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植物染色體倍性鑒定在植物遺傳育種中具有十分重要的作用。在育種過程中,通過花藥(花粉小孢子)、未受精子房等途徑再生出的植株,往往是單倍體、雙單倍體及其他倍性植株的混合群體,有效的倍性鑒定是了解其遺傳背景和進(jìn)一步應(yīng)用的基礎(chǔ)。多倍體育種是植物育種的一種途徑之一,它不僅可以對(duì)性狀進(jìn)行改良,還可以提高植物體內(nèi)各種有效成分的含量。利用倍性鑒定,準(zhǔn)確地辨認(rèn)多倍體并將其挑選出來,也是多倍體育種中的重要環(huán)節(jié)一環(huán)。另外,倍性鑒定也可用于分析細(xì)胞分裂活動(dòng)等生理和遺傳研究。倍性鑒定特別是苗期倍性鑒定,不僅可以減少育種工作量,而且可以減少土地和資金的投入。國(guó)內(nèi)外關(guān)于各種鑒定方法報(bào)道不少,但較分散。本文綜述了各種倍性鑒定方法并對(duì)其優(yōu)缺點(diǎn)進(jìn)行了評(píng)選。不同倍性植株在細(xì)胞學(xué)和形態(tài)解剖學(xué)上具有明顯差異,目前主要有兩大類型直接鑒定法和間接鑒定法。CyFlow Analyser倍性分析儀配備365nm光源,高效激發(fā)DAPI染料,避免RNA的影響和次生代謝物的影響。珠三角CyFlow Ploidy Analyzer倍性分析儀系統(tǒng)
CyFlow Ploidy Analysere倍性分析儀一機(jī)全能:1、特殊設(shè)計(jì),專為醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)科學(xué)、育種及水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域提供完美的倍性和周期解決方案2、配備365nm光源,高效激發(fā)DAPI染料,避免RNA的影響和次生代謝物的影響3、配備532nm光源,高效激發(fā)PI染料,激發(fā)效率遠(yuǎn)超488nm和561nm激光器4、超高熒光分辨率, DNA檢測(cè)CV<1%,適合高精度倍性實(shí)驗(yàn)。5、采用TVAC定體積相對(duì)計(jì)數(shù)功能,無需相對(duì)計(jì)數(shù)微球,隨時(shí)掌握樣本濃度6、樣本流速?gòu)?-20ul/s連續(xù)精確可調(diào),適合極低濃度樣本的檢測(cè)7、可選配自動(dòng)上樣器CyFlow Robby,兼容48孔板,96孔板和流式管,實(shí)現(xiàn)無人值守的高通量上樣8、結(jié)合配套植物倍性試劑,可在5min內(nèi)完成植物倍性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。9、支持樣本快速處理和檢測(cè);10、基于PI和DAPI的熒光DNA分析;11、提供樣本快速處理試劑盒,用于 DAPI 和PI 標(biāo)記的倍體分析;12、配套的儀器質(zhì)控試劑;13、所有樣本的細(xì)胞核染色(包括 ,葉、根、愈合組織、懸浮組織、雜交細(xì)胞等);14、可用于任何動(dòng)物組織、培養(yǎng)細(xì)胞、懸浮細(xì)胞的倍體分析。深圳倍性分析儀流式倍性分析儀是一種用于生物學(xué)、農(nóng)學(xué)、林學(xué)領(lǐng)域的分析儀器。
上機(jī)(CyFlow Ploidy Analysere倍性分析儀)操作前,樣品保存要求:新鮮葉片濾紙打濕后包裹樣品保濕,放入自封袋中做好標(biāo)記,再放入泡沫箱密封。若短期內(nèi)不能檢測(cè)。可將葉片使用硅膠干燥法進(jìn)行保存。每一個(gè)測(cè)試需求的葉片面積是0.5 cm2,大約小拇指甲蓋大小。準(zhǔn)備測(cè)試的葉片應(yīng)為次量的 4 倍以上,已備實(shí)驗(yàn)重復(fù)使用。準(zhǔn)備標(biāo)樣,要有已知倍性的標(biāo)樣作為參照,來預(yù)測(cè)待測(cè)樣品的倍性,檢測(cè)結(jié)果是一個(gè)相對(duì)值,并非相對(duì)值。特別注意:一定要隨樣本寄出同物種親緣較近的已知倍性樣本,作為參照,否則樣本無法確定倍性。
