腦梗MCAO模型成功的評(píng)判方法 生物化學(xué)指標(biāo)的檢測(cè):在實(shí)驗(yàn)過程中,檢測(cè)血清中C反應(yīng)蛋白(CRP)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)等生物化學(xué)指標(biāo)的變化。這些指標(biāo)可以反映炎癥反應(yīng)和缺血損傷的程度,有助于評(píng)估模型的成功。 病理學(xué)檢查:實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的大腦進(jìn)行病理學(xué)檢查。觀察大腦皮質(zhì)和海馬區(qū)的細(xì)胞形態(tài)、排列情況,評(píng)估神經(jīng)細(xì)胞的損傷程度。同時(shí),通過免疫組化染色法檢測(cè)神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)的表達(dá),以評(píng)估神經(jīng)元損傷的程度。 行為學(xué)評(píng)估:在實(shí)驗(yàn)過程中,對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行行為學(xué)評(píng)估,如Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)、步態(tài)分析等。通過比較不同處理組的行為學(xué)表現(xiàn),評(píng)估模型的成功。 綜上所述,評(píng)判腦梗MCAO模型成功的標(biāo)準(zhǔn)包括腦梗死面積、神經(jīng)功能缺損評(píng)分、梗死血管、生物化學(xué)指標(biāo)、病理學(xué)檢查和行為學(xué)評(píng)估等方面。只有當(dāng)這些指標(biāo)均符合預(yù)期結(jié)果時(shí),才能認(rèn)為模型制備成功。線栓法是*常用的腦局部缺血再灌注損傷模型制備方法,此方法不需要開顱且不需要呼吸機(jī)。北京動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)X梗MCAO模型
迄今為止,缺血性腦卒中模型覆蓋各種小型動(dòng)物(小鼠,大鼠等)和較大型動(dòng)物(兔、犬、豬、猴等),并應(yīng)用于卒中治*藥物的臨床前藥理藥效研究。然而,自1970年代以來,大量在動(dòng)物模型上得到驗(yàn)證的受試藥物均未能在人體臨床試驗(yàn)中獲得理想的治*效果,可能原因包括:1)以往相對(duì)簡(jiǎn)單的動(dòng)物模型不能準(zhǔn)確模擬人類卒中的病理生理過程;2)臨床前動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的藥效評(píng)價(jià)方法尚難以成功轉(zhuǎn)化到復(fù)雜的人體臨床試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。2009年國(guó)際公認(rèn)的“腦卒中治*學(xué)術(shù)工業(yè)圓桌會(huì)議”(Stroke Therapy Academic industry Roundtable,STAIR)發(fā)布了臨床前缺血性腦卒中藥物研發(fā)準(zhǔn)則,提出提高臨床前藥理藥效研究質(zhì)量的具體要求。近年來隨著更深入的基礎(chǔ)研究發(fā)現(xiàn),更多符合人類發(fā)病機(jī)理和病理生理過程的缺血性腦卒中動(dòng)物模型已被開發(fā)。北京定制腦梗MCAO模型市場(chǎng)價(jià)格在實(shí)驗(yàn)過程中,應(yīng)建立嚴(yán)格的質(zhì)量控制體系,包括實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范、數(shù)據(jù)記錄和分析等環(huán)節(jié)。
缺血性腦卒中/腦梗對(duì)人類健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅,是全國(guó)和全球范圍內(nèi)死亡和身體傷害的第三大原因。中風(fēng)的高發(fā)病率、殘疾率和死亡率給家庭和社會(huì)帶來了沉重的負(fù)擔(dān)。為了有效地選擇治*缺血性中風(fēng)的藥物,提高治*率和康復(fù)率,建立接近人類梗死的大腦中動(dòng)脈閉塞(MCAO)再灌注模型一直是研究人員面臨的挑戰(zhàn),而使用穩(wěn)定的動(dòng)物模型是研究此類疾病的*重要工具之一。本文從實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇、線栓材料的選擇、線栓的制作和加工、外部環(huán)境和手術(shù)的影響等方面介紹了研究SD大鼠大腦缺血再灌注實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型制作的全部過程,為科研工作者提供長(zhǎng)期穩(wěn)定的SD大鼠大腦缺血再灌注模型,并*終提高實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的成功率和可行性。
