SD大鼠MCAO模型作為世界上*通用的模型之一,在其制作時為了達(dá)成較高的成功率也需要不斷的探索和努力,我們再次總結(jié)了難點和問題點,希望這篇文章可以為大家制備模型提供參考。 (1)麻醉時間,麻醉程度適中,過淺影響操作,過深導(dǎo)致死亡。 (2)血管分離,在分離右側(cè)CCA、ECA、ICA時,要注意迷走神經(jīng)的保護(hù), 減少對迷走神經(jīng)的損傷, 盡量避免對迷走神經(jīng)的直接牽拉。 (3)術(shù)中狀態(tài)監(jiān)護(hù),例如發(fā)現(xiàn)呼吸異常,用鑷子將大鼠舌頭牽拉至嘴角一側(cè),防止舌頭根部堵塞呼吸道出現(xiàn)窒息情況。 (4)手術(shù)視野,可以制備金屬勾,用橡皮筋纏繞連結(jié)金屬鉤固定在固定板上,從而使手術(shù)切口左右上下拉開,擴(kuò)大手術(shù)視野。通過制備腦局部缺血再灌注損傷動物模型研究腦缺血再灌注損傷的作用機(jī)制已成為國內(nèi)外的研究熱點。北京艾菱菲生物腦梗MCAO模型水迷宮
TTC染色如何測定腦梗MCAO面積-TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是呼吸鏈中吡啶—核苷結(jié)構(gòu)酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體,與正常組織中的脫氫酶反應(yīng)而呈紅色,而缺血組織內(nèi)脫氫酶活性下降,不能反應(yīng),故不會產(chǎn)生變化呈蒼白。將模型動物大鼠安樂死,解剖取材完整的腦組織,在-20℃速凍20min,便于切片。切片切成6片,每隔2mm切一片。將切片至于2%TTC磷酸緩沖液(PH 7.4)溶液中,用錫箔紙蓋住培養(yǎng)皿,放入37℃溫箱30min,15min后翻動腦切片,使其均勻接觸到染液。北京線栓法腦梗MCAO模型市場價格當(dāng)阻斷血管達(dá)到120 min或更長時間時,會影響下丘腦的供血,導(dǎo)致自發(fā)性高熱,影響實驗結(jié)果。
腦卒中具有發(fā)病率高、病死率高、殘疾率高及復(fù)發(fā)率高的特點。其中缺血性腦卒中的發(fā)病率高于出血性腦卒中,占腦卒中總數(shù)的 60% ~ 70%。缺血性腦卒中引起的組織損傷是主要的致死原因,但研究發(fā)現(xiàn),缺血后再灌注引起的過量氧自由基是造成組織損傷的主要因素。 通過制備腦局部缺血再灌注損傷動物模型研究腦缺血再灌注損傷的作用機(jī)制已成為國內(nèi)外的研究熱點。線栓法是*常用的腦局部缺血再灌注損傷模型制備方法,此方法不需要開顱且不需要呼吸機(jī)等儀器輔助,缺血部位較恒定,能夠準(zhǔn)確控制缺血及再灌注時間,容易控制局部條件,全身影響小,是制作腦局部缺血再灌注損傷模型*理想的方法。
小鼠缺血性腦梗死模型在藥物開發(fā)方面具有重要應(yīng)用。通過模擬腦梗死的發(fā)病過程,可以評估各種潛在藥物的治*效果,篩選出具有療效的藥物進(jìn)行臨床試驗。同時,模型還可以用于研究藥物的副作用和毒性,為藥物的安全性和有效性提供評估依據(jù)。神經(jīng)康復(fù),小鼠缺血性腦梗死模型在神經(jīng)康復(fù)方面也有重要應(yīng)用。通過觀察模型中神經(jīng)細(xì)胞的再生和修復(fù)過程,可以了解神經(jīng)康復(fù)的機(jī)制,為制定有效的康復(fù)方案提供理論支持。同時,模型還可以用于評估各種康復(fù)手段的效果,為臨床實踐提供指導(dǎo)。線栓法是*常用的腦局部缺血再灌注損傷模型制備方法,此方法不需要開顱且不需要呼吸機(jī)。
局灶性缺血模型/線栓法引起的大腦中動脈栓塞(Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO)由于大(?。┦竽X血管解剖結(jié)構(gòu)與人類相似,大腦中動脈也是臨床缺血性卒中的高發(fā)部位,同時,采用線栓法也便于觀察缺血和再灌注、永jiu(持續(xù))和短暫性損傷等多種狀態(tài),在評價藥物量效關(guān)系和確認(rèn)治*時間窗等方面有一定優(yōu)勢,因此,MCAO是目前*廣為接受一種藥效模型。神經(jīng)元尼氏體與細(xì)胞核呈藍(lán)紫色,背景呈淺藍(lán)色。結(jié)果顯示:假手術(shù)組海馬 CA1 區(qū)神經(jīng)元排列規(guī)整,神經(jīng)元胞體及樹突內(nèi)尼氏體豐富;實驗組神經(jīng)元排列紊亂,并伴有細(xì)胞水腫和壞死發(fā)生,尼氏體染色較淺,模糊不清;陽性*組神經(jīng)元尼氏體排列較為規(guī)整,偶見神經(jīng)細(xì)胞水腫,和溶解。在實驗中,研究人員會觀察動物的行為表現(xiàn),例如運(yùn)動協(xié)調(diào)能力、平衡能力等,以評估神經(jīng)功能缺損的程度。小鼠腦梗MCAO模型模型檢測
將動物放在一個旋轉(zhuǎn)的木棒上,觀察動物是否能保持平衡,以評估動物的平衡能力和協(xié)調(diào)性。北京艾菱菲生物腦梗MCAO模型水迷宮
腦梗MCAO模型成功后,水迷宮在Morris水迷宮獲得性訓(xùn)練、探查訓(xùn)練和對位訓(xùn)練中,各組間大鼠游泳潛伏期、游泳距離和游泳速度指標(biāo)均無顯*差異。對位探查訓(xùn)練中,與假手術(shù)組相比,模型組大鼠平臺所在象限時間百分比、平臺所在象限時間和進(jìn)入平臺所在象限次數(shù)均顯*減小(P<0.05,P<0.01); 曠場試驗曠場實驗結(jié)果顯示:與假手術(shù)組相比,模型組大鼠穿越格子數(shù)顯*增加(P<0.05);與模型組相比,陽性*組大鼠穿越格子數(shù)顯*減少(P<0.01)。各組大鼠后肢站立次數(shù)和中*格停留時間均無顯*差異。北京艾菱菲生物腦梗MCAO模型水迷宮