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迄今為止,缺血性腦卒中模型覆蓋各種小型動(dòng)物(小鼠,大鼠等)和較大型動(dòng)物(兔、犬、豬、猴等),并應(yīng)用于卒中治*藥物的臨床前藥理藥效研究。然而,自1970年代以來,大量在動(dòng)物模型上得到驗(yàn)證的受試藥物均未能在人體臨床試驗(yàn)中獲得理想的治*效果,可能原因包括:1)以往相對簡單的動(dòng)物模型不能準(zhǔn)確模擬人類卒中的病理生理過程;2)臨床前動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的藥效評(píng)價(jià)方法尚難以成功轉(zhuǎn)化到復(fù)雜的人體臨床試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。2009年國際公認(rèn)的“腦卒中治*學(xué)術(shù)工業(yè)圓桌會(huì)議”(Stroke Therapy Academic industry Roundtable,STAIR)發(fā)布了臨床前缺血性腦卒中藥物研發(fā)準(zhǔn)則,提出提高臨床前藥理藥效研究質(zhì)量的具體要求。近年來隨著更深入的基礎(chǔ)研究發(fā)現(xiàn),更多符合人類發(fā)病機(jī)理和病理生理過程的缺血性腦卒中動(dòng)物模型已被開發(fā)。腦梗MCAO模型是一種常用的腦梗動(dòng)物模型,用于研究腦梗死的發(fā)病機(jī)制和治*方法。上海艾菱菲生物腦梗MCAO模型周期短
TTC染色如何測定腦梗MCAO面積-TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是呼吸鏈中吡啶—核苷結(jié)構(gòu)酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體,與正常組織中的脫氫酶反應(yīng)而呈紅色,而缺血組織內(nèi)脫氫酶活性下降,不能反應(yīng),故不會(huì)產(chǎn)生變化呈蒼白。將模型動(dòng)物大鼠安樂死,解剖取材完整的腦組織,在-20℃速凍20min,便于切片。切片切成6片,每隔2mm切一片。將切片至于2%TTC磷酸緩沖液(PH 7.4)溶液中,用錫箔紙蓋住培養(yǎng)皿,放入37℃溫箱30min,15min后翻動(dòng)腦切片,使其均勻接觸到染液。上海艾菱菲生物腦梗MCAO模型周期短腦缺血是指由腦內(nèi)血流量突然減少或代謝速率速增所致腦血流無法滿足正常代謝需求的病理狀態(tài),可導(dǎo)致腦損傷。
腦梗MCAO模型是一種常用的腦梗動(dòng)物模型,用于研究腦梗死的發(fā)病機(jī)制和治*方法。 行為學(xué)檢測是評(píng)估腦梗MCAO模型動(dòng)物行為變化的一種方法,通過觀察動(dòng)物的行為表現(xiàn),可以評(píng)估腦梗死后對動(dòng)物認(rèn)知、運(yùn)動(dòng)、情感等方面的影響。 在腦梗MCAO模型的行為學(xué)檢測中,常用的方法包括: 1. 神經(jīng)功能缺損評(píng)分:通過觀察動(dòng)物的行為表現(xiàn),對動(dòng)物的神經(jīng)功能缺損程度進(jìn)行評(píng)分,以評(píng)估腦梗死后對動(dòng)物神經(jīng)功能的影響。 2. 轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn):將動(dòng)物放在一個(gè)旋轉(zhuǎn)的木棒上,觀察動(dòng)物是否能保持平衡,以評(píng)估動(dòng)物的平衡能力和協(xié)調(diào)性。 3. 爬梯實(shí)驗(yàn):將動(dòng)物放在一個(gè)有階梯的平臺(tái)上,觀察動(dòng)物是否能順利爬上爬下,以評(píng)估動(dòng)物的肢體運(yùn)動(dòng)能力和協(xié)調(diào)性。 4. 認(rèn)知功能檢測:通過迷宮實(shí)驗(yàn)、水迷宮實(shí)驗(yàn)等,評(píng)估動(dòng)物的認(rèn)知功能是否受到影響。
局灶性缺血模型/線栓法引起的大腦中動(dòng)脈栓塞(Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO)由于大(小)鼠腦血管解剖結(jié)構(gòu)與人類相似,大腦中動(dòng)脈也是臨床缺血性卒中的高發(fā)部位,同時(shí),采用線栓法也便于觀察缺血和再灌注、永jiu(持續(xù))和短暫性損傷等多種狀態(tài),在評(píng)價(jià)藥物量效關(guān)系和確認(rèn)治*時(shí)間窗等方面有一定優(yōu)勢,因此,MCAO是目前*廣為接受一種藥效模型。將尼龍線由大(?。┦蟮念i外動(dòng)脈(ECA)插入,經(jīng)頸內(nèi)動(dòng)脈(ECA)阻斷一側(cè)MCA起始端,導(dǎo)致一側(cè)(局灶性)腦缺血。術(shù)后再使用激光散斑血流儀或多普勒血流儀對造模效果進(jìn)行驗(yàn)證和確認(rèn)。頸部備皮常規(guī)消毒,取頸正中切口剪開皮膚,分離皮膚下軟組織并暴露頸動(dòng)脈鞘。
小鼠缺血性腦梗死模型在推動(dòng)我國腦科學(xué)研究的發(fā)展方面具有重要作用。通過這一模型,可以深入了解腦科學(xué)的各個(gè)方面,為神經(jīng)精神疾病的防治提供有力支持。同時(shí),模型還可以用于研究其他神經(jīng)性疾病的發(fā)病機(jī)制和治*方法,為我國神經(jīng)科學(xué)的發(fā)展做出貢獻(xiàn)。 總之,小鼠缺血性腦梗死模型在研究腦梗死發(fā)病機(jī)制、藥物開發(fā)、神經(jīng)康復(fù)以及推動(dòng)我國腦科學(xué)研究的發(fā)展等方面具有重要意義。隨著科技的進(jìn)步和研究的深入,我們相信這一模型將會(huì)為人類缺血性腦梗死的防治帶來更多突破性進(jìn)展,提高患者的生活質(zhì)量和生存率。同時(shí),這一模型也將有助于推動(dòng)我國神經(jīng)科學(xué)研究的快速發(fā)展,為神經(jīng)精神疾病的防治貢獻(xiàn)力量。當(dāng)阻斷血管達(dá)到120 min或更長時(shí)間時(shí),會(huì)影響下丘腦的供血,導(dǎo)致自發(fā)性高熱,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。上海腦局部缺血再灌注損傷腦梗MCAO模型TTC染色
小鼠缺血性腦梗死模型在神經(jīng)科學(xué)研究中具有重要意義。上海艾菱菲生物腦梗MCAO模型周期短
小鼠缺血性腦梗死模型在藥物開發(fā)方面具有重要應(yīng)用。通過模擬腦梗死的發(fā)病過程,可以評(píng)估各種潛在藥物的治*效果,篩選出具有療效的藥物進(jìn)行臨床試驗(yàn)。同時(shí),模型還可以用于研究藥物的副作用和毒性,為藥物的安全性和有效性提供評(píng)估依據(jù)。神經(jīng)康復(fù),小鼠缺血性腦梗死模型在神經(jīng)康復(fù)方面也有重要應(yīng)用。通過觀察模型中神經(jīng)細(xì)胞的再生和修復(fù)過程,可以了解神經(jīng)康復(fù)的機(jī)制,為制定有效的康復(fù)方案提供理論支持。同時(shí),模型還可以用于評(píng)估各種康復(fù)手段的效果,為臨床實(shí)踐提供指導(dǎo)。上海艾菱菲生物腦梗MCAO模型周期短