破壞,可升高溫度**。結(jié)論2:在**時選擇較高的溫度、較短的時間,這樣便既可達(dá)到需要的**程度,同時又可減少營養(yǎng)物質(zhì)的損失。(二)、影響**效果的因素(1)微生物種類:不同的微生物k值不同。(2)初始菌量:在保持N值不變的前提下,t與初始菌量N0的對數(shù)成正比。(3)培養(yǎng)基成份:油脂、蛋白質(zhì)增加微生物的耐熱性。(4)傳熱與混合狀況:影響受熱均勻度。(5)培養(yǎng)基中固體顆粒的存在影響熱穿透。(6)蒸汽中空氣的存在降低蒸汽分壓和**溫度。(7)pH:酸性pH下可加快微生物熱死速率三、培養(yǎng)基的工業(yè)**。F12培養(yǎng)基含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì),支持細(xì)胞的生長。
培養(yǎng)實例2:蘭茲貝格型擬南芥無菌植株培養(yǎng)培養(yǎng)實例2與培養(yǎng)實例1不同的地方在于:步驟(1)所用種子為蘭茲貝格(ler,landsbergerecta)型擬南芥種子,蘭茲貝格擬南芥較哥倫比亞擬南芥具有更早的花期,在適宜條件下培養(yǎng),可以獲得處于各發(fā)育時期的擬南芥無菌***,包括根、胚軸、葉柄、子葉、蓮座葉、莖、花、角果等,其余完全同培養(yǎng)實例1。1/2cs生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為:蘭茲貝格型擬南芥種子在1/2cs生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100%,培養(yǎng)28d的幼苗,表現(xiàn)為植株健壯、平均株高為,蓮座葉發(fā)達(dá)、平均**大蓮座葉長為,葉色濃綠,根系粗壯、平均主根長為,花序含有較多花朵,花粉形態(tài)和活力均正常、平均有活力的花粉為%。如圖2所示。對比培養(yǎng)例2:將1/2cs基本培養(yǎng)基替換為1/2ms基本培養(yǎng)基,其余完全同培養(yǎng)實例2,1/2ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。1/2ms生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為:蘭茲貝格型擬南芥種子在1/2ms生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100%,培養(yǎng)28d的幼苗,表現(xiàn)為植株健壯、平均株高為,蓮座葉發(fā)達(dá)、平均**大蓮座葉長為,葉色濃綠,根系粗壯、平均主根長為,花序發(fā)育良好,花粉形態(tài)和活力均正常、平均有活力的花粉為%。如圖2所示。MEM培養(yǎng)基提供了細(xì)胞生長所需的基本環(huán)境。天津DMEM/F12培養(yǎng)基價格
無酚紅培養(yǎng)基避免了酚紅對細(xì)胞的潛在毒性作用。寧夏基礎(chǔ)培養(yǎng)基
無動物組分無血清細(xì)胞培養(yǎng)基的應(yīng)用三、細(xì)胞培養(yǎng)基的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和檢測方法澄清度水是細(xì)胞培養(yǎng)基的溶劑。細(xì)胞培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分只有完全溶解于水才能被細(xì)胞吸收攝取,細(xì)胞才能生長增殖,因此細(xì)胞培養(yǎng)基是否溶解以及培養(yǎng)液是否透明澄清直接影響培養(yǎng)基使用。該項目是通過對水溶解后的細(xì)胞培養(yǎng)基的澄清度檢查,判斷細(xì)胞培養(yǎng)基的澄清度。按中華******典2005年版二部附錄ⅨB進行。pH值哺乳類動物細(xì)胞生長需要合適的酸堿度,pH過高或者過低都會導(dǎo)致細(xì)胞死亡。pH值的測定也可以檢查細(xì)胞培養(yǎng)基的批間差。清大天一標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定取規(guī)定量供試品,用注射用水(水溫20℃-30℃)溶解至1L,加入規(guī)定量碳酸氫鈉到上述溶液中,用與細(xì)胞培養(yǎng)基溶液pH值相近的兩點標(biāo)準(zhǔn)緩沖液校準(zhǔn)后的酸度計進行測定。按中華******典2005年版二部附錄ⅥH進行;加入規(guī)定量的碳酸氫鈉(見表4-12)到上述溶液中,按中華******典2005年版二部附錄ⅥH進行。干燥減量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)細(xì)胞培養(yǎng)基具有吸濕性,在空氣中放置水分會很快升**燥減量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示產(chǎn)品中含濕量。細(xì)胞培養(yǎng)基是有菌制劑,其豐富的營養(yǎng)成分有利于微生物生長,控制細(xì)胞培養(yǎng)基中的水分可以防止微生物的繁殖,保持細(xì)胞培養(yǎng)基的養(yǎng)分。寧夏基礎(chǔ)培養(yǎng)基