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動(dòng)物卒中模型的制作也是臨床前實(shí)驗(yàn)研究的前提,缺血性卒中的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)P途哂嗅槍?duì)性與多樣性的特點(diǎn),并被不斷地進(jìn)行改進(jìn)與創(chuàng)新,力爭(zhēng)制作的動(dòng)物模型能無限接近真實(shí)的人類腦卒中。目前,大鼠、小鼠、猿、猴、犬、兔、羊、豬等多種動(dòng)物被用于制備局灶性腦缺血模型。線栓法、開顱法、栓子栓塞法、光化學(xué)法、FeCl3誘導(dǎo)法、內(nèi)皮素-1誘導(dǎo)法和自發(fā)性卒中法為常用方法,其中線栓法大腦中動(dòng)脈栓塞(MCAO)為制作局灶性缺血卒中模型*常用的方法。 小鼠缺血性腦梗死模型也為神經(jīng)康復(fù)研究提供了有力支持。南京本地腦梗MCAO模型造模方法
腦卒中具有發(fā)病率高、病死率高、殘疾率高及復(fù)發(fā)率高的特點(diǎn)。其中缺血性腦卒中的發(fā)病率高于出血性腦卒中,占腦卒中總數(shù)的 60% ~ 70%。缺血性腦卒中引起的組織損傷是主要的致死原因,但研究發(fā)現(xiàn),缺血后再灌注引起的過量氧自由基是造成組織損傷的主要因素。 通過制備腦局部缺血再灌注損傷動(dòng)物模型研究腦缺血再灌注損傷的作用機(jī)制已成為國(guó)內(nèi)外的研究熱點(diǎn)。線栓法是*常用的腦局部缺血再灌注損傷模型制備方法,此方法不需要開顱且不需要呼吸機(jī)等儀器輔助,缺血部位較恒定,能夠準(zhǔn)確控制缺血及再灌注時(shí)間,容易控制局部條件,全身影響小,是制作腦局部缺血再灌注損傷模型*理想的方法。上海定制腦梗MCAO模型研究方案麻醉時(shí)間,麻醉程度適中,過淺影響操作,過深導(dǎo)致死亡。
1、大腦中動(dòng)脈阻塞(MCAO)模型-嚙齒類 誘導(dǎo)方式:線栓法堵塞大腦中動(dòng)脈動(dòng)物種屬:大鼠模型特征:模型可高度再現(xiàn)的MCA梗死、具有明確的缺血半暗帶(有梗死風(fēng)險(xiǎn)但潛在可恢復(fù)的低灌注組織)、可再現(xiàn)的感覺運(yùn)動(dòng)和認(rèn)知缺陷、可用于評(píng)估神經(jīng)保護(hù)藥物、不適合溶栓藥物研究、動(dòng)物會(huì)有死亡,尤其是缺血時(shí)間越長(zhǎng)時(shí)、分缺血再灌注模型和永jiu缺血模型 缺血再灌注模型與永jiu梗死模型差別:缺血再灌注模型包括原發(fā)性腦組織損傷和缺氧再灌注后由能量代謝紊亂引起的繼發(fā)性損傷,兩種損傷之間存在時(shí)間差;永jiu梗死模型無此特征、永jiu梗死模型梗死核*區(qū)相比缺血再灌注模型更大,缺血半暗帶可能更小、永jiu梗死模型動(dòng)物死亡率相對(duì)更高
通過神經(jīng)功能缺損評(píng)分,研究人員可以定量地評(píng)估腦梗死后對(duì)動(dòng)物神經(jīng)功能的影響。這對(duì)于研究腦梗死的病理過程、治*方法以及藥物效果具有重要的意義。同時(shí),這種評(píng)分方法也可以為臨床醫(yī)生提供參考,幫助他們更好地評(píng)估患者的神經(jīng)功能缺損程度。 需要注意的是,神經(jīng)功能缺損評(píng)分只是一種評(píng)估方法,不能完全戴*動(dòng)物的神經(jīng)功能狀態(tài)。因此,在實(shí)驗(yàn)中還需要結(jié)合其他指標(biāo)和方法進(jìn)行綜合評(píng)估。此外,由于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的個(gè)體差異和環(huán)境因素的影響,實(shí)驗(yàn)結(jié)果也可能存在一定的誤差。