局灶性缺血模型/線栓法引起的大腦中動(dòng)脈栓塞(Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO)由于大(?。┦竽X血管解剖結(jié)構(gòu)與人類相似,大腦中動(dòng)脈也是臨床缺血性卒中的高發(fā)部位,同時(shí),采用線栓法也便于觀察缺血和再灌注、永jiu(持續(xù))和短暫性損傷等多種狀態(tài),在評(píng)價(jià)藥物量效關(guān)系和確認(rèn)治*時(shí)間窗等方面有一定優(yōu)勢(shì),因此,MCAO是目前*廣為接受一種藥效模型。將尼龍線由大(?。┦蟮念i外動(dòng)脈(ECA)插入,經(jīng)頸內(nèi)動(dòng)脈(ECA)阻斷一側(cè)MCA起始端,導(dǎo)致一側(cè)(局灶性)腦缺血。術(shù)后再使用激光散斑血流儀或多普勒血流儀對(duì)造模效果進(jìn)行驗(yàn)證和確認(rèn)。手術(shù)有一定技術(shù)難度,血管結(jié)扎不緊或結(jié)扎線脫落,會(huì)出血導(dǎo)致病理生理狀態(tài)改變或增加死亡。
腦梗MCAO模型成功的評(píng)判方法主要包括以下幾個(gè)方面: 1.腦梗死面積的評(píng)估:通過TTC(2%,17分鐘)染色法對(duì)腦梗死面積進(jìn)行分析和量化。在染色后,利用ImageJ圖像分析軟件對(duì)切片進(jìn)行處理,從而得到腦梗死面積的數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)過程中,通過比較不同處理組之間的腦梗死面積,可以評(píng)估模型的成功率。 2.神經(jīng)功能缺損評(píng)分:參照Z(yǔ)ea-Longa評(píng)分標(biāo)準(zhǔn),對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在再灌注期內(nèi)的神經(jīng)功能進(jìn)行評(píng)估。評(píng)分越高,表示神經(jīng)功能缺損越嚴(yán)重。通過對(duì)不同處理組的神經(jīng)功能缺損評(píng)分進(jìn)行比較,可以進(jìn)一步驗(yàn)證模型的成功。 3.梗死血管的觀察:通過激光多普勒血流儀檢測(cè)相對(duì)腦血流動(dòng)脈減少情況,評(píng)估梗死血管的狹窄程度。同時(shí),觀察血管造影劑在梗死區(qū)域的分布情況,以判斷血管阻塞的效果。采用Longa等的5級(jí)4分法標(biāo)準(zhǔn)對(duì)模型動(dòng)物進(jìn)行評(píng)價(jià)。上海國(guó)內(nèi)腦梗MCAO模型手術(shù)造模
實(shí)驗(yàn)外包團(tuán)隊(duì)他們可以幫助科研人員制定實(shí)驗(yàn)方案、優(yōu)化實(shí)驗(yàn)流程、提高實(shí)驗(yàn)效率等。北京動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)X梗MCAO模型
局灶性缺血模型/線栓法引起的大腦中動(dòng)脈栓塞(Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO)由于大(小)鼠腦血管解剖結(jié)構(gòu)與人類相似,大腦中動(dòng)脈也是臨床缺血性卒中的高發(fā)部位,同時(shí),采用線栓法也便于觀察缺血和再灌注、永jiu(持續(xù))和短暫性損傷等多種狀態(tài),在評(píng)價(jià)藥物量效關(guān)系和確認(rèn)治*時(shí)間窗等方面有一定優(yōu)勢(shì),因此,MCAO是目前*廣為接受一種藥效模型。神經(jīng)元尼氏體與細(xì)胞核呈藍(lán)紫色,背景呈淺藍(lán)色。結(jié)果顯示:假手術(shù)組海馬 CA1 區(qū)神經(jīng)元排列規(guī)整,神經(jīng)元胞體及樹突內(nèi)尼氏體豐富;實(shí)驗(yàn)組神經(jīng)元排列紊亂,并伴有細(xì)胞水腫和壞死發(fā)生,尼氏體染色較淺,模糊不清;陽(yáng)性*組神經(jīng)元尼氏體排列較為規(guī)整,偶見神經(jīng)細(xì)胞水腫,和溶解。北京動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)X梗MCAO模型