樣品上樣到儀器 典型的實(shí)驗(yàn)從單細(xì)胞懸浮液中的熒光標(biāo)記細(xì)胞開始,但是可以使用任何顆粒類型的樣品。將樣品置于流式細(xì)胞儀上,樣品被吸到儀器中,細(xì)胞懸浮在一種被稱為鞘液的生理緩沖液。流體系統(tǒng)(管道、泵和閥)將初始樣品懸浮液排列成單列細(xì)胞流,并使細(xì)胞通過流式細(xì)胞儀以進(jìn)行分析。流式細(xì)胞儀的流體學(xué)。流動(dòng)池(也稱為流式小室)使樣品中的細(xì)胞(顆粒)排成一列。這是單細(xì)胞分析的關(guān)鍵步驟。激光檢測(cè)點(diǎn) 細(xì)胞與激光發(fā)生相互作用的地方稱為激光檢測(cè)點(diǎn)。您也可能聽過它的另一個(gè)名字“激光攔截”。這是熒光檢測(cè)發(fā)生的地方。當(dāng)激光束照射到單個(gè)細(xì)胞時(shí),一些光會(huì)撞到細(xì)胞內(nèi)的物理結(jié)構(gòu),導(dǎo)致光線散射。這種光散射可被測(cè)量,并且與相對(duì)細(xì)胞大小和細(xì)胞內(nèi)的結(jié)構(gòu)相關(guān)。這些測(cè)量稱為前向角散射(FSC)和側(cè)角散射(SSC),取決于收集光的位置相對(duì)于激光路徑的角度。幾乎同時(shí),來自激光器的光激發(fā)與細(xì)胞相關(guān)的所有熒光團(tuán),產(chǎn)生熒光發(fā)射。所有這些光被檢測(cè)器收集并通過流式細(xì)胞儀的電子元件進(jìn)行處理。通過激光檢測(cè)點(diǎn)之后,流體系統(tǒng)會(huì)將不需要的細(xì)胞輸送到廢液桶中。在細(xì)胞分選儀中,細(xì)胞將在激光檢測(cè)點(diǎn)被分選和輸送到收集管中,以供后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。CyFlow Analyser倍性分析儀由光源、光學(xué)系統(tǒng)、液流系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)、軟件組成。
利用流式細(xì)胞儀快速檢測(cè)棉花 DNA 倍性,為棉花的倍性鑒定和育種研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。以陸地棉珂字棉 312( Gossypium hirsutumLinn.)的老葉和嫩葉為試材,用 WPB 和 LB01 解離液提取細(xì)胞核,經(jīng) PI 染色后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞倍性。結(jié)果發(fā)現(xiàn),用 WPB 解離液提取棉花嫩葉獲得的細(xì)胞核用于倍性檢測(cè)效果更好,表現(xiàn)為主峰離子團(tuán)清晰而集中、背景碎片少,可以得到明顯的主峰、雜峰更少,且收集到的細(xì)胞核數(shù)目更多。初步建立了利用流式細(xì)胞儀快速檢測(cè)棉花 DNA 倍性的方法。CyFlow Analyser倍性分析儀有365nm的紫外光源/532nm的Nd-YAG綠色激光器。深圳CyFlow Ploidy Analyzer倍性分析儀細(xì)胞周期檢測(cè)
流式細(xì)胞分析是一種現(xiàn)代分析技術(shù),其在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被范圍廣使用,具有“實(shí)驗(yàn)室的 CT”之稱。珠三角CyFlow Ploidy Analyzer倍性分析儀系統(tǒng)
待測(cè)細(xì)胞被制備成單細(xì)胞懸液,經(jīng)特異性熒光染料染色后置于專門樣品管中,在氣體壓力推動(dòng)下被壓入流動(dòng)室,流動(dòng)室內(nèi)充滿鞘液(不含細(xì)胞或微粒的緩沖液),在高壓作用下從鞘液管噴出包裹細(xì)胞,使細(xì)胞排成單列形成細(xì)胞液柱,依次通過檢測(cè)區(qū)。液柱與高度聚焦的激光束垂直相交,被熒光染料染色的細(xì)胞受到激光激發(fā)產(chǎn)生熒光信號(hào)和散射光信號(hào),這些光信號(hào)通過波長(zhǎng)選擇的濾光片,由相應(yīng)的光電管和電子檢測(cè)器接收并轉(zhuǎn)換成電信號(hào),經(jīng)放大器放大后送入計(jì)算機(jī)并進(jìn)行分析顯示和結(jié)果輸出,測(cè)定的結(jié)果常用單參數(shù)直方圖、雙參數(shù)散點(diǎn)圖、輪廓(等高)圖和三維立體圖來表示。珠三角CyFlow Ploidy Analyzer倍性分析儀系統(tǒng)
廣州雙螺旋科學(xué)儀器有限公司位于廣州市黃埔區(qū)銳豐三街4號(hào)617房,交通便利,環(huán)境優(yōu)美,是一家服務(wù)型企業(yè)。公司是一家有限責(zé)任公司(自然)企業(yè),以誠(chéng)信務(wù)實(shí)的創(chuàng)業(yè)精神、專業(yè)的管理團(tuán)隊(duì)、踏實(shí)的職工隊(duì)伍,努力為廣大用戶提供***的產(chǎn)品。公司擁有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì),具有數(shù)字PCR,純水機(jī),病理切片機(jī),倍性分析儀等多項(xiàng)業(yè)務(wù)。雙螺旋科學(xué)儀器順應(yīng)時(shí)代發(fā)展和市場(chǎng)需求,通過**技術(shù),力圖保證高規(guī)格高質(zhì)量的數(shù)字PCR,純水機(jī),病理切片機(jī),倍性分析儀。