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斑馬魚(yú)基因敲入方法

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2025-01-26

利用反義maka啉環(huán)寡核苷酸(Morpholino)特異性阻斷mRNA的翻譯或正確剪切,從而降低基因的表達(dá)水平,用于胚胎早期發(fā)育中基因功能研究;利用CRISPR/Cas9技術(shù)特異性地瞬時(shí)破壞基因的編碼序列,從而降低基因蛋白產(chǎn)物的表達(dá)水平來(lái)研究基因的功能,用于各個(gè)階段的基因功能研究。破壞該基因正常表達(dá),主要用于在動(dòng)物模型中研究基因的功能等。定點(diǎn)插入外源核酸片段,用于標(biāo)記基因的精細(xì)表達(dá)模式、破壞該基因正常表達(dá)、構(gòu)建點(diǎn)突變、實(shí)現(xiàn)時(shí)間空間上控制基因表達(dá)等。斑馬魚(yú)的口腔中有牙齒,可輔助攝取食物并進(jìn)行初步咀嚼。斑馬魚(yú)基因敲入方法

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人類(lèi)疾病紛繁復(fù)雜,先天性疾病、遺傳性疾病成因隱匿,攻克難度極大。斑馬魚(yú)Cdx模型宛如搭建的模擬戰(zhàn)場(chǎng),為探尋疾病真相、研發(fā)醫(yī)療策略開(kāi)辟捷徑。不少先天性脊柱畸形、腸道發(fā)育異常病癥,禍根在于胚胎發(fā)育關(guān)鍵基因失常,斑馬魚(yú)Cdx模型精細(xì)復(fù)現(xiàn)這些病癥特征。以先天性脊柱發(fā)育不全為例,患病嬰兒脊柱彎曲變形,生活飽受困擾。在斑馬魚(yú)Cdx模型中,當(dāng)Cdx基因發(fā)生突變,幼魚(yú)脊柱同樣出現(xiàn)怪異彎曲,解剖學(xué)與影像學(xué)觀察可精細(xì)捕捉病變細(xì)節(jié)。科研人員借此深入分子層面,挖掘致病基因上下游通路異常,鎖定潛在醫(yī)療靶點(diǎn),開(kāi)啟靶向藥物研發(fā)征程。斑馬魚(yú)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)平臺(tái)斑馬魚(yú)的尾鰭形狀對(duì)其游泳速度和方向控制有影響。

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斑馬魚(yú)安全評(píng)價(jià)體系●急性毒性和靶organ毒性檢測(cè)更適用于產(chǎn)品安全風(fēng)險(xiǎn)的深入評(píng)價(jià)和風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)的評(píng)估可以識(shí)別毒性風(fēng)險(xiǎn)作用在哪種organ上刺激性和致敏性風(fēng)險(xiǎn)篩查●慢性毒性檢測(cè)將綠色熒光蛋白(諾貝爾獎(jiǎng)技術(shù))與轉(zhuǎn)基因技術(shù)結(jié)合,獲得了能夠檢測(cè)類(lèi)雌jisu污染物的轉(zhuǎn)基因斑馬魚(yú)轉(zhuǎn)基因斑馬魚(yú)可以識(shí)別類(lèi)雌jisu物質(zhì)并發(fā)出熒光●快速檢測(cè)開(kāi)發(fā)“小硬件+大后臺(tái)”現(xiàn)場(chǎng)快檢體系基于斑馬魚(yú)的行為學(xué)對(duì)急性食物中毒風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行控制檢測(cè)時(shí)間應(yīng)控制在1小時(shí),適用于餐飲單位

