薩氏液體培養(yǎng)基SDY(SabouraudDextroseMediumwithYeastExtract)在實(shí)驗(yàn)室中的滅菌方法應(yīng)該遵循以下步驟:1.**稱量培養(yǎng)基**:首先,根據(jù)需要的體積,稱量適量的薩氏液體培養(yǎng)基SDY干粉,通常為60克干粉培養(yǎng)基用于制備1升培養(yǎng)基。2.**溶解**:將稱量好的干粉加入到蒸餾水或去離子水中,加熱并攪拌直至完全溶解。注意,薩氏液體培養(yǎng)基SDY的配方中通常包含蛋白胨10.0g、酵母提取物10.0g、葡萄糖40.0g,pH值控制在6.0±0.2(25℃)。3.**調(diào)整pH值**:在使用前,根據(jù)需要調(diào)整培養(yǎng)基的pH值至7.0,以適應(yīng)的生長條件。4.**分裝**:將溶解并調(diào)整好pH值的培養(yǎng)基分裝到適合的容器中,準(zhǔn)備進(jìn)行滅菌。5.**滅菌**:有兩種推薦的滅菌方法,一種是在121℃下高溫滅菌15分鐘,另一種是在115℃下滅菌20至30分鐘。6.**注意事項(xiàng)**:-滅菌過程中應(yīng)注意無菌操作,避免微生物污染。-滅菌后應(yīng)讓培養(yǎng)基冷卻至室溫,并儲(chǔ)存在適當(dāng)?shù)臈l件下。-使用時(shí)應(yīng)注意個(gè)人防護(hù),穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩,以避免粉塵引起的不適。通過遵循這些步驟,可以確保薩氏液體培養(yǎng)基SDY在實(shí)驗(yàn)室中得到正確的滅菌處理,為培養(yǎng)提供適宜的環(huán)境。TBA培養(yǎng)基中添加的膽汁鹽是其選擇性培養(yǎng)特性的關(guān)鍵因素。膽汁鹽對(duì)革蘭氏陽性細(xì)菌具有抑制作用。枸櫞酸鹽培養(yǎng)基
配制方法堿性瓊脂培養(yǎng)皿的配制步驟通常包括:準(zhǔn)備基礎(chǔ)培養(yǎng)基,包括瓊脂和其他營養(yǎng)成分。調(diào)整pH值至所需的堿性水平,通常pH值在9-11之間。高壓滅菌以確保培養(yǎng)基的無菌狀態(tài)。冷卻至適當(dāng)溫度后,倒入無菌培養(yǎng)皿中,待其凝固。使用方法使用堿性瓊脂培養(yǎng)皿時(shí),應(yīng)將待檢測的樣本接種到培養(yǎng)皿上,然后在適宜的溫度和條件下培養(yǎng)。培養(yǎng)過程中,需要定期觀察微生物的生長情況和菌落形態(tài)。注意事項(xiàng)在配制和使用過程中,應(yīng)小心操作,避免接觸高濃度的堿性物質(zhì)。培養(yǎng)基應(yīng)存放在干燥、避光、清潔的環(huán)境中,以保持其穩(wěn)定性和有效性。堿性瓊脂培養(yǎng)皿是微生物學(xué)研究和應(yīng)用中的一個(gè)重要工具,它有助于深入了解微生物在不同環(huán)境條件下的生長特性和適應(yīng)機(jī)制。25%甘油硝酸鹽瓊脂基礎(chǔ)BCYE瓊脂培養(yǎng)皿在自然光下可以觀察到博茲曼軍團(tuán)菌形成的藍(lán)白色菌落,而在紫外燈照射下則有藍(lán)白熒光 。
MD培養(yǎng)基(MinimalDextroseMedium)是一種常用于畢赤酵母(Pichiapastoris)等微生物的培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**配方成分**:-MD培養(yǎng)基的主要成分包括酵母氮源、無氨基酸和硫酸銨、硫酸銨、D-葡萄糖和瓊脂糖H,還含有G418硫酸鹽用于抗生物質(zhì)的篩選。-具體成分如YNB(酵母氮源基)、D-生物素、D-葡萄糖、腺嘌呤和L-組氨酸等。YNB的具體成分可以參見相關(guān)產(chǎn)品說明。2.**用途**:-MD培養(yǎng)基主要用于畢赤酵母營養(yǎng)缺陷型菌株的轉(zhuǎn)化子篩選,特別是用于篩選his4標(biāo)記和ade2標(biāo)記。適用的酵母菌株包括GS115、X33、KM71、SMD1168、PichiaPinkstrain等。-MDA培養(yǎng)基(MinimalDextroseMedium+Adenine)即含有腺嘌呤的基礎(chǔ)葡萄糖培養(yǎng)基,用于培養(yǎng)腺嘌呤缺陷型畢赤巴斯德酵母,如PichiaPink菌株。-MDH培養(yǎng)基(MinimalDextroseMedium+Histidine)即含組氨酸的基礎(chǔ)葡萄糖培養(yǎng)基,用于培養(yǎng)組氨酸缺陷型畢赤巴斯德酵母。3.**使用方法**:-如用于配置液體培養(yǎng)基,每包含約16.7g,加入500mL水中,磁力攪拌溶解后,過濾除菌即可。-如用于配置固體培養(yǎng)基,每包含約16.7g,加入250mL水中,磁力攪拌溶解后,過濾除菌70℃?zhèn)溆?;配?50mL的4%的瓊脂粉,高壓滅菌70℃水浴備用;按照1:1混合后倒平板即可。
