改良愛德華培養(yǎng)基(ModifiedEdwardsMedium,M-EMedium)是一種用于微生物學(xué)中選擇性分離和培養(yǎng)特定細菌的培養(yǎng)基,特別是設(shè)計用于分離和培養(yǎng)無乳鏈球菌(Streptococcusagalactiae)以及其他參與牛乳腺炎的鏈球菌。以下是改良愛德華培養(yǎng)基的一些特點:1.**成分**:通常包含特殊蛋白胨、牛肉浸粉、氯化鈉、瓊脂、七葉苷和結(jié)晶紫等。這些成分為細菌提供必要的營養(yǎng)和生長環(huán)境,同時提供選擇性壓力,有助于目標細菌的生長。2.**選擇性**:結(jié)晶紫和硫酸鹽作為選擇性抑制劑,有助于抑制非目標細菌的生長,使得目標細菌更容易被分離和培養(yǎng)。3.**指示性**:七葉苷作為指示劑,可以被某些細菌水解,產(chǎn)生黑色沉淀,有助于識別特定菌株。4.**應(yīng)用**:主要用于牛乳腺炎鏈球菌的選擇性分離培養(yǎng),也可用于其他鏈球菌的分離和鑒定。5.**制備方法**:將培養(yǎng)基粉末溶解在蒸餾水中,加熱煮沸至完全溶解,然后進行高壓滅菌。滅菌后冷卻至適宜溫度,加入無菌脫纖維羊血和無菌硫酸亞鉈,充分搖勻后傾注于無菌平皿中。6.**儲存條件**:通常建議在陰涼干燥的條件下儲存,以保持其穩(wěn)定性和有效性。在使用MEE肉湯進行實驗前,需要進行微生物靈敏度試驗,以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合要求。胰膘肉湯
SSM瓊脂是一種強選擇性培養(yǎng)基,其成分包括胨、牛肉膏等氮、碳源,以及其他選擇性抑制劑和緩沖劑。這種培養(yǎng)基的設(shè)計旨在分離致病的沙門氏菌和志賀氏菌。以下是SSM瓊脂的一些關(guān)鍵特點和制備方法:1.**成分**:SSM瓊脂的基礎(chǔ)成分包括牛肉膏、蛋白胨、酵母膏粉等,這些提供碳源、氮源、維生素和礦物質(zhì)。此外,還含有乳糖、三號膽鹽、枸櫞酸鈉、硫代硫酸鈉、枸櫞酸鐵銨、中性紅和煌綠等特殊成分,這些成分有助于抑制其他微生物的生長,同時促進目標菌的生長。2.**pH值**:SSM瓊脂的pH值通??刂圃?.9-7.1之間,以保證微生物的生長環(huán)境。3.**制備方法**:首先,稱取培養(yǎng)基粉末,加入到適量的蒸餾水中,加熱煮沸并不斷攪拌直至完全溶解。然后,冷卻至50℃左右,傾入無菌平皿中備用。通常不需要高壓滅菌,因為培養(yǎng)基中的某些成分可能在高壓滅菌過程中失去活性。4.**應(yīng)用**:SSM瓊脂主要用于沙門氏菌的分離培養(yǎng),也適用于志賀氏菌、小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌等腸道致病菌的分離培養(yǎng)。在這種培養(yǎng)基上,多數(shù)沙門氏菌不發(fā)酵乳糖,并產(chǎn)硫化氫,菌落表現(xiàn)為無色透明并有黑色中心。大豆酪蛋白消化肉湯KI培養(yǎng)基中含有葡萄糖和乳糖,以及硫酸亞鐵作為指示劑。硫酸亞鐵與硫化氫反應(yīng),生成黑色的硫化亞鐵沉淀。
DCR培養(yǎng)基是一種常用的植物組織培養(yǎng)基,其特點主要包括:1.**營養(yǎng)成分**:DCR培養(yǎng)基通常包含酵母浸膏、酪蛋白水解物、葡萄糖、無機鹽等,這些成分為植物細胞提供碳源、氮源、維生素和生長因子。它是一種天然培養(yǎng)基,來源于動物體液或組織分離提取物,如血漿、血清、雞胚浸出液等。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通??刂圃?.7左右,以保證植物細胞的生長環(huán)境。3.**應(yīng)用**:DCR培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于植物組織培養(yǎng),特別是在針葉樹屬樹種的組織培養(yǎng)中,如油松和馬尾松等。它被用于誘導(dǎo)愈傷組織、懸浮細胞培養(yǎng)以及體細胞胚胎發(fā)生和植株再生。4.**素調(diào)節(jié)**:在DCR培養(yǎng)基中,添加不同的植物素,如2,4-D、6-BA、KT等,可以調(diào)節(jié)植物細胞的生長和分化。例如,通過調(diào)整這些素的濃度,可以有效地誘導(dǎo)油松合子胚產(chǎn)生愈傷組織。5.**制備方法**:DCR培養(yǎng)基的制備包括稱量、溶化、調(diào)pH、過濾、分裝、加塞、包扎、滅菌和無菌檢查等步驟。在配制過程中,需要嚴格按照配方比例添加各種成分,并進行高壓滅菌。6.**儲存條件**:培養(yǎng)基應(yīng)防潮、避光、陰涼處保存。對于需要嚴格滅菌的培養(yǎng)基,如組織培養(yǎng)基,較長時間的貯存必須放在3-6℃的冰箱內(nèi)。
