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山東倍性分析儀配套試劑

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-03-13

流式細(xì)胞儀主要由流動(dòng)室及液流系統(tǒng)、激光器及光學(xué)系統(tǒng)、光電管及檢測(cè)系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)及分析系統(tǒng)組成。流式細(xì)胞儀的流體系統(tǒng)負(fù)責(zé)將樣品從樣品管轉(zhuǎn)移到流動(dòng)池。一旦通過(guò)流動(dòng)池(并通過(guò)激光束),樣品將被分選出來(lái)(在細(xì)胞分選儀中)或移到廢液中。光學(xué)系統(tǒng)的元件包括激發(fā)光源、透鏡和濾光片(用于收集和移動(dòng)儀器周圍的光)以及用于產(chǎn)生光電流的檢測(cè)系統(tǒng)。電子系統(tǒng)是流式細(xì)胞儀的大腦。在這里,來(lái)自檢測(cè)器的光電流經(jīng)過(guò)數(shù)字化、處理和保存,以用于后續(xù)分析。簡(jiǎn)單的流式細(xì)胞儀可用于檢測(cè)細(xì)胞特征,包括細(xì)胞大小、細(xì)胞數(shù)量、細(xì)胞周期和細(xì)胞表型分析等。山東倍性分析儀配套試劑

菌類的基因組大小信息很少,只有不到 2000 個(gè)物種的信息可用。到目前為止,大多數(shù)記錄都是使用靜態(tài)的、基于顯微鏡的細(xì)胞計(jì)數(shù)方法獲得的,或者來(lái)自基因組測(cè)序項(xiàng)目。流式細(xì)胞術(shù)現(xiàn)在被認(rèn)為是獲得基因組大小測(cè)量的較先進(jìn)方法,并且可以使用適當(dāng)?shù)姆椒ê?DNA 標(biāo)準(zhǔn),從而能夠以快速、可靠和廉價(jià)的方式分析大多數(shù)基因組大小范圍。平均菌類基因組大小為 60 Mbp,但大小因系統(tǒng)發(fā)育而異,從 2.2到 3706 Mbp 。在幾個(gè)菌類進(jìn)化枝中,基因組大小的擴(kuò)張似乎伴隨著植物共生或植物寄生的進(jìn)化,與植物相互作用的菌類似乎比腐生菌和與動(dòng)物相互作用的菌類具有更大的基因組。雖然用于核 DNA 定量的流式細(xì)胞術(shù)在植物科學(xué)中常規(guī)用于基因組大小和倍性研究,但其在菌類生物學(xué)中的使用仍然很少。此處描述了適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)、方法和比較好實(shí)踐,旨在促進(jìn)流式細(xì)胞術(shù)在菌類基因組大小測(cè)量中更普遍和更多的應(yīng)用。高精確性倍性分析儀染色速度CyFlow Analyser倍性分析儀在醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)科學(xué)、育種水產(chǎn)養(yǎng)殖等應(yīng)用領(lǐng)域提供完美解決方案。

待測(cè)細(xì)胞被制備成單細(xì)胞懸液,經(jīng)特異性熒光染料染色后置于專門(mén)樣品管中,在氣體壓力推動(dòng)下被壓入流動(dòng)室,流動(dòng)室內(nèi)充滿鞘液(不含細(xì)胞或微粒的緩沖液),在高壓作用下從鞘液管噴出包裹細(xì)胞,使細(xì)胞排成單列形成細(xì)胞液柱,依次通過(guò)檢測(cè)區(qū)。液柱與高度聚焦的激光束垂直相交,被熒光染料染色的細(xì)胞受到激光激發(fā)產(chǎn)生熒光信號(hào)和散射光信號(hào),這些光信號(hào)通過(guò)波長(zhǎng)選擇的濾光片,由相應(yīng)的光電管和電子檢測(cè)器接收并轉(zhuǎn)換成電信號(hào),經(jīng)放大器放大后送入計(jì)算機(jī)并進(jìn)行分析顯示和結(jié)果輸出,測(cè)定的結(jié)果常用單參數(shù)直方圖、雙參數(shù)散點(diǎn)圖、輪廓(等高)圖和三維立體圖來(lái)表示。