梭桿菌選擇性瓊脂基礎(chǔ)(FusobacteriumSelectiveAgar,FSA)是一種用于梭桿菌選擇性分離和培養(yǎng)的培養(yǎng)基。以下是其主要特點(diǎn):1.**成分**:-梭桿菌選擇性瓊脂基礎(chǔ)的主要成分包括:酪蛋白胨、大豆蛋白胨、組織消化物、葡萄糖、酵母浸粉、氯化鈉、亞硫酸氫鈉、氯化血紅素、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、吐溫80、二硫蘇糖醇和瓊脂等。2.**使用說明**:-稱取53.2克培養(yǎng)基粉末于1升蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸至完全溶解,分裝,121℃高壓滅菌15分鐘或115℃滅菌30分鐘,滅菌結(jié)束后搖勻,以防瓊脂沉積于器皿底部而凝固,備用。-冷至55℃,無菌操作,每100毫升培養(yǎng)基中加入35℃預(yù)熱的脫纖維綿羊血5毫升、萬古霉素0.5毫克、交沙霉素0.3毫克、新霉素10毫克,混勻,傾注平板。3.**產(chǎn)品規(guī)格**:-通常以250克/瓶的形式提供。4.**儲(chǔ)存條件**:-常溫,避光,干燥。5.**應(yīng)用**:-主要用于梭桿菌的選擇性分離和培養(yǎng)。梭桿菌選擇性瓊脂基礎(chǔ)通過添加特定的抗生物質(zhì)和血液,能夠有效抑制其他細(xì)菌的生長,從而促進(jìn)梭桿菌的分離和培養(yǎng)。SDA中添加的物質(zhì)(如氯霉素或慶大霉素)可以抑制細(xì)菌的生長,從而使得菌種在培養(yǎng)過程中成為優(yōu)勢菌群。
K2培養(yǎng)基(也稱為K2Medium或KingAMedium)是一種常用于培養(yǎng)分枝桿菌屬(Mycobacterium)的培養(yǎng)基,其特點(diǎn)如下:1.**成分**:-K2培養(yǎng)基含有甘油或淀粉作為碳源,蛋白胨作為氮源,以及無機(jī)鹽和生長因子。2.**pH值**:-培養(yǎng)基的pH值通??刂圃?.0左右,這是分枝桿菌生長的pH范圍。3.**選擇性**:-K2培養(yǎng)基含有抗菌劑,如青霉素,這有助于抑制菌的生長,從而為分枝桿菌提供更適宜的生長環(huán)境。4.**應(yīng)用范圍**:-主要用于分枝桿菌的分離和培養(yǎng),特別是對(duì)于結(jié)核分枝桿菌(Mycobacteriumtuberculosis)的培養(yǎng)。5.**培養(yǎng)條件**:-通常在37°C的條件下培養(yǎng),并且需要較長的培養(yǎng)時(shí)間,可能需要幾周才能觀察到明顯的生長。6.**增菌效果**:-K2培養(yǎng)基能夠促進(jìn)分枝桿菌的增菌,有助于從臨床樣本中分離出這些微生物。7.**產(chǎn)品形式**:-通常以干粉形式提供,便于存儲(chǔ)和運(yùn)輸。使用時(shí)加水溶解并調(diào)整pH值后進(jìn)行滅菌。8.**安全性**:-由于分枝桿菌可能具有傳染性,因此在操作K2培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)遵循嚴(yán)格的生物安全措施。營養(yǎng)葡萄糖瓊脂培養(yǎng)皿的用途十分廣,它適用于多種細(xì)菌的綜合生化試驗(yàn),可以用于觀察菌落形態(tài)。SIM動(dòng)力培養(yǎng)基
改良番茄汁瓊脂培養(yǎng)皿的質(zhì)量控制包括對(duì)質(zhì)控菌株的接種和培養(yǎng),以確保培養(yǎng)基的性能和準(zhǔn)確性。枸櫞酸鹽培養(yǎng)基
TSA0.25%青霉素酶培養(yǎng)皿(TryptoseSoyaAgarwithPenicillin)是一種用于微生物檢測的培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**成分組成**:-TSA培養(yǎng)基的主要成分包括胰酪蛋白胨、大豆木瓜蛋白酶消化物、氯化鈉、瓊脂和青霉素酶。具體配方為每升含有胰酪蛋白胨15g,大豆木瓜蛋白酶消化物5g,氯化鈉5g,瓊脂15g,青霉素酶100萬IU,蒸餾水1000ml,pH值調(diào)至7.3±0.2(25℃)。2.**用途**:-該培養(yǎng)基主要用于醫(yī)藥環(huán)境監(jiān)測、空氣沉降菌檢測、設(shè)備、車間、人員、包裝材料等表面微生物的測定。3.**包裝方式**:-通常采用一次性無菌塑料平皿或接觸皿,輻照滅菌,確保無菌性。4.**保存條件**:-保存溫度為2-25℃,避免高溫和直接陽光照射。5.**微生物生長特征**:-不同細(xì)菌在含青霉素酶TSA培養(yǎng)基平板上的生長特征不同。例如,金黃色葡萄球菌會(huì)產(chǎn)生黃色的色素,大腸埃希氏菌形成無色透明大菌落,鼠傷寒沙門氏菌和枯草芽孢桿菌形成無色大菌落,銅綠假單胞菌產(chǎn)生綠色的色素。6.**微生物靈敏度試驗(yàn)**:-接種質(zhì)控菌株后,放置在30-35℃需氧條件下培養(yǎng)18-24小時(shí),進(jìn)行微生物靈敏度試驗(yàn)。枸櫞酸鹽培養(yǎng)基