因此,在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究時(shí)需要嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件和操作過程,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。在成功建立小鼠腦梗模型后,認(rèn)知功能的檢測(cè)可以通過以下方法進(jìn)行: 1. 迷宮測(cè)試:這是一個(gè)常用的方法,通過讓小鼠在迷宮中尋找食物,觀察其尋找食物的速度和正確性,來評(píng)估其認(rèn)知功能。 2. 物體識(shí)別測(cè)試:給小鼠展示兩個(gè)相似的物體,觀察其是否能夠正確識(shí)別并記住這兩個(gè)物體。 3. 社交互動(dòng)測(cè)試:觀察小鼠與其他小鼠的互動(dòng)情況,包括是否能夠正確識(shí)別其他小鼠,以及是否能夠進(jìn)行正常的社交行為。 這些測(cè)試可以幫助評(píng)估小鼠的認(rèn)知功能,從而了解腦梗對(duì)其認(rèn)知功能的影響。行為學(xué)檢測(cè)是評(píng)估腦梗MCAO模型動(dòng)物行為變化的一種方法。
小鼠缺血性腦梗死模型在藥物開發(fā)方面具有重要應(yīng)用。通過模擬腦梗死的發(fā)病過程,可以評(píng)估各種潛在藥物的治*效果,篩選出具有療效的藥物進(jìn)行臨床試驗(yàn)。同時(shí),模型還可以用于研究藥物的副作用和毒性,為藥物的安全性和有效性提供評(píng)估依據(jù)。神經(jīng)康復(fù),小鼠缺血性腦梗死模型在神經(jīng)康復(fù)方面也有重要應(yīng)用。通過觀察模型中神經(jīng)細(xì)胞的再生和修復(fù)過程,可以了解神經(jīng)康復(fù)的機(jī)制,為制定有效的康復(fù)方案提供理論支持。同時(shí),模型還可以用于評(píng)估各種康復(fù)手段的效果,為臨床實(shí)踐提供指導(dǎo)。血管分離,在分離右側(cè)CCA、ECA、ICA時(shí),要注意迷走神經(jīng)的保護(hù), 減少對(duì)迷走神經(jīng)的損傷。國(guó)內(nèi)腦梗MCAO模型行為學(xué)檢測(cè)
進(jìn)一步研究小鼠缺血性腦梗死模型,科學(xué)家們可以深入了解腦梗死的發(fā)病機(jī)制、病理生理過程以及神經(jīng)功能損害。南京本地腦梗MCAO模型造模方法
檢測(cè)方法 造模完成后等待大鼠蘇醒,依據(jù)Zea longa 5分制標(biāo)準(zhǔn)篩選出2分或3分的腦缺血模型進(jìn)入后續(xù)實(shí)驗(yàn)。0分:無神經(jīng)功能缺損癥狀,活動(dòng)正常;1分:不能伸展對(duì)側(cè)前爪;2分:爬行時(shí)出現(xiàn)向左轉(zhuǎn)圈;3分:行走時(shí)身體向偏癱側(cè)傾倒;4分:不能自發(fā)行走,意識(shí)喪失。行為學(xué)指標(biāo)目前常采用跳臺(tái)法、避暗法、穿梭箱法來測(cè)定動(dòng)物一次性被動(dòng)回避反射能力 ; Y 形水迷宮實(shí)驗(yàn)、Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)等測(cè)定動(dòng)物空間分辨學(xué)習(xí)記憶能力。研究血管性癡呆、腦卒中抑郁癥等可以選擇曠場(chǎng)試驗(yàn)作為行為學(xué)檢測(cè)指標(biāo)之一。病理檢測(cè)常用HE染色觀察組織水腫炎癥反應(yīng)等,尼氏染色可以反應(yīng)神經(jīng)元細(xì)胞情況。南京本地腦梗MCAO模型造模方法