營養(yǎng)肉湯(NutrientBroth,簡稱NB)是一種常用的細菌培養(yǎng)基,它的定義、應(yīng)用和制備方法如下:1.**定義**:營養(yǎng)肉湯,也被稱為普通肉湯,是一種用于細菌類疫苗檢驗的培養(yǎng)基,如作為疫苗雜菌計數(shù)的稀釋液。2.**成分**:營養(yǎng)肉湯的主要成分包括蛋白胨、牛肉膏、氯化鈉和水。蛋白胨和牛肉膏提供氮源、B族維生素、氨基酸和其他生長因子,同時也提供碳源;氯化鈉用于維持培養(yǎng)基的滲透壓。3.**pH值**:營養(yǎng)肉湯的pH值通??刂圃?.2±0.2(25℃)。4.**制備方法**:-將蛋白胨10g、氯化鈉5.0g和牛肉湯加入至1000ml,混合后微熱溶解,然后調(diào)整pH值至7.4-7.6,濾清后分裝并在116℃下滅菌30分鐘。滅菌后的營養(yǎng)肉湯應(yīng)該是淡黃色透明無沉淀的溶液,pH值應(yīng)為7.2-7.4。-另一種配方是:蛋白胨10.0g、牛肉浸出粉3.0g、氯化鈉5.0g和蒸餾水1000ml。將上述成分溶解在蒸餾水中,攪拌均勻后,使用NaOH或HCl調(diào)節(jié)pH至7.2±0.2,然后分裝至三角瓶或試管中,121℃高壓滅菌15分鐘。5.**應(yīng)用**:營養(yǎng)肉湯用于細菌的培養(yǎng),尤其是那些需要豐富營養(yǎng)才能良好生長的細菌。它適合營養(yǎng)需求較高的細菌的生長,但不適用于苛養(yǎng)型微生物。在細菌生化反應(yīng)試驗中,TSI 培養(yǎng)基為研究細菌的代謝途徑和生理特性提供支持。
BTB瓊脂是一種用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基,其特點主要包括:1.**成分**:BTB瓊脂的主要成分包括牛肉膏、蛋白胨、蔗糖、氯化鈉、Teepol和溴麝香草酚藍(BTB)。牛肉膏和蛋白胨提供細菌生長所需的基本營養(yǎng),蔗糖作為可利用的碳源,氯化鈉有助于弧菌的生長并抑制其他細菌,Teepol可抑制多數(shù)革蘭氏陽性菌的生長,BTB作為酸堿指示劑。2.**pH值**:BTB瓊脂的pH值通??刂圃?.8±0.1(25℃)。3.**用途**:BTB瓊脂常用于弧菌的選擇性增菌培養(yǎng),也可以加入瓊脂制成固體培養(yǎng)基,用于弧菌的分離培養(yǎng)。4.**制備方法**:稱取BTB培養(yǎng)基48.1g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝試管,每管5ml,115℃高壓滅菌20分鐘,備用。5.**質(zhì)量控制**:按標簽用法制備培養(yǎng)基,接種質(zhì)控菌株,如創(chuàng)傷弧菌ATCC27562、霍亂弧菌、溶藻弧菌ATCC17749、副溶血性弧菌ATCC17802等,放置36±1℃需氧培養(yǎng)18-24小時。6.**儲存條件**:BTB培養(yǎng)基應(yīng)放置陰涼干燥處保存。7.**注意事項**:BTB指示劑應(yīng)為綠色或藍色溶液,pH在7.1~8.5較適宜,如變?yōu)辄S色或黃綠色,說明pH降低,可滴加少量稀氨水或氫氧化鈉等堿性試劑調(diào)整后即可正常使用。去氧膽酸鈉的存在使得DC培養(yǎng)基對革蘭氏陽性菌具有抑制作用,而對大腸菌群等革蘭氏陰性菌則相對促進其生長。亞硝酸細菌培養(yǎng)基
西蒙氏檸檬酸鹽瓊脂的主要成分有氯化鈉、檸檬酸鈉、磷酸二氫銨、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、溴麝香草酚藍和瓊脂。胰膘肉湯
PK瓊脂培養(yǎng)基是一種用于培養(yǎng)特定微生物的培養(yǎng)基,其特點如下:1.**成分**:PK瓊脂培養(yǎng)基通常包含胰酪蛋白胨、酵母提取物、葡萄糖、氯化鈉、磷酸二氫鉀、瓊脂等基本營養(yǎng)成分,以及可能的添加劑,如抗生物質(zhì)或指示劑,以適應(yīng)特定的培養(yǎng)需求。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通常控制在7.2±0.2(25℃),以保證微生物的生長環(huán)境。3.**選擇性**:PK瓊脂培養(yǎng)基可能含有特定的選擇性添加劑,以促進某些微生物的生長,同時抑制其他不需要的微生物。4.**制備方法**:PK瓊脂培養(yǎng)基的制備通常包括將干燥的培養(yǎng)基粉末與適量的水混合,加熱至瓊脂完全溶解,然后分裝到培養(yǎng)皿或試管中,經(jīng)過高壓滅菌后冷卻凝固。5.**應(yīng)用**:PK瓊脂培養(yǎng)基用于培養(yǎng)和分離特定的微生物,如腸道桿菌等。它也可用于微生物的鑒定,通過觀察菌落形態(tài)、顏色變化和溶血現(xiàn)象等特征。6.**儲存條件**:培養(yǎng)基應(yīng)嚴格按照供應(yīng)商提供的貯存條件、有效期和使用方法進行保存和使用。一般建議平板不超過2周?4周,瓶裝及試管裝培養(yǎng)基不超過3個月?6個月,除非某些標準或?qū)嶒灲Y(jié)果表明保質(zhì)期比上述的更長。胰膘肉湯