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江蘇EDTA胰酶采購

來源: 發(fā)布時間:2024-11-19

    胰蛋白酶:(Trypsin)為蛋白酶的一種,是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。由223個氨基酸殘基組成的單鏈多肽,主要切割賴氨酸和精氨酸羧基端。按干燥品計算,每1mg中胰蛋白酶的活力不得少于2500單位。作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關(guān),在pH為、溫度為37℃時,胰酶溶液的作用能力**強(qiáng)。使用胰酶時,應(yīng)把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細(xì)胞損傷。終止消化時,可用含有血清培養(yǎng)液終止胰酶對細(xì)胞的作用。有些細(xì)胞容易消化(如雞胚原代成纖維細(xì)胞)可用胰酶進(jìn)行消化,可以不加EDTA。 胰蛋白酶是一種動物源性產(chǎn)品,是培養(yǎng)細(xì)胞過程中常用的酶。江蘇EDTA胰酶采購

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    產(chǎn)品簡介產(chǎn)品簡介:產(chǎn)品編號產(chǎn)品名稱產(chǎn)品包裝產(chǎn)品價格C0201胰酶細(xì)胞消化液100ml碧云天生產(chǎn)的胰酶細(xì)胞消化液(Trypsin-EDTASolution)含。該消化液經(jīng)過過濾**,可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,或者一些**的消化。本胰酶細(xì)胞消化液具有方便快速的特點(diǎn),通常室溫消化1分鐘左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞。包裝清單:產(chǎn)品編號產(chǎn)品名稱包裝C0201胰酶細(xì)胞消化液100ml―說明書1份保存條件:4℃保存,一年有效。注意事項(xiàng):在使用胰酶細(xì)胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被**污染。胰酶細(xì)胞消化液消化細(xì)胞時間不宜過長,否則細(xì)胞鋪板后生長狀況會較差。為了您的安全和**,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。使用說明使用說明:1.貼壁細(xì)胞的消化:a)吸去培養(yǎng)液,用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。b)加入少量胰酶細(xì)胞消化液,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置30秒至2分鐘。不同的細(xì)胞消化時間有所不同。c)顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用***吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來。此時吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的完全細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。d)如果發(fā)現(xiàn)消化不足。江蘇胰酶市場報價含EDTA的胰酶消化活力會比不含EDTA的強(qiáng)。

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胰酶操作步驟:

(*供參考) :1. 吸取培養(yǎng)基,用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以除去殘余的血清。2. 加入適量的胰蛋白酶消化液,略蓋過細(xì)胞即可。根據(jù)細(xì)胞的特性可以增加或減少胰酶用量,室溫放置30秒至2分鐘。(不同的細(xì)胞消化時間有所不同)3. 顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化呈白茫狀;或者用***吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來。4. 此時吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的完全細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入胰酶細(xì)胞消化液重新消化。

0.25%胰酶是細(xì)胞生物學(xué)中常用的一種生物試劑,下面匯總一下胰酶使用過程中常見的一些問題。

胰酶的使用濃度是多少?胰酶濃度:常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作為消化液。

胰酶的保存胰酶可在-20℃下保存一年。隨著時間延長,胰酶的消化能力減弱。胰酶可分裝凍存,在使用前從-20℃冰箱取出。盡量避免在4℃長期保存。胰酶使用的時候要注意什么?(1)在使用胰酶細(xì)胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。(2)胰酶細(xì)胞消化液消化細(xì)胞時間不宜過長,否則細(xì)胞鋪板后生長狀況會較差。 胰蛋白酶消化液都由已經(jīng)過豬細(xì)小病毒檢測和支原體檢測的原料制備。

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    在253nm的波長處測定吸光度,必要時可用上述底物原液或磷酸鹽緩沖液調(diào)節(jié),使吸光度在~,作為底物溶液。制成后應(yīng)在2小時內(nèi)使用。供試品溶液的制備精密稱取本品適量,加~60胰蛋白酶單位的溶液。測定法取底物溶液,加μl,混勻,作為空白。另取供試品溶液200μl,加底物溶液(恒溫于℃±℃),立即計時,混勻,使比色池內(nèi)的溫度保持在25℃±℃,照紫外-可見分光光度法(2010年版*典二部附錄ⅣA),在253nm的波長處,每隔30秒鐘讀取吸光度,共5分鐘。以吸光度為縱坐標(biāo),時間為橫坐標(biāo),作圖;每30秒鐘吸光度的改變應(yīng)恒定在~,呈線性關(guān)系的時間不得少于3分鐘。若不符合上述要求,應(yīng)調(diào)整供試品溶液的濃度,再作測定。在上述吸光度對時間的關(guān)系圖中,取成直線部分的吸光度,按下式計算:式中P為每1mg供試品中含胰蛋白酶的量,單位;A1為直線上終止的吸光度;A2為直線上開始的吸光度;T為A1至A2讀數(shù)的時間,分;W為測定液中含供試品的量,mg;,吸光度每分鐘改變,即相當(dāng)于1個胰蛋白酶單位。胰蛋白酶制劑注射用胰蛋白酶[3]胰蛋白酶胰蛋白酶的醫(yī)學(xué)檢查胰蛋白酶檢查名稱胰蛋白酶胰蛋白酶分類血液生化檢查>酶類測定胰蛋白酶胰蛋白酶的測定原理同酶速率法測定。使用胰酶細(xì)胞消化液(不含EDTA)的過程中要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。江蘇胰酶市場報價

消化使用的胰酶是含EDTA還是不含的?江蘇EDTA胰酶采購

    一、EDTA-胰蛋白酶的配制實(shí)驗(yàn)簡介:EDTA-胰蛋白酶的配制實(shí)驗(yàn)所需的EDTA是乙二胺四乙酸,一種金屬螯合劑。它通常與胰蛋白酶結(jié)合使用。原因是鈣和鎂等金屬離子會降低胰酶的活性,因此在使用胰蛋白酶消化液時應(yīng)添加EDTA。它可以螯合這些離子并消除胰酶的**作用。二、EDTA-胰蛋白酶的配制實(shí)驗(yàn)所需材料及試劑:PBS,氫氧化鈉,EDTA,三、EDTA-胰蛋白酶的配制實(shí)驗(yàn)步驟:1.磷酸酶的質(zhì)量/體積比為%,即將。注意,盡量不要用水溶解,因?yàn)楸仨毐3譂B透壓。%%,可根據(jù)細(xì)胞消化的難度進(jìn)行調(diào)整。不需要EDTA,可以省略易于消化的細(xì)胞。EDTA對細(xì)胞粘附有影響,因此應(yīng)大量使用。如果影響粘附,則必須將其用于消化,在用完全培養(yǎng)基終止消化后,離心并棄去上清液,然后添加完全培養(yǎng)基以進(jìn)行培養(yǎng)以除去EDTA。如果不影響附著力,則不要離心。。用磷酸酶稀釋PBS。4.請注意,血清可以阻止血漿酶的作用,但不能阻止EDTA。對于某些細(xì)胞,有必要在消化后停止離心。5.當(dāng)pH約為8時,磷酸酶和EDTA**易溶解。在制備過程中,您可以先滴幾滴氫氧化鈉以將pH調(diào)整為8。請注意,磷酸酶會使溶液變酸,因此您應(yīng)隨時溶解時測量pH值。調(diào)整。請注意,不應(yīng)添加過量的氫氧化鈉,否則電池將無法承受堿的作用。江蘇EDTA胰酶采購