斑馬魚(yú)實(shí)驗(yàn)?zāi)P驮诂F(xiàn)代的生命科學(xué)研究中占據(jù)著舉足輕重的地位。本文闡述了斑馬魚(yú)實(shí)驗(yàn)?zāi)P偷奶攸c(diǎn),包括其獨(dú)特的生物學(xué)特性、易于操作與觀察等方面;深入探討了它在發(fā)育生物學(xué)、疾病研究、藥物研發(fā)等多個(gè)關(guān)鍵領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用;同時(shí)也分析了該模型面臨的挑戰(zhàn)以及未來(lái)的發(fā)展趨勢(shì),旨在展現(xiàn)斑馬魚(yú)實(shí)驗(yàn)?zāi)P驮谕苿?dòng)生命科學(xué)進(jìn)步過(guò)程中所發(fā)揮的優(yōu)異價(jià)值。斑馬魚(yú)作為一種熱帶淡水魚(yú)類(lèi),具有眾多獨(dú)特的生物學(xué)特性,使其成為理想的實(shí)驗(yàn)?zāi)P?。其體型較小,成年斑馬魚(yú)體長(zhǎng)通常在 3 - 5 厘米之間,這不僅便于養(yǎng)殖和操作,而且在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中所需的空間和資源相對(duì)較少。斑馬魚(yú)的繁殖能力極強(qiáng),性成熟的雌性斑馬魚(yú)每周可產(chǎn)卵數(shù)百枚,在適宜的環(huán)境條件下,受精率較高,這為大規(guī)模的實(shí)驗(yàn)研究提供了充足的樣本來(lái)源。斑馬魚(yú)繁殖力強(qiáng),每周可產(chǎn)卵數(shù)百枚,為科研提供大量實(shí)驗(yàn)樣本。

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在發(fā)育生物學(xué)領(lǐng)域,斑馬魚(yú)實(shí)驗(yàn)?zāi)P捅粡V泛應(yīng)用于探究胚胎發(fā)育的分子機(jī)制和細(xì)胞命運(yùn)決定過(guò)程。通過(guò)運(yùn)用基因編輯技術(shù),如CRISPR/Cas9系統(tǒng),研究人員可以精確地對(duì)斑馬魚(yú)的特定基因進(jìn)行敲除、插入或修飾操作,然后觀察胚胎發(fā)育過(guò)程中的表型變化,從而確定這些基因在發(fā)育進(jìn)程中的關(guān)鍵作用。例如,在研究神經(jīng)管發(fā)育時(shí),利用斑馬魚(yú)胚胎透明的優(yōu)勢(shì),研究人員可以實(shí)時(shí)追蹤神經(jīng)前體細(xì)胞的遷移和分化路徑。當(dāng)某些與神經(jīng)管發(fā)育相關(guān)的基因被敲除后,斑馬魚(yú)胚胎會(huì)出現(xiàn)神經(jīng)管閉合不全或畸形等明顯的表型變化,這為深入理解神經(jīng)管發(fā)育的分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)提供了直觀而有力的證據(jù)。斑馬魚(yú)的聽(tīng)覺(jué)organ能接收水中的聲波信號(hào)并作出反應(yīng)。斑馬魚(yú)基因置換

斑馬魚(yú)的脂肪組織可儲(chǔ)存能量,在食物短缺時(shí)供能。斑馬魚(yú)基因敲入方法

看似專(zhuān)注于軀體架構(gòu)規(guī)劃的斑馬魚(yú)cdx基因,實(shí)則與神經(jīng)發(fā)育也有著千絲萬(wàn)縷聯(lián)系。在胚胎腦部及脊髓雛形初現(xiàn)階段,cdx基因悄然施展影響力。它間接調(diào)控神經(jīng)干細(xì)胞的增殖與分化節(jié)拍,確保生成足量神經(jīng)元,滿足斑馬魚(yú)早期感知外界、驅(qū)動(dòng)身體所需。舉例而言,科研人員利用基因編輯技術(shù)適度降低cdx表達(dá)量后,斑馬魚(yú)幼魚(yú)出現(xiàn)游泳姿態(tài)異常,頻繁打轉(zhuǎn)、失衡側(cè)翻。深入探究得知,脊髓中運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元發(fā)育受損,軸突延伸受阻,無(wú)法精細(xì)連接肌肉纖維,致使肌肉接收指令紊亂。cdx基因還參與構(gòu)建神經(jīng)回路,協(xié)同其他神經(jīng)發(fā)育關(guān)鍵基因,塑造從感覺(jué)輸入到運(yùn)動(dòng)輸出的信息傳遞路徑,助力斑馬魚(yú)神經(jīng)系統(tǒng)精細(xì)“布線”,在水中靈動(dòng)游弋、機(jī)敏避險(xiǎn)。斑馬魚(yú)基因敲入方法