使用熒光核酸染料標(biāo)記植物中DNA含量,隨后用流式細(xì)胞儀高通量進(jìn)行植物倍性分析,已經(jīng)成為植物研究中的常用分析手段[1]。相較傳統(tǒng)的根尖壓片染色體計(jì)數(shù),流式細(xì)胞法制備樣本簡(jiǎn)單,無(wú)需制備中期染色體,通量高,結(jié)果準(zhǔn)確,并且可以兼容幾乎所有植物的任何組織。使用Sysmex-Partec原廠倍性分析試劑和CellTrics過(guò)濾器,只需要:1、切碎2、過(guò)濾3、上機(jī)三步,2分鐘內(nèi)完成倍性分析實(shí)驗(yàn)。使用Sysmex-Partec CyFlow PA對(duì)植株基因組大小進(jìn)行預(yù)測(cè),染色體倍性進(jìn)行預(yù)測(cè),對(duì)突變株進(jìn)行倍性鑒定,構(gòu)建植物進(jìn)化樹(shù)。我們使用流式細(xì)胞術(shù)和成像流式細(xì)胞術(shù)分析了 10 色雙等位基因 Confetti 報(bào)告基因。

CyFlow Ploidy Analyser Demo倍性分析儀注意事項(xiàng):1、儀器的外殼不要隨意打開(kāi);、2實(shí)驗(yàn)樣品的前處理要和儀器盡量避開(kāi),比方液體飛濺損傷儀器;3、上機(jī)操作請(qǐng)一定要進(jìn)行應(yīng)用培訓(xùn),或者請(qǐng)參加過(guò)培訓(xùn)的老師、同學(xué)進(jìn)行指導(dǎo),切不可單獨(dú)上機(jī);、4制作好預(yù)約流程,盡量避免一日之內(nèi)重復(fù)開(kāi)機(jī),并做好實(shí)驗(yàn)上機(jī)記錄,以更好的評(píng)估儀器的使用情況;5、如果操作過(guò)程中出現(xiàn)堵孔現(xiàn)象,啟動(dòng)清洗功能,并重新用超純水沖洗2min;6、將儀器的操作手冊(cè)、光路圖及部件做好詳細(xì)表格標(biāo)注,放在實(shí)驗(yàn)室明顯的地方,方便使用者查閱;7、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)在進(jìn)行拷貝時(shí),盡量不要使用自帶的優(yōu)盤(pán),較好外接一個(gè)光驅(qū),將數(shù)據(jù)拷貝在光盤(pán)中,如果實(shí)驗(yàn)條件有限,應(yīng)在使用前將優(yōu)盤(pán)進(jìn)行格式化后方可操作。流式倍性分析儀是一種用于生物學(xué)、農(nóng)學(xué)、林學(xué)領(lǐng)域的分析儀器。華南地區(qū)高精確性倍性分析儀原理

CyFlow Analyser倍性分析儀具有直觀強(qiáng)大的FCM軟件系統(tǒng),較小設(shè)定時(shí)間。山東倍性分析儀配套試劑

擬南芥是一種生長(zhǎng)迅速的小型植物,可進(jìn)行范圍廣的核內(nèi)復(fù)制,在不發(fā)生有絲分裂的情況下進(jìn)行基因組擴(kuò)增。該物種含有有花植物中較小的基因組,約157Mb,C值為0.321pg。這些特征使得擬南芥特別適合作為測(cè)定基因組大小的內(nèi)參,并且可以用于儀器線性度的質(zhì)量控制。用于流式實(shí)驗(yàn)的植物樣品通常只需少量植物組織。使用標(biāo)準(zhǔn)手術(shù)刀片將植物組織切碎并浸泡于緩沖液中,過(guò)濾含植物細(xì)胞核的勻漿以去除大的碎片,用DNA特異性熒光染料進(jìn)行標(biāo)記,然后在流式細(xì)胞儀上采集數(shù)據(jù),根據(jù)每個(gè)細(xì)胞核的熒光強(qiáng)度來(lái)計(jì)算DNA含量。通過(guò)與已知標(biāo)準(zhǔn)品比較,可以用熒光強(qiáng)度換算出DNA含量的相對(duì)值。擬南芥通常用作內(nèi)參,只需將內(nèi)參樣品和未知樣品的細(xì)胞核同時(shí)進(jìn)行分離、染色和分析即可。山東倍性分析儀配